市售鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的调查分析

◎ 李 婧，刘 正，张 磊

（天津市乳品食品监测中心，天津 300381）

环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星均是常见的氟喹诺酮类药物，主要对革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌有效[1]，可有效抑制DNA螺旋酶的活性。DNA螺旋酶又称拓扑异构酶Ⅱ，由A、B两个亚基组成四聚体（A2B2），是DNA复制所必需的酶。氟喹诺酮类药物主要作用于A亚基，使DNA无法形成双螺旋结构，导致菌体无法进行DNA复制，从而抑制细胞分裂，达到抑菌的目的[2]。氟喹诺酮类药物作用范围广，抗菌活性强，在现代畜禽养殖业中得到广泛应用。

实际生产中，氟喹诺酮类药物滥用的现象普遍存在，不仅会造成畜禽中毒、人产生过敏反应、病原菌对该类药物产生耐药性等问题，还会造成药物在畜禽产品中残留，药物随畜禽排泄物排出污染环境，严重影响人类健康和生态环境。

基于此，本文对市售鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留情况进行了调查分析，为今后生产、流通环节的市场监管提供参考。笔者分别在A、B、C三地的市场、超市随机抽取共20批次的样品，对鸡蛋中的氟喹诺酮类药物残留进行液相色谱检测，并对结果进行分析。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

岛津LC-20AD液相色谱仪，配RF-20A荧光检测器。磷酸盐提取液：称取磷酸二氢钾6.8 g，加水溶解并稀释至500 mL，用5.0 mol·L-1氢氧化钠溶液调pH至7.0。

磷酸 /三乙胺溶液 0.05 mol·L-1（pH 2.4）：取 85%的磷酸3.4 mL，加水稀释到1 000 mL，搅拌下滴加三乙胺，调pH至2.4。

乙腈（30%）缓冲液：量取30 mL的乙腈和70 mL的磷酸/三乙胺溶液（pH 2.4），混合振荡均匀。

1.2 样品的制备与净化

取适量新鲜的鸡蛋，将蛋清和蛋黄搅拌均匀，称取2 g试料，置于匀浆杯中，加磷酸盐提取液2.0 mL，搅匀振荡混合10 min，5 000 r·min-1离心10 min。上清液转入另一离心管中。用磷酸盐提取液2.0 mL洗残渣，搅匀，振荡，离心。合并上层清液于同一离心管中，加入10 mL水饱和的正己烷，振荡5 min，5 000 r·min-1离心10 min，用吸管将上层正己烷吸出弃去，将絮凝状固体吸出并转移至另一离心管中，用2.0 mL磷酸盐提取液清洗絮凝状固体，振荡，离心，清液与之前的下层提取液合并。在下层溶液中再加入10 mL水饱和的正己烷，振荡，离心。弃去上层正己烷，下层为备用液。

C18固相萃取柱依次用5 mL乙腈，5 mL乙腈（30%）缓冲液和5 mL磷酸盐提取液润洗。备用液过柱，用5 mL水洗，真空抽干。加1.00 mL流动相洗脱，真空抽干，收集洗脱液作为试样溶液，溶液过滤膜后，供高效液相色谱分析。在淋洗和洗脱过程中流速控制在1 mL/min左右。

1.3 液相色谱工作条件

色谱柱：C18，250 mm×4.6 mm，粒径5 μm；流动相：0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺溶液-乙腈（81+19），用前过0.45 μm滤膜；流速：1.0 mL·min-1；检测波长：激发波长280 nm，发射波长450 nm；进样量：20 μL。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

在本次检测过程中，选取了5个浓度水平做标准曲线，标准曲线方程见表1。

表1 环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星标准曲线表

2.2 质控样品的加标回收实验

根据实际检测结果，设计了3个浓度水平的加标回收实验作为检测过程的质量控制，回收率见表2。

表2 质控样品加标回收结果表

2.3 检测结果

随机抽检的鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留检测共涉及20批次样品，检测结果显示，在这次随机抽样检测中，A、B、C三地市售鸡蛋均没有上述4种氟喹诺酮类药物检出，符合国标规定的不得检出的要求。见表3。

表3 鸡蛋中氟喹诺酮类药物检测结果统计表（抽样批次/检出批次）

3 讨论

氟喹诺酮类药物在动物及人体蓄积到一定程度时，会产生不良反应和副作用，危害动物和人体健康[3]。长期食用氟喹诺酮类药物残留超标的畜禽产品可造成人体长期吸收该类药物，药物蓄积到一定程度时就会对人体产生直接危害，引发不良反应。氟喹诺酮类药物残留不但对人体有直接的危害，而且会使致病菌和人体的耐药性逐渐增强，不利于该类药物对人类相关疾病的治疗[4]。

目前，我国对氟喹诺酮类药物残留检测的研究还处于发展阶段，随着研究的深入，今后氟喹诺酮类药物残留检测技术奖逐步向更高灵敏度、更方便于现场大规模快速筛选和多残留组分同时检测等方向发展。