晕可平糖浆的质量标准研究

江苏省盐城市食品药品监督检验中心（224002）丁爱华 倪萍 支荣荣

晕可平糖浆由赭石、夏枯草、车前草、法半夏4味药组成，具有潜阳镇肝的作用，用于内耳眩晕症，头晕目眩症。现行标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第2册，质量标准较为简单。为了进一步完善该品种质量标准，本研究采用薄层色谱（TLC）法对制剂中的夏枯草和车前草进行了定性鉴别，同时采用高效液相色谱（HPLC）法测定了夏枯草中迷迭香酸的含量。

1 仪器与试剂

美国Agilent1260高效液相色谱仪，瑞士CAMAG薄层成像系统，XS205电子天平（梅特勒托利多公司），B3200-T超声波清洗器（上海必能信超声有限公司），电热恒温水浴锅（上海苏达实验仪器有限公司），硅胶G薄层板（50mm×200mm，青岛海洋化工厂分厂）。

附图 晕可平糖浆HPLC色谱图。A：对照品；B：供试品；C：阴性对照；1：迷迭香酸

夏枯草对照药材（批号120993-2 0 1 1 0 5），车前草对照药材（批号121543-200501），迷迭香酸对照品（含量：98.8%，批号111871-201203）均购自中国药品生物制品检验所。晕可平糖浆为市售A、B两个厂家，产品批号分别为1409121，61140401。所用试剂甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层鉴别[1][2]

2.1.1 夏枯草的TLC鉴别 取本品10mL，加水10mL，用盐酸调节pH值至2～3，转移至分液漏斗中，乙醚振摇提取3次，每次20mL，合并乙醚提取液，挥去乙醚，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取夏枯草对照药材2g，加水煎煮1h，滤过，滤液浓缩至20mL，自“用盐酸调节pH值”起，同法制成对照药材溶液。按晕可平糖浆生产工艺及上述样品处理方法制备缺夏枯草阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010版一部附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液2μL，对照药材溶液及阴性对照溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸-水（7∶2∶0.5∶0.3）为展开剂，展开后，取出，晾干，喷以2%三氯化铁溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与夏枯草对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺夏枯草阴性对照没有斑点。

附表 加样回收试验(n=6)

2.1.2 车前草的TLC鉴别 取夏枯草鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。取车前草对照药材2g，加水煎煮1h，滤过，滤液浓缩至20mL，自“用盐酸调节pH值”起，同法制成对照药材溶液。按晕可平生产工艺及上述样品处理方法制备缺车前草阴性对照溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取供试品溶液、车前草对照药材溶液及缺车前草阴性对照溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺车前草阴性对照没有斑点。

2.2 含量测定[2]

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取迷迭香酸对照品适量，加流动相制成每1mL含10μg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品2mL，置25mL量瓶中，加流动相20mL，超声20min，用流动相定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 色谱条件 色谱柱为CAPCEll PAK C18柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相为甲醇-0.5%甲酸（39∶61）；流速为1.0mL·min-1；柱温为30℃；检测波长为330nm，进样量为20μL。理论板数按迷迭香酸峰计算，应不少于3000，见附图。

2.2.4 空白试验 空白溶液的制备是除夏枯草以外，按照处方比例称取其他药材，按其制备工艺制成空白制剂，再按供试品溶液的制备方法制备并测定，结果空白溶液在与迷迭香酸对照品相同保留时间处未出现色谱峰，故认为无干扰。

2.2.5 线性关系考察 分别精密吸取9.920μg·mL-1的迷迭香酸对照品溶液5，10，15，20，25，30μL进样，照上述色谱条件测定，以峰面积Y为纵坐标，以迷迭香酸进样量X为横坐标，得回归方程Y=3225.46X+4.79（r=0.9999），表明迷迭香酸在0.050～0.298μg线性关系良好。

2.2.6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液20μL，重复进样6次，结果峰面积的RSD0.07%，表明仪器精密度良好。

2.2.7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液20μL（批号1409121），按上述色谱条件分别在0、3.5、7、12、18、24h时测定迷迭香酸的峰面积。结果RSD0.70%，表明供试品溶液在24h内稳定。

2.2.8 重复性试验 精密称取同一批样品（批号1409121），分别制备6份供试品溶液进行测定，结果迷迭香酸平均含量为92.33μg·mL-1，RSD为1.00%，表明重复性良好。

2.2.9 加样回收率试验 取同一批次的晕可平糖浆（批号1409121，含迷迭香酸92.52μg·mL-1）6份，精密量取1.0mL，置于25mL容量瓶中，分别精密加入迷迭香酸对照品溶液（浓度为9.920μg·mL-1）10.0mL，按2.2.2项下方法制备加样回收供试品溶液，按2.2.3项下色谱条件分析测定，计算回收率，结果见附表。

2.2.10 样品测定 取两个厂家的样品，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.2.3色谱条件进行测定，结果迷迭香酸的含量分别为92.52，28.83μg·mL-1。

3 讨论

3.1 在车前草鉴别试验中，选用展开剂时，采用了氯仿-甲醇（20∶1）、氯仿-甲醇-甲酸（20∶1∶0.5）、氯仿-甲醇-甲酸（15∶1∶0.5）和氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）作为展开剂，结果以氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）为展开剂，分离效果好，斑点清晰。

3.2 在含量测定试验中，分别选用甲醇、乙醇、水、50%甲醇和流动相对供试品进行提取，结果表明甲醇和乙醇的提取效果不佳，水、50%甲醇、流动相的提取率差异不大，考虑到流动相配制样品能避免基线不稳造成无法判断杂质峰，因此提取溶剂选择流动相。

3.3 夏枯草和车前草药材中均含有齐墩果酸和熊果酸，前期采用HPLC法测定了市售糖浆剂中齐墩果酸和熊果酸的含量，分别为0.16，1.66μg·mL-1，含量较低，故未以齐墩果酸和熊果酸作为含量测定项，与林萍等[3]研究报道一致。夏枯草主要水溶性成分为迷迭香酸[4]，故作为本制剂的一项定量指标。不同厂家样品的迷迭香酸含量存在较大差异，含量限定范围还有待进一步研究。