桃仁提取液对家兔小肠收缩运动影响的研究*

吴悦 钟雯雅 倪陆桥 俞婧怡 陈越 卢昌恒 黄亦辉 沈雨莎 李天一 饶芳 储利胜 潘小平

浙江中医药大学第二临床医学院 浙江 杭州 310053

桃仁为蔷薇科植物桃或山桃的种子，具有活血祛瘀和润肠通便之功效［1］。现代研究亦表明，桃仁具有抗凝血、抗菌、活血化瘀等作用，临床上可用于治疗痛经、血滞经闭、瘀血肿痛、肠燥便秘等多种疾病。《医学启源》记载桃仁“治大便血结”，桃仁既能润肠通便，又善于活血化瘀。《金匮要略》下瘀血汤中用桃仁以活血润燥［2］。《世医得效方》采用五仁丸（包括桃仁、杏仁等组成）治疗津枯便秘以及由桃仁、杏仁组成的民间治便秘验方。桃仁具有通滞开结功效，宜用于瘀热内结或气滞血瘀之便秘，其性质平和，为习惯性便秘之良药，提示桃仁对胃肠平滑肌收缩运动可能有兴奋作用［3］。关于桃仁的组成成分及药理作用已经得到很多阐明，但是，桃仁是否影响小肠收缩运动以及收缩幅度，未见报道。本文以家兔离体小肠为实验对象，探索桃仁提取物对家兔离体小肠收缩运动的影响，以便探索其初步机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物：健康家兔4只（购买于浙江中医药大学动物实验中心），实验前禁食12h。

1.2 主要仪器设备：RM6240生物信息采集处理系统、HSS-1（B）型恒温水浴槽、麦氏槽均为成都仪器厂生产；50521张力换能器由北京新航兴业科贸有限公司生产。

1.3 实验试剂：台氏液：氯化钠8mg/ml、氯化钾0.2mg/ml、氯化钙0.2mg/ml、氯化镁0.1mg/ml、碳酸氢钠1mg/ml、磷酸二氢钠0.05mg/ml、葡萄糖1mg/ml，pH8；硫酸阿托品注射液（批号：H12020384，天津金耀药业有限公司）；乙酰胆碱。

1.4 桃仁及水提取液制备：称取新鲜桃仁100g，粉碎为粗末，直径约为2mm，加水1000ml，浸泡30min，煮沸1h，过滤后滤渣加水500ml，煎煮30min，过滤。合并滤液，浓缩至200ml备用。桃仁水提取液的浓度为0.5g/ml，4℃冰箱留存备用。实验时加入台氏液配成所需工作液浓度。

1.5 实验方法与步骤：分述如下。

1.5.1 家兔离体肠肌的制备：取健康家兔，实验前禁食12h，采用20%氨基甲酸乙酯,以5ml/kg剂量麻醉家兔，立即打开腹腔并采取十二指肠空肠肠段，迅速置入盛有氧饱和台氏液的培养皿中，清洗肠内容物，剪去肠系膜，肠管剪成2～3cm的小段，两端各穿一线并打结备用。在麦氏浴槽中，加入37℃台氏液。连接好加氧泵以及通气玻钩并供氧，每秒钟1～2个气泡。水浴温度37±0.5℃。

1.5.2 离体小肠收缩运动的记录：待肠段运动稳定后，用RM6240生物信息采集处理系统、及张力换能器记录肠肌收缩运动，观察桃仁水提取液对离体小肠收缩运动，以及观察在乙酰胆碱、阿托品作用下桃仁水提取液对家兔离体小肠收缩运动的影响。设立正常肠段组（正常组）、桃仁水提取液组、乙酰胆碱+桃仁水提取液组、阿托品+桃仁水提取液组。

1.6 数据处理：以正常台式液中稳定的肠段收缩平均振幅为100%，其余各组数据以与其相比所得相对值。实验数据采用均数±标准差（±s）表示，采用SPSS17.0数据统计软件进行单因素方差分析。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 桃仁水提取液对家兔小肠收缩运动收缩振幅的影响：在正常台氏液中，小肠收缩运动相对稳定，平均收缩张力为0.077±0.003g，收缩振幅为100%。加入0.5g/ml浓度的桃仁水提取液3ml、5ml、7ml（终浓度分别为0.075g/ml、0.125g/ml、0.175g/ml）后，家兔小肠收缩张力由正常对照的0.077±0.003g分别增强到0.082±0.002g（P＞0.05）、0.112±0.002g(P＜0.01)、0.124±0.002g(P＜0.01)，家兔小肠收缩运动的振幅分别增强至(108±0.2)%、（146±0.2）%、（162±0.2）%。即桃仁水提取液对家兔离体小肠收缩运动具有明显促进作用，且桃仁水提取液呈浓度依赖性增强家兔小肠收缩运动（详见图1、表1）。

