妊娠期糖尿病母亲新生儿脐血MMP-9、SICAM-1水平与NBNA的相关性研究

郝丽，殷其改

（连云港市第一人民医院，江苏 连云港 222002）

妊娠合并糖尿病是妊娠期最常见的合并症，孕妇糖尿病严重时可导致胎儿宫内慢性缺血缺氧，导致新生儿脑损伤随之发生。某些炎症因子参与了脑损伤过程，并产生重要作用。研究表明，基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、可溶性细胞粘附分子-1（SICAM-1）在脑损伤中明显增高[1]。本实验监测母亲妊娠期合并糖尿病时婴儿脐血中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、可溶性细胞粘附分子-1（SICAM-1）表达水平改变情况，同时研究其与NBNA相关性，为早期发现新生儿脑损伤并指导临床早期干预提供一定的临床依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 妊娠期糖尿病母亲婴儿及正常对照组婴儿皆出生于连云港第一人民医院产科，其中妊娠期糖尿病母亲婴儿组为实验组33例，同期孕周相似、血糖正常孕妇所分娩的新生儿50例为对照组。排除：①胎盘早剥；②脐带脱垂、真结、扭转；③妊娠合并紫绀型先天性心脏病或伴心功能不全；④较大面积肺部感染；⑤慢性肺功能不全如驼背、哮喘反复发作；⑥重度贫血；⑦妊娠期高血压；⑧妊娠合并慢性肾炎；⑨新生儿严重感染、贫血、先天发育畸形、中枢神经系统畸形、溶血性疾病或先天性心脏疾病。

实验组男婴18例，女婴15例，出生体质量2.54 kg-5.35 kg（3.78±0.64）kg，胎龄37+1周-41+1周（38.57±0.99）周，APgar评分一分钟3分-9分（8.67±1.08）分；对照组男婴27例，女婴23例，出生体质量2.93 kg-4.5 kg（3.45±0.35）kg，胎龄37+4周-41+3周（39.61±1.03）kg，APgar评分一分钟8分-9分（8.94±0.24）分。实验组与对照组比较：性别、出生体质量、胎龄差别无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 实验组及对照组均于生后采集脐静脉血3 mL，立即于室温条件下离心，3,000转/min，离心10 min；分离到血清存放于-70oC冰箱等待统一检测。

1.2.2 MMP-9、SICAM-1的检测 选用上海西唐生物科技有限公司MMP-9、SICAM-1试剂盒，采用酶联免疫双抗夹心法（ELISA法）进行检测，严格按照试剂盒要求方法进行检测。

1.2.3 NBNA测定 NBNA测试由受过专门培训的医生采用鲍秀兰等制定的20项NBNA测定方法进行测评：评价有无脑损伤及脑损伤程度。

表1 实验组与对照组MMP-9、SICAM-1水平比较（Mean±SD,ng/mL）

表2 实验组与对照组NBNA得分比较（M,P25-P75）

1.3 统计数据分析 采用SPSS 17.0版统计软件进行数据统计学分析。MMP-9、SICAM-1用均数±标准差（Mean±SD）表示，组间比较采用矫正t检验；NBNA呈偏态分布，用中位数（M）及四分位数间距（P25-P75）表示，两组比较采用秩和正态近似法检验；实验组MMP-9、SICAM-1与NBNA相关性分析采用Spearman秩相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验组MMP-9、SICAM-1含量较正常对照组升高，差别有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 实验组NBNA得分较对照组降低，差别有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 实验组与对照组MMP-9、SICAM-1分别与NBNA得分进行Spearman秩相关分析，实验组两者均呈负相关，相应秩相关系数rs分别为-0.618；-0.549；对照组无明显相关性。见表3。

