麸炒炮制对薏苡仁中甘油三油酸酯含量的影响*

赵丽沙王娜妮董宇蒋桂池许平翠寿旦#

1 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

2 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

3 浙江景岳堂药业有限公司 浙江 绍兴 312025

薏苡仁为禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobi L.var.ma-yuen(Roman)Stapf的干燥成熟种仁[1]。作为中药始载于《神农本草经》，列为上品，其味甘、淡，性凉，归脾、胃、肺经，具有利水渗湿、健脾止泻、除痹、排脓、解毒散结之功效，可用于水肿，脚气，小便不利，湿痹拘挛，脾虚泄泻，肺痈，肠痈等症[2-3]。薏苡仁作为药食两用的药材，用途广泛，文献记载其炮制方法有清炒、麸炒、土炒、盐炒、糯米炒、盐汤煮、姜汁拌炒等[4]，目前市场上各种薏苡仁炮制品均有使用，而不同的炮制品临床药效有所区别，原因可能是由炮制引起化学成分的变化，因此研究炮制对薏苡仁成分的影响具有重要意义。薏苡仁药材中主要含有油、脂等化学成分[5]，其中甘油三油酸酯是2015版《中国药典》规定检测成分。本研究通过比较清炒、清麸炒、1/3蜜炙麸皮+2/3麸皮炒、蜜炙麸皮炒等不同麸炒炮制方法对薏苡仁中甘油三油酸酯含量的影响，期望为薏苡仁麸炒制品的质量研究提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器：20A-VP高效液相色谱仪(日本岛津)；AlltechELSD检测器(日本岛津)；SIL-20A自动进样器(日本岛津)；AE400电子天平(瑞士梅特勒)；KQ400超声提取器(江苏昆山)。

1.2 材料：对照品甘油三油酸酯(批号：111692-201605)，购自中国食品药品检验研究院，乙腈（德国默克）、二氯甲烷（阿拉丁）为色谱纯。实验收集不同来源薏苡仁样品共10批密封保存。

2 方法与结果

2.1 薏苡仁炮制：①净薏苡仁：取原药材，除去皮壳及杂质，筛去灰屑。②清炒薏苡仁：取净薏苡仁，置预热炒制容器内，用文火加热，炒至表面微黄色，略鼓起，具香气时，取出晾凉。③清麸皮炒薏苡仁：先将炒制容器预热至200℃，加入麸皮，起浓烟后投入薏苡仁，温度最低点138℃，回升至158℃出料，冷却，筛去麸皮。④1/3蜜炙麸皮炒薏苡仁：先将炒制容器预热至200℃，加入1/3蜜炙麸皮和2/3麸皮，浓烟后投入薏苡仁，温度最低点138℃，回升至158℃出料，冷却，筛去麸皮。⑤蜜炙麸皮炒薏苡仁：先将炒制容器预热至200℃，加入蜜炙麸皮，浓烟后投入薏苡仁，温度最低点138℃，回升至158℃出料，冷却，筛去麸皮。

2.2 色谱条件：色谱柱：资生堂Capcell Pak C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-二氯甲烷=60：40；柱温：30℃；流速：0.5ml/min；蒸发光散射检测器参数：飘移管温度70℃，载气流速2.0L/min。

2.3 对照品溶液的制备：精密称取甘油三油酸酯对照品5.0mg，置5ml容量瓶，加流动相制成1.0mg/ml的对照品溶液。

2.4 供试品溶液的制备：精密称取薏苡仁粉末1.0g（过60目筛），置具塞锥形瓶中，精密加入流动相50ml，称定重量，重浸泡2h，超声提取（功率450W，频率28kHz）30min，放冷，称定重量，用流动相补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.5 方法学考察：分述如下。

2.5.1 线性考察：取甘油三油酸酯储备液，加流动相逐级稀释，制成5个不同浓度梯度对照品溶液。按方法与结果“2.2”项下色谱条件进样，以对照品浓度(mg/ml)对数值为横坐标，峰面积对数值为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程logY=1.8615logX+7.2194。

2.5.2 精密度试验：取“2.3”项下对照品溶液，按方法与结果“2.2”项下色谱条件连续进样6次，计算各甘油三油酸酯峰面积RSD为1.45%，结果表明仪器精密度良好。

2.5.3 重复性试验：取同一批薏苡仁样品（浙江20170503）6份，按“2.4”项下制备，按方法与结果“2.2”项下色谱条件进样，计算各甘油三油酸酯峰面积RSD为1.48%，结果表明此方法重复性良好。

2.5.4 稳定性试验：取按“2.4”项制备的供试品溶液，按方法与结果“2.2”项下色谱条件分别在0，2，4，6，8，12，24h各进样1次，计算甘油三油酸酯峰面积RSD为1.84%。结果表明供试品溶液在24h内稳定。

2.5.5 加样回收试验：取同一批薏苡仁样品（浙江20170503）6份，按“2.4”项下制备分别精密加入等倍的对照品，按“2.2”项下色谱条件进样，计算加样回收率，甘油三油酸酯回收率为98.26%，RSD%为1.71%。

2.6 不同麸炒炮制对薏苡仁中甘油三油酸酯的影响：平行取同一批次，五种不同炮制方法制备的薏苡仁炮制品各3份（不同炮制方法制备的饮片样品见图1），按“2.4”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件测定。HPLC结果见图1，样品来源和含量测定结果见表1。

表1 薏苡仁样品来源和甘油三油酸酯含量测定结果

通过含量测定结果可知，不同辅料麸炒后薏苡仁中甘油三油酸酯的含量均有增加，其中以1/3蜜炙麸皮+2/3麸皮炒制后含量增加最为显著。

图1 薏苡仁不同麸炒炮制方法HPLC色谱图

3 讨论

本实验参照2015版《中国药典》一部中薏苡仁的含量测定方法，选择蒸发光散射检测器进行检测，通过比较流动相乙腈-二氯甲烷比例（80:20、75:25、70:30、65:35、60:40、55:45），确定乙腈-二氯甲烷（60:40）峰形最佳。观察薏苡仁净制品及其不同麸炒炮制品色度（图1），净制品为乳白色，清炒品为乳黄色，麸炒品为米黄色，蜜炙品1和蜜炙品2为深黄色，表明不同的麸炒炮制辅料对炮制品的外观颜色有一定的影响。由含量测定结果可知，1/3蜜炙麸皮+2/3麸皮炒对薏苡仁甘油三油酸酯含量影响最大。

通过比较薏苡仁生品和炮制品色谱图，结果显示各成分相对峰面积RSD均大于10%，这表明生品与炮制品在成分含量上存在一定的差异。为明确薏苡仁炮制前后的差异成分，项目组将进一步采用液-质等分析方法对差异化合物进行表征。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2015：376-377.

[2]黄富远.不同炮制方式对薏苡仁品质的影响[J].浙江中医杂志，2009,44(6)：462.

[3]单国顺,步显坤,孙媛媛,等.麸炒薏苡仁炮制工艺的优化[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(6)：42-45.

[4]袁桂平,姜军华,眭荣春.HPLC法测定薏苡仁饮片中甘油三油酸酯的含量[J].江西中医药大学学报,2013,25(1)：52-54.

[5]Wu H,Wald bauer K,Tang L,et al.Influence of vinegar and wine processing on the alkaloid content and composition of the traditional Chinese medicine Corydalis Rhizoma[J].Molecules,2014,19(8)：11487-11504.