2.2 乙酰胆碱作用下桃仁水提液对家兔小肠收缩运动的影响：在正常台氏液条件下，待小肠收缩运动平稳后，加入0.01g/L终浓度的乙酰胆碱溶液，可见小肠收缩运动的振幅明显增大，促进小肠收缩运动运动，收缩力由0.077±0.003g升至0.293±0.037g（n=4,P＜0.05）,家兔小肠收缩振幅由100%增加至(380.2±3.7)%。在此基础上加入0.5g/ml的桃仁水提取液5ml后，小肠收缩运动的振幅明显减小，收缩力减弱，收缩力由0.293±0.037g降至0.077±0.002g（n=4，P＜0.05），小肠收缩运动的振幅降至(100±0.2)%，明显抑制小肠收缩运动。该结果提示桃仁水提取液对乙酰胆碱具有显著拮抗作用（详见图2、表1）。

2.3 阿托品作用下桃仁水提液对家兔小肠收缩运动的影响：在正常台氏液条件下，家兔小肠收缩运动平稳后，加入0.5mg/ml终浓度的阿托品，家兔小肠收缩运动的振幅明显减小，收缩力减弱，收缩力由正常对照0.077±0.003g降低到0.053±0.005g（n=4,P＜0.01），小肠收缩运动的振幅由100%减弱至(69±0.5)%。在此基础上加入0.5g/ml浓度的桃仁水提取液5ml后，家兔小肠收缩运动的振幅有回升，肠道收缩运动明显增强，收缩力由0.053±0.005g增强至0.092±0.007g（n=4,P＜0.01）。小肠收缩运动有一定恢复，收缩的振幅提高至（119±0.7）%。表明桃仁水提取液对阿托品具有显著拮抗作用（详见图3、表1）。

图1 不同浓度桃仁水提取液对家兔小肠收缩运动的影响

表1 乙酰胆碱、阿托品、桃仁水提取液对家兔离体小肠收缩运动的影响

图2 乙酰胆碱和桃仁水提取液作用下小肠收缩运动收缩情况

图3 阿托品和桃仁水提取液作用下家兔小肠收缩运动情况

3 讨论

桃仁是临床常用活血化瘀的重要中药，能够明显增加脑血流量，降低脑血管阻力并改善血流动力学，近年来多用于治疗心脑血管疾病。这种重要性可能与其不饱和脂肪酸的组成，亚油酸和油酸的含量有关［4］。它的主要化学成分为脂肪油类、苷类、氨基酸和蛋白质、挥发油、甾体和黄酮及其糖苷类化合物［5］。现代药理研究侧重于分析桃仁的活血化瘀的功效，尚未发现桃仁提取物可以刺激肠壁增加蠕动而促进排便的现象［5］。有报告含有桃仁配方的血府逐瘀汤治疗胆汁反流性胃炎，获得高于西药治疗的总有效率［6］。桃仁富含45%的脂肪油，能提高肠内容物粘膜的润滑性，且具有改善血流阻滞、血行障碍等作用，一直是临床治疗便秘的常用药物［1］，但是，目前有关桃仁对胃肠作用的研究甚少。

与大脑、心脏或骨骼肌电信号相比，小肠收缩运动的电信号具有明显较低的频率［7］。因此，消化道收缩运动兴奋性较低，慢波信号良好，具有自动节律性收缩的特性，给予离体小肠合适的生存环境，就可以保持其消化道收缩运动的良好生理特性。这是由于家兔离体肠肌虽已失去外来神经的支配，但是壁内神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持收缩运动的特性及肠壁神经丛的作用［8］。小肠的节律性活动是受小肠的基本电节律（即慢波电位）所控制，易受离子环境、神经递质和激素等生物活性物质的影响［9］。本研究结果表明，桃仁对家兔离体小肠收缩运动具有显著的加强作用。

乙酰胆碱是胆碱能神经末梢释放的一种兴奋性神经递质，主要通过突触后膜烟碱型受体和毒蕈碱型受体发挥其生理作用，其中广泛分布于胃肠平滑肌，并对小肠具有调控作用的为M胆碱能受体[10]。因此，可明显兴奋胃肠道收缩运动，使小肠收缩幅度、张力、蠕动增加，具有重要的胃肠道运动调节功能。乙酰胆碱激动胃肠平滑肌上的M受体，通过cAMP作为第二信使的细胞膜信号传导，导致钙离子内流，兴奋小肠平滑肌并产生强烈的收缩运动［11］。阿托品为M受体阻断剂，竞争性拮抗乙酰胆碱或胆碱能受体激动药对M受体激动作用，表现出与剂量相关的抑制腺体分泌、松弛平滑肌、加快心率及升高血压等作用，因此，导致小肠收缩运动的收缩振幅减小。本研究结果表明，桃仁能够拮抗乙酰胆碱对家兔小肠收缩运动的兴奋作用，同时又能够拮抗阿托品引起的家兔小肠收缩运动的抑制作用。因此，笔者认为结果提示桃仁对兴奋作用下的小肠收缩运动和抑制作用下的小肠收缩运动可能具有双向作用。但是，桃仁对家兔小肠的具体作用机制尚不明确，亟待进一步阐明。

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