医学分子诊断技术临床带教方法探讨

张战锋，庞志宇，谢在春，陈久凯

（广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405）

分子诊断技术是以聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）技术为核心的新一代检测手段，目前广泛用于感染性疾病中的微生物鉴定及药物敏感性检测[1]、白血病及实体肿瘤诊断和个体化用药基因位点[2]、优生优育检测[3]等多个方面[4]，是各大、中型医院检验科不可或缺的亚学科之一。作为被广泛使用的新技术，PCR因其检测原理的特殊性使其具有临床中其他检测技术（如ELISA、化学发光以及电化学发光等）无法达到的高灵敏性和高特异性，但其高灵敏性和高特异性的特点使该技术的影响因素同样较广[5]，实验过程中任何一个小的错误或不当操作都可能导致非真实的检测结果，这就要求技术操作人员具有较高的专业素质和责任心。实习生进入检验科PCR室往往是他们第一次真正接触PCR技术，因此，对学生实习期间系统、全面的带教是保证其学习效果的前提。笔者一直从事分子诊断工作，针对PCR以及实习带教总结了一些心得体会，希望能够为同行带教提供一些参考。

1 实验室整体介绍及重要概念构建

学生进科的第一天往往对分子诊断实验室没有整体认识，带教教师可先对实习生介绍实验室整体情况以及需要注意的事项和概念，让实习生从宏观上认识分子诊断技术应用中如何达到其质量要求。如首先介绍分子诊断室建立的时间，目前该实验室检测的项目及内容，实验室的构成，如总共有几个区，分别是什么，这样分区的原因，不同分区之间严格区分并且流向单一，不同分区物品不可随意移至其他区等[6]。同时介绍实验室最为重要的“无污染”“无核酸”概念，介绍核酸污染常见的原因、表现、危害及处理方法[7]，重点强调污染在“防”而不在“治”的理念。

针对实验室开展项目，整体介绍项目内容及实验流程。如介绍所有的实验流程大致分为3个部分：核酸提取、扩增及产物分析。核酸提取部分根据所提核酸为DNA或RNA的不同又有不同的方法，DNA常用的提取方法有化学裂解法和热裂解法，RNA常用的提取方法有柱提法和磁珠法。扩增有荧光定量PCR和普通PCR，荧光定量PCR一般可以直接进行结果分析，而普通PCR往往需要后续产物检测的步骤，如基于核酸杂交原理的HPV分型检测项目。产物分析所需注意的地方应视具体项目而定。通过实验室总体介绍，帮助实习生建立初步的PCR实验室整体概念。

2 因材施教

由于实习生来自不同医学院校，所以对分子诊断技术课程的学习并非一致，有的院校甚至没有开展分子诊断相关课程。这种情况要求我们在带教过程中不能千篇一律，对于基础较好的学生应该结合教材、相关参考书补充和强化分子生物学相关理论知识。在接触检验项目之前，首先熟悉检验项目的SOP文件，尤其是熟悉各项目的原理、应用及其临床意义。这样不仅是将理论知识融入实践的一个良好过渡，更能让实习生在开展实际操作之前对即将从事的工作有初步的感性认识，使他们能较快适应工作。对于没有分子诊断相关知识背景的学生首先应关注其基础知识的学习，对本实验室所开展项目中的核酸提取、扩增及产物分析等步骤所涉及的基础知识进行详细、系统地讲解，使学生能够进行SOP文件阅读及后面的操作，否则很容易导致其操作中错误的发生，以及对试验中遇到的问题无法进行分析和解决，无法保证检测质量。

3 教学相长

教学相长是一种普遍的教育教学经验认识，也是现代教育教学改革的一种理念。古今中外都十分重视，并且积累了丰富的经验。在我国教育教学体制改革浪潮下，教学相长越来越受到重视[8]。这里强调的是，教学相长这个词往往用在教师方面，是带教教师自我提升教学水平的方法。在实习带教中我们发现师生之间积极互动、信息交换、角色转换等多维互动模式都会收到好的教学效果。因此，“教学相长”这个方法可以作为实习生学习的一种途径。对于一个教学医院，实习生往往较多，带教科室会根据情况将实习生分成多个小组同时在不同专业组进行学习，因此实习生来到各专业组的时间就有先后。先来的学生通过一段时间的学习已经基本掌握专业组内各个项目所要求学习的内容，对于后来的学生，带教教师可以通过学生一对一带教的方式让学生教学生，而其则是对学生讲解不清或错误的地方进行补充和更正。这样不仅能使学生回顾所学内容，而且能由被动学习变为主动，及时发现自己掌握不牢内容并重点学习。对于后来的学生而言，学生与学生之间的交流和信息的传递会更容易接受。所以，在临床带教过程中“教学相长”教学模式同样可以应用到实习生上。

4 理论和技能考核

完善的考核不仅是对学生学习过程的总结，也同样是对临床带教效果的考验。考核分为两部分：理论和技能。理论考核主要针对实验室项目所涉及的基本方法原理、注意事项等内容展开，这里值得一提的是，理论考核中同样应包含典型案例分析、结果解释等内容。技能考核则只是针对实际操作，对学生动手能力进行考查。但技能考核不仅仅是核酸提取及仪器使用，应该包含某个项目的所有流程[9]。比如试剂准备、样本离心、加样枪使用、核酸提取步骤、PCR仪开机、程序选择、样本编号、样本录入、结果分析及结果报告等方面。针对技能考核应编制合适的考核表格，表格中针对以上考核内容进行说明，在实习生整个操作过程中实时进行打分并记录，在考核完毕后就考核中出现的错误及时与学生沟通。目前PCR项目多是手工操作，并且每个样本的加样量少且加样孔密，在带教过程中需着重培养学生操作过程中的专注力，否则极易发生样品加错孔或加样量不准的现象，对结果造成较大影响。

5 新技术、新方法的学习和创新

PCR技术作为近些年发展最为迅速的检验亚学科之一，应用或基于该技术的产品层出不穷。实习生作为检验事业未来的主要实践者，不仅要掌握基本的理论和技能，而且要意识到专业知识不断学习和探索的重要性。目前很多基于PCR技术的新产品正逐步走向临床，比如循环肿瘤细胞或DNA的检测[10-11]、核酸提取的自动化仪器使用[12-13]等。在此值得一提的是，在学习的同时，对知识的总结和探索同样是实习生需要重点培养的部分。这方面的培养最主要的方式就是论文写作。目前大多数医学院校对本科生均有写论文要求，这也是医学教育工作者逐渐认识到知识总结、创新对学生、对学科发展重要性的体现。当然，这些论文不是都要求有学术价值的，更看重的是对学习能力的培养，让学生运用学到的知识、方法、理论来表述自己的看法和观点。除此之外，结合我国国情，通过毕业论文还可以考查一个大学生最基本的学术素养和治学态度。所以，本科生的毕业论文更看重的是过程，从选题到资料收集，动手做或思考论证，再到后期的写作修改，是一个最基础的学术研究过程。

分子生物学技术鉴于其突出的检测能力，经过短短十几年的发展已广泛用于多个行业。在医学界中已经成为一种不可或缺的疾病辅助检测手段[14-15]，是检验专业学生应该熟练掌握和运用的学科知识。实习生作为检验学未来发展的重要参与者，其实习过程不仅对自身具有重要作用，对学科的发展同样具有重要意义。而带教教师在很大程度上决定了学生在此过程中学习的好坏，因此，希望能够通过本心得体会与检验带教教师共同探讨临床带教方法，以培养出优秀的检验后备人才。