液基细胞学制片质量控制的方法以及筛查宫颈癌的优点

王立山 车 超 李占林 燕东阳 姜晓静

（辽宁省健康产业集团铁煤总医院，辽宁 铁岭 112700）

宫颈癌是临床中发生率较高的一种恶性肿瘤，在性生活紊乱、多产、早育以及早婚等因素的影响下，宫颈癌的发病表现为年轻化趋势[1]。在女性体检中，宫颈癌及其癌前病变的筛查现阶段已成为了常规检查项目之一，开始受到更多人的关注和重视。传统巴氏涂片法的筛查作用虽然比较重要，然而其灵敏性却较差。液基薄层细胞学检查技术作为现阶段临床中常用的新技术之一，能有效弥补传统巴氏涂片法的缺点，能为诊断宫颈癌及其癌前病变提供科学依据[2]。本研究主要分析了液基细胞学制片质量控制方法以及筛查宫颈癌的优点，具体情况如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择本科室液基细胞学检查标本19000例，均为女性，年龄为20～50岁；将第一次制片登记为制片质量，对阳性诊断情况进行筛查，共101例，包括鳞状上皮内高度病变、宫颈癌。

1.2 方法：①采集标本：在开展液基细胞学检查时，标本采集是非常重要的环节之一，选择宫颈病变的主要发病部位采集标本，选择专用宫颈细胞取样刷，将其尖端置入到宫颈管内，沿相同方向，在宫颈管外口和内口旋转几圈，然后将其取出，并放置在保存液瓶内，通过转动让细胞刷上所附着的细胞落入到保存液瓶内，应采集数量足够的细胞，同时应注意防止过多干扰物，如黏液、血液等。②制备涂片：选择Thinprep2000机器，在固定槽内放置保存液，然后将过滤膜片套上，对玻片进行静电处理，然后利用机器真空虹吸作用将细胞均匀喷涂在玻片上，将玻片自动送入到固定缸内，选择几滴冰醋酸和浓度为95%的乙醇混合，将其当成固定液，进行10 min固定处理。在处理多黏液和多血性标本时，在离心处理后可以加入少量的冰醋酸进行沉淀，选择上段液进行涂片制作。③涂片染色：选择巴氏改良染色法来对涂片进行染色处理，首先应选择浓度为95%的酒精进行10 min固定，然后选择清水进行2 min冲洗，选择Harris苏木素进行3 min处理，用水清洗后应选择浓度为5%的碳酸锂进行2 min返蓝处理，选择浓度为95%的酒精进行1 min处理，选择浓度为5%的桔黄G进行3秒处理，然后选择三缸95%的酒精进行处理，选择EA50染液进行2 min处理，然后分别选择浓度75%的酒精、浓度为95%的酒精、无水酒精、二甲苯进行处理，最后选择中性树胶进行封片处理。 ④细胞学诊断：选择TBS分级系统，也就是正常范围WNL意义不明的不典型鳞状细胞ASCUS、鳞状细胞癌SCC、鳞状上皮内低度病变CIN1、鳞状上皮内高度病变CIN2、CIN3.腺上皮不正常则表示意义不明的腺癌、不典型腺细胞AGUS。

1.3 临床观察指标：将优等片当成标准，对造成片子不满意的原因进行分析，并提出有效的改善对策，加强治疗控制，将阴道镜活检阳性结果当成诊断金标准，对比分析液基细胞学检查阳性结果与HPV DNA检出率、阴道镜活检结果。如果所制作处的片子不存在气泡，层次比较分明，清爽，封胶合理，镜下细胞质、细胞核清晰，非角化细胞和胶质细胞比较清晰，能为诊断提供依据，则判断为优等片[3]。

1.4 统计学分析：选择SPSS软件来分析和统计本实验相关数据，计数资料选择卡方检验，计量资料则选择t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 制片结果观察：全部19000例液基细胞学标本中，18791例标本满足优等片的标准，液基细胞学优片率为98.9%（18791/19000）；209例制片不满意。

2.2 液基细胞学检测的阳性诊断符合率观察：液基细胞学共检出20例SCC，33例CIN3级，48例CIN2级；阴道镜活检阳性检查结果为20例SCC，31例CIN3级，46例CIN2级，4例LSIL。液基细胞学检查SCC的诊断符合率为100.0%（20/20），CIN3级的诊断符合率为93.9%（31/33），CIN2级的诊断符合率为95.8%（46/48）。

2.3 肿瘤相关HPV DNA阳性的检出率观察：在病变严重程度增加的过程中，HPV DNA阳性检出率也随之上升，液基细胞学检查与阴道镜活检诊断基本保持一致，见表1。

表1 肿瘤相关HPV DNA阳性的检出率观察

3 讨 论

本研究中，全部19000例液基细胞学标本中，18791例标本满足优等片的标准，液基细胞学优片率为98.9%（18791/19000）；209例制片不满意。研究结果显示绝大部分液基细胞学标本均能满足优等片标准，能为临床诊断提供科学依据。通过对制片不满意的标本进行分析发现，如果染液使用时间较长或者Harris苏木素返蓝时间较则会导致制片的染色过淡，针对该情况应及时更换染液或者将返蓝时间延长，通过对临床经验进行总结发现，染液在染色500例标本后应及时更换染液。如果标本的染色太浓，则应选择浓度为1%的稀盐酸进行分化，将染色时间缩短后再次进行染色处理。针对黏液和血液过多的标本，在制片前应选择Cytolyt液和离心进行多次处理。如果在进行制片处理时未进行彻底脱水，存在水分则会出现白雾状模糊，则应对脱水酒精进行更换，充分脱水后再进行封片处理[4]。虽然影响液基细胞学制片质量的因素较多，但是在实际的工作中，只要工作人员能保持细致和认真的工作态度，严格遵循相关的操作标准和规范，则能让制片质量显著提高，让临床诊断的准确性提高，为治疗方案的制定提供科学依据。

本研究中，在病变严重程度增加的过程中，HPV DNA阳性检出率也随之上升，液基细胞学检查与阴道镜活检诊断基本保持一致；研究结果显示在对宫颈癌患者进行筛查时，液基细胞学检查具有较高的可信度。宫颈活检作为损伤性检查方法，会对患者造成一定的创伤，恢复时间超过3个月；而液基细胞学检查对患者的损伤则比较轻微，可以将其当成妇科疾病筛查的主要方法。

总之，加强液基细胞学制片质量控制，能让制片质量和宫颈癌诊断有效提高，液基细胞学检查具有较高的敏感性，可以将其作为筛查宫颈癌的常用方法。