γ-干扰素释放试验与肺结核中医证候的研究分析

童凤军 胡驾云 冯 刚

浙江省青春医院 浙江 杭州 310016

本文通过检测人体内分泌的γ-干扰素，探讨其与肺结核诊断及中医辨证分型之间的关系，以期为肺结核的诊断和证侯分析提供一定的参考指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2015年1月至2016年12月本院住院确诊肺结核的病人115例，其中男92例，女23例，年龄17～63岁。30例否认结核暴露接触史的单纯呼吸系统感染者作为对照组。肺结核诊断参考《临床诊疗指南：结核病分册》（2009版）。肺结核的中医辨证分型参考《中医内科学》（2003版）。115例肺结核患者中肺阴亏损证者35例，其中男28例，女7例，年龄17～52岁，平均35.46±10.16岁；虚火灼肺证者32例，其中男26例，女6例，年龄19～63岁，平均33±10.96岁；气阴耗伤证者28例，其中男23例，女5例，年龄19～61岁，平均38.10±14.25岁；阴阳虚损证者20例，其中男15例，女5例，年龄22～55岁，平均39.47±11.19岁。四组年龄及性别比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具可比性。

1.2 γ-干扰素释放试验检测：具体如下。

1.2.1 标本采集：用肝素抗凝的真空采血管采集不低于4ml的全血标本，采集后的全血标本2小时之内加到培养管中进行培养。

1.2.2 γ-干扰素释放试验检测方法：采用北京万泰生物药业股份有限公司提供的结核感染T细胞检测试剂盒（批号20040097），按以下步骤检测：①γ-干扰素的体外释放：在2小时内将全血标本分装入3种培养管中培养22小时，培养后的培养管离心后取上清液进行ELISA检测。②γ-干扰素的定量检测：用新鲜去离子水或注射用水溶解校准品，得到400pg/ml的浓度，然后用校准品稀释液稀释后分别得到200pg/ml、100pg/ml、50pg/ml、25pg/ml、12.5pg/ml。对受试者的培养血浆、校准品及空白对照分别编号，在相应孔中加入样品稀释液20μl及待测样品50μl，用封板膜封板后，置37℃温育60分钟，每孔加入酶标示剂50μl后再次封板膜封板，置37℃温育60分钟。温育后洗涤5遍，每孔加入显色剂A、B各50μl，37度避光显色15分钟，再予每孔加终止液50μl，10min内用酶标仪检测在波长450nm下经空白调零后的各孔A值。以测得值大于14pg/ml作为阳性表达，小于14pg/ml作为阴性表达。

1.3 统计学方法：采用SPSS19.0统计软件进行分析，各组阳性率比较采用χ2检验，各组检测值比较采用t检验及单因素方差分析。P＜0.05认为有统计学意义。

2 结果

2.1 两组γ-干扰素释放试验表达比较：结核组阳性数92例，阳性率80.0%，检测值134.69±17.05；对照组阳性数8例，阳性率26.7%，检测值22.37±6.63。阳性率及检测值明显高于对照组（P＜0.05）。

2.2 肺结核不同证型γ-干扰素释放试验阳性率和检测值比较：见表1。

表1 γ-干扰素释放试验在肺结核不同证型中阳性率和检测值比较

3 讨论

肺结核，中医称之为肺痨，其致病因素，不外内外两端。外因系指痨虫传染，内因系指正气虚弱，两者往往互为因果。肺痨的中医证型共分肺阴亏损、虚火灼肺、气阴耗伤及阴阳虚损四证。γ-干扰素释放试验被认为是近年来结核病诊断方面的一个重大突破，通过定量检测γ-干扰素含量或计数分泌γ-干扰素的T淋巴细胞数量来判断是否存在结核分枝杆菌特异性活化的效应T细胞，从而判断是否存在结核分枝杆菌感染。本研究结果显示，γ-干扰素释放试验在肺痨患者中阳性率及检测值均有较高表达，而在非肺痨患者中表达明显下降，提示γ-干扰素释放试验在肺痨患者中有较高的敏感性和特异性，可以作为诊断肺痨的一个重要参考指标。在肺痨四个中医证型中，阳性率和检测值在肺阴亏损、虚火灼肺、气阴耗伤和阴阳虚损四组中依次下降，其中肺阴亏损组和阴阳虚损组表达差异有显著性（P＜0.05）。考虑从肺痨疾病进程来看，肺阴亏损证多在肺痨初期，病损主要在肺；虚火灼肺证主要在肺痨中期，病程较长；气阴耗伤证多见于肺痨中后期，病程较久，阴伤气耗，肺脾同病；阴阳虚损证则为肺脾同病、气阴耗伤的进一步发展。故γ-干扰素释放试验随着肺痨的病程而有所下降。考虑病人在肺痨疾病后期，正气虚弱，机体免疫功能下降，活化的效应T细胞数减少，故γ-干扰素释放水平下降。从中医治疗来看，肺痨患者疾病前中期，应该以滋阴润肺、降火杀虫为主，而在疾病后期，正气虚弱，则应该以益气养阴、滋阴补阳为主。故临床结合肺结核患者的γ-干扰素释放试验，为肺结核中医证侯分型提供参考，从而有利于制定正确的治疗方案。