尿沉渣染色在尿全自动分析仪人工复检中的应用
2018-06-15杜双迎
杜双迎
(吉林省吉林市人民医院,吉林 吉林 132001)
尿液中有很多有形成分,不同的染料会使不同的有形成分着色,这样,就可以快速准确的鉴别这些成分[1]。目前实验室尿沉渣检查基本以流式细胞仪及镜下形态学检验为主,但是两种方法都存在一定误差,必要时都需要人工复检[2]。在复检的过程中,一些有形成分难以鉴别。尿液中的有形成分中,难以鉴别的是红细胞与一些结晶,白细胞与移行上皮细胞等,它们的大小相似,形态结构也难以区分,如果能找到一种适合的染料,快速将有形成分染上不同的颜色,达到准确判定的目的[3-4]。本项目旨在于筛选不同的染料,将一些难以辨别的成分区分开来,及时,准确的发出报告,在提高实验室效率的同时,也能为临床提供科学的诊断依据,更好的为患者服务。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与对象:仪器:OLYPUMS显微镜,朗迈尿全自动分析仪,10 mL尿沉渣离心管。染色试剂:尿沉渣Sternheimer-Malbin改良染色液(S-M法,批号408111)、Sternheimel染色液(S法,批号409111)、阿利新兰-中性红染色液(阿-中法,批号419321)。取80份人工复检异常尿液标本10 mL置入尿沉渣离心管中,其中男性标本45例,女性标本35例。
1.2 检测方法:所有尿液标本进行400转/分离心5 min,弃上清液,取下层尿沉渣充分混匀(约0.2 mL),进行尿沉渣染色分析。所有检测由本科室专业检验师负责检验,每份标本都在10 min之内检测完毕,每日质控均在受控范围。记录不同染色时间,同时进行染色效果的比较,根据尿沉渣染色结果评判标准对结果进行判定。
1.3 统计学方法:选择SPSS20.0软件进行数据分析与记录,P<0.05为差异显著。
2 结 果
2.1 染色时间对比:S-M、S、阿-中染色法最佳时间都为2~5 min,染色0~2 min与5~8 min的效果为良,对比差异无统计学意义(P>0.05)。具体见表1。S染色法背景清晰或有少量杂质分布;S-M染色法背景的清晰度与S法的染色效果相近;阿-中染液染色背景杂质较多,有形成分结构模糊。
2.2 半定量结果对比:半定量结果显示S与S-M染色法对比差异无统计学意义(P>0.05),S、S-M染色法与阿-中染色法比较差异明显(P<0.05)。见表2。
表2 不同尿沉渣染色在尿全自动分析仪人工复检的半定量结果对比(n)
3 讨 论
尿液分析是三大临床检验常规之一,分析的内容包括干化学检查、外观及物理性状检查、显微镜检查等。随着医学技术的发展,尿全自动分析仪得到了广泛应用,能分析尿液中的各种指标,可随检验科的不同需要而修改,从而指导进行治疗。
尿液沉渣显微镜检查是尿全自动分析重要内容之一,也是泌尿系统鉴别诊断、病情判断、疾病诊断、疗效观察的金标准,也是经典手工法[5]。由于尿沉渣中有形成分的多样性和对染料亲和力的不同,导致尿沉渣在不同的染色方法下的特征也各不相同,为此在临床上要合理选择染色方法[6]。不同的染料着色的重点不同,理论上讲结晶不着色,只有由蛋白质组成的各种细胞才能着色,而且不同的染料染后的颜色也不同,如何能将不同成分着上不同的颜色是研究的难点。
S-M染色法就是采用结晶紫一沙黄染色,染色方便,染料价廉易得,可进一步提高管型、红细胞、白细胞的鉴别,白细胞经S-M染色后,细胞核为淡蓝或蓝色,细胞质不染色或淡蓝色,是尿液常规沉渣染色检查的常用方法。S染色法中的胞质及RNA被派洛宁染成红色,细胞核及管型基质可被阿尔新蓝染成蓝色,易于镜下观察[7]。但是上述两种方法在检测中都存在红细胞染色欠佳等缺陷。本研究显示S-M、S、阿-中染色法最佳时间都为2~5 min,染色0~2 min与5~8 min的效果为良,对比差异无统计学意义(P>0.05);S染色法背景清晰或有少量杂质分布;S-M染色法背景的清晰度与S法的染色效果相近;阿-中染液染色背景杂质较多,有形成分结构模糊。通过具体分析,阿-中染色法染色5 min后有大量褐色集结,致使识别和分类困难;S-M与S法的背景较清晰,但有形成分识别困难,结构模糊。
表1 不同尿沉渣染色在尿全自动分析仪人工复检中的应用(n=80)
由于尿沉渣中各种成分的复杂性、易变性、多样性,对于检测的要求更高。尿沉渣染色显微镜检查是目前辅助临床医师诊断泌尿系统疾病的主要方法,临床上合理选择染色方法具有重要的现实意义[8]。本研究半定量结果显示S与S-M染色法对比差异无统计学意义(P>0.05),S、S-M染色法与阿-中染色法比较差异明显(P<0.05)。结果说明尿沉渣S-M染色法、S染色法染色效果最佳,更适合于临床尿沉渣染色显微镜检查。不过在临床检查中,各种尿液的pH不同,试验时要进行调节;尿液必须新鲜,不同的染色液要注意其pH变化,保障染色质量。当尿沉渣染色法的检测结果与其他方法不一致时,需要密切结合临床资料,才能得到客观、准确的评价。对于可疑或确诊为肾病者进行诊断和观察疗效时,必须采取传统手工法检测,以减少漏诊和误诊;采集标本后30 min内要送至检验室,采集过程要严格遵守操作规程避免标本被污染。总之,尿沉渣染色在尿全自动分析仪人工复检中的应用有很好的效果,特别是S、S-M染色法对于不同细胞的形态、结构清晰易于识别,有很好的临床应用价值。
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