胶乳凝集比浊法检测卡马西平血药浓度的性能评价

许俊，邹勇

(进贤县人民医院，江西 南昌331700)

卡马西平(CBZ)是一种抗癫痫药物，在临床上主要用于治疗三叉神经痛、部分性癫痫发作、全身性强直阵挛发作等疾病[1-5]。CBZ具有治疗指数范围窄，吸收缓慢，个体差异大，易发生毒性反应等特点[6-9]。为保证其血药浓度，并减轻毒副作用，CBZ血药浓度监测已经成为临床合理用药的重要依据。本文即探讨胶乳凝集比浊法检测CBZ血药浓度的临床实用性，以求建立符合县级基层医院全自动生化分析仪可开展的药物浓度监测方法，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 收集我院服用CBZ患者的血清标本105份，其中包括小于治疗浓度区间下限标本为23份，治疗浓度范围以内标本为62份，大于治疗浓度区间上限标本为20份，注意排除溶血等因素造成的不合格标本。

1.2 仪器与试剂 OLYMPAS AU2700全自动生化分析仪，日本积水医疗株式会社胶乳凝集比浊法CBZ检测试剂盒和校准品；Abbott AxSYM荧光偏振免疫分析仪以及配套CBZ检测试剂盒。

1.3 方法

1.3.1 线性范围验证 使用高值标本26.5μg/ml与低值标本0.32μg/ml按不同比例混合血清，最终得到11个浓度梯度。各浓度标本混匀后连续测定2次，计算均值。根据理论稀释比、实测浓度均值拟合线性曲线。

1.3.2 重复性试验 选择高、中、低等3种浓度水平的伯乐质控品进行批内、批间重复性试验，其中批内重复性试验是将3种浓度水平质控品连续重复检测20次，批间重复性试验是将3种浓度水平质控品每天固定时间检测一次，连续20d。计算变异系数（CV）。

1.3.3 相关性分析 取100份临床标本 （CBZ浓度覆盖线性范围）分别用本法（Y）与免疫荧光偏振法（X）同时测定，分析检测结果的相关系数r值。

1.3.4 回收试验 在19体积的5.00μg/ml CBZ标准液中分别加入 1体积的 40.00μg/ml、60.00μg/ml CBZ标准液，进行回收试验。每个样本测定3次取平均值，计算回收率。

1.3.5 干扰试验 在19体积的5.00μg/ml CBZ标准液中分别加入1体积的三酰甘油（1.00mmol/L、5.00mmol/L）、 结合胆红素（10.00mg/dL、20.00mg/dL）、溶血血红蛋白（100mg/dL、500mg/dL）和抗坏血酸（10.00mg/dL、50.00mg/dL）。每个样本测定 3 次取平均值，并计算理论值与实测值的差异。

2 结果

2.1 线性范围 理论稀释梯度与实测浓度均值之间呈良好的线性关系（r=0.99，P＜0.01），因此胶乳凝集比浊法检测CBZ血药浓度的线性范围为0.32～26.50μg/ml，见图 1。

2.2 重复性 对靶值浓度分别为2.50、8.50、18.00 μg/ml的3种水平质控品进行批内、批间重复性试验，批内重复性试验CV分别为3.43%、3.52%、3.47%；批间重复性试验CV分别为4.45%、4.35%、4.29%，即批内、批间重复性试验CV均＜5%，可判定重复性结果良好。结果见表1。

表1 重复性试验结果表

图1 线性范围验证

2.3 相关性分析 分别用胶乳凝集比浊法和免疫荧光偏振法试剂对100份不同CBZ浓度的标本进行检测，胶乳凝集比浊法、免疫荧光偏振法检测结果分别为（13.25±11.73）μg/ml和（13.12±11.89）μg/ml，差异无显著性（P＞0.05），两种方法检测结果的相关系数 r=0.967（P＜0.05）。 见图 2。

图2 两种检测方法的相关性结果

2.4 回收试验 在19体积的5.00μg/ml CBZ标准液中分别加入 1 体积的 40.00μg/ml、60.00μg/ml CBZ标准液，其回收率分别为101.5%、97.8%，平均回收率为99.65%，比例系统误差仅0.035%，符合要求。

2.5 干扰试验 三酰甘油浓度达到5.00mmol/L、结合胆红素浓度达到20.00mg/dL、溶血血红蛋白浓度达到500mg/dL、抗坏血酸浓度达到50.00mg/dL时实测结果与理论值差异均低于5%，上述浓度之内的干扰物质对本方法的检测结果无明显干扰。结果见表2。

表2 干扰试验结果

3 讨论

治疗药物检测（TDM）是应用现代分析技术测定患者体液中的药物及其代谢产物浓度，以优化设计或调整给药方案，以实现个体化治疗，提高疗效，减免毒副反应的药学技术方法[10]。通过TDM的个体化给药，不仅可使癫痫发作的控制率从47%提升到74%，而且还可以改善患者的治疗依从性，降低医疗费用和医疗资源的使用，提高治疗成功率[11-13]。目前TDM多采用高效液相色谱、荧光偏振免疫分析等方法，其对应的仪器平台分别是高效液相色谱仪和免疫分析仪，但是县级及以下医疗单位高效液相色谱仪和免疫分析仪的普及率不高，从而限制了TDM的临床应用[13-17]。

本研究表明，使用胶乳凝集比浊法在生化仪器上进行CBZ检测，可以达到临床使用要求。相对于HPLC和化学发光方法，生化分析方法具有分析周期短、操作简便、自动化程度高、性能稳定等特点，可用于急诊和大样本量检测，而且生化分析方法不需要专用仪器、试剂，可以应用于各种全自动生化分析仪，便于各类型医院开展TDM项目，所以应用于生化分析仪的胶乳凝集免疫比浊法是TDM技术的一大创新。

本方法适用于基层县级医疗机构开展CBZ药物浓度检测，其高效率、低成本的特点同时也提升了县级基层实验室检验技术水平、科研能力，并可有效地提高检验效率，提高临床用药的科学性、安全性、合理性，从而更好地服务于临床，保障人民群众的身体健康。