3 讨论

妊娠期糖尿病对新生儿造成的诸多不良影响，常表现为新生儿低血糖、生后体质量大、呼吸障碍等疾病，但近年研究显示由于孕妇糖尿病严重时胎盘血管可发生痉挛、硬化、狭窄，导致绒毛间血流灌注不足，严重者可出现胎儿宫内缺血缺氧[2]，进而可造成畸形胎儿、流产、死胎、早产等情况的发生[3]。胎儿宫内缺血缺氧是否会引起胎儿脑损伤并延续至生后，目前尚无较大样本的临床报道。本实验对早期预测妊娠期糖尿病母亲新生儿脑损伤的发生具有重要的现实意义。

多项研究显示，当胎儿或新生儿期缺血缺氧时，坏死的脑细胞释放出一些蛋白质及细胞因子，如基质金属蛋白酶MMP-9、MMP-2、S100B蛋白、SICAM-1、半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、髓鞘碱性蛋白（MBP）等，这些蛋白质及细胞因子可在血液中检测到，研究这些指标有助于了解是否存在脑损伤及脑组织损伤的范围、程度。

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一类结构与氨基酸组成相似，依赖锌离子的蛋白水解酶，迄今为止已经发现了26种。其具有降解多种细胞外基质（extracellular matrx,ECM）成分的功能，具有不同程度的特异性。近年来，MMPs被认为参与了脑卒中后的病理生理过程，脑缺血时MMPs上调并且可以直接导致神经元死亡，而应用广谱MMPs抑制剂或抗体可减少脑梗死的体积。研究发现在短暂局灶性脑缺血鼠模型中MMPs（尤其是MMP-9、MMP-2）的异常活跃直接导致神经元程序性死亡和脑损害，脑缺血缺氧后蛋白溶解酶包括MMPs和纤溶酶等通过降解基底膜成分，使微血管通透性增加，血脑屏障（blood brain barrier,BBB）完整性被破坏。而血脑屏障的开放是脑缺血再灌注后脑水肿、炎性细胞浸润进而导致神经细胞死亡的重要原因。所以，MMPs与脑损伤的关系逐渐为人们所重视，尤其是MMP-9、MMP-2与缺氧缺血性脑损伤关系密切[4]。我们的实验证实，在糖尿病母亲婴儿脐血血清中MMP-9明显升高，且与NBNA得分负相关，说明脑损伤程度越重，升高越明显，因此，MMP-9可作为缺氧后脑损伤的一项监测指标。

细胞粘附分子是细胞合成的，介导细胞间或细胞与细胞基质间接触和结合的分子总称，细胞粘附分子-1（intercellular adhesion molecule,ICAM-1）为90 ku-115 ku单链跨膜糖蛋白，是免疫球蛋白超家族主要成员，中枢神经系统内多种脑损伤中起重要作用。研究表明缺血性脑损伤时，内皮细胞通过上调ICAM-1等粘附分子加重炎症反应，这些粘附分子与血循环中的白细胞结合并促使白细胞进入中枢神经系统，白细胞进入中枢神经系统释放多种炎症介质、蛋白水解酶等细胞毒性物质，导致血脑屏障破坏、脑组织水肿及神经元变性坏死，造成缺血后脑组织严重的病理改变[5]。ICAM-1可以从细胞表面脱落，成为可溶性ICAM-1（SICAM-1），测体液中SICAM-1水平可以反映ICAM-1含量。有文献已报道[6]，严重脑外伤及急性脑梗死患者血清sICAM-1水平明显升高，随病情好转逐渐下调，ICAM-1可能通过募集炎症细胞、释放细胞毒物质等引起脑组织的持续性损伤。本研究表明，在糖尿病母亲婴儿脐血血清中SICAM-1明显升高，且与NBNA得分负相关，说明脑损伤程度越重，升高越明显，因此，SICAM-1可作为缺氧脑损伤的一项监测指标。

综上所述，MMP-9、SICAM-1在妊娠糖尿病母亲所产新生儿脐血中表达明显上升，且与新生儿NBNA评分呈负相关。脐血MMP-9、SICAM-1可作为新生儿脑损伤的指标，通过监测其水平变化推测新生儿脑损伤程度及预后，为更早知晓干预新生儿脑损伤提供无创监测指标，有重要临床意义。但其具体作用机制有待于进一步研究探讨。