白及与川乌配伍对大鼠卡拉胶模型血流速度和镇痛效果的影响*

庞 坦，李小锦，庄朋伟

（天津中医药大学，天津 300193）

川乌和白及是中药“十八反”理论的一对相反药对[1-3]，传统中医药理论认为其是配伍禁忌用药。然而近年来的一些毒理或药效学研究表明，白及与川乌配伍，在某些情况下，并不产生剧烈的不良反应[4-6]。笔者认为“十八反”配伍禁忌是临床长期用药经验的总结，白及与川乌配伍可能是在某些疾病方面具有特定的疗效，然而在长期临床应用过程中发现了明显的不良反应。基于此本研究基于川乌与白及的传统功效与临床应用，拟考察该反药组合的毒效表征。

白及具有收敛止血，清热利湿，消肿生肌之效[7-14]，在临床上应用广泛，治疗外伤出血，疮疡肿毒，咳血吐血效果显著。川乌祛风除湿，温经止痛，用于治疗风寒湿痹、关节疼痛、寒疝作痛等[15-18]。两者合用可在跌打损伤、关节炎等相关疾病中有所应用。

1 材料与方法

1.1动物 实验动物：34只SPF级雄性SD大鼠，体质量140～160 g，由北京维通利华实验动物中心提供。

1.2主要试剂 卡拉胶（sigma,C-3889）。

1.3实验药物

1.3.1川乌 药材名称乌头（Aconitum carmichaelii/Radix Aconiti），购于北京华邈中药工程技术开发中心，鉴定结果毛茛科植物乌头（AconitumcarmichaeliDebx.）的母根的炮制加工品。该药材由天津中医药大学庞坦鉴定，所有的药材标本均取样保存于天津中医药大学实验楼药理实验室。

川乌提取液：500 g川乌药材，加适量蒸馏水清洗2次后，用10倍量蒸馏水浸泡0.5 h，加热煮沸后微沸1 h，纱布过滤后，所得药渣再加8倍量蒸馏水加热煮沸后微沸1 h，纱布过滤，合并药液，旋转蒸发仪蒸发浓缩，调整药物质量浓度至0.45 g/mL，4℃保存。

1.3.2白及 兰科植物白及[Bletilla striata（Thunb．）Reichb.f]的干燥块茎。该药材由天津中医药大学庞坦鉴定，所有的药材标本均取样保存于天津中医药大学实验楼药理实验室。

白及提取液：500 g白及药材，加适量蒸馏水清洗2次后，用10倍量蒸馏水浸泡0.5 h，加热煮沸后微沸1 h，纱布过滤后，所得药渣再加8倍量蒸馏水加热煮沸后微沸1 h，纱布过滤，合并药液，旋转蒸发仪蒸发浓缩，调整药物质量浓度至0.45 g/mL，4℃保存。

川乌白及提取液配伍：同质量浓度川乌提取液和白及提取液等量混合，调整药物质量浓度，使其含有的川乌和白及生药材质量浓度均为0.45 g/mL。

1.4实验仪器 激光多普勒血流仪[Perimed百灵威医疗仪器（中国）产品，瑞典]，小动物异氟烷麻醉机（EMKA，德国）。压痛测量仪，Ugo Basile,意大利。

1.5方法

1.5.1动物模型制备 3%卡拉胶溶液配制：称量600 mg的卡拉胶，放入50 mL的锥形瓶中。将20 mL消毒的0.9%生理盐水沿着磁力搅拌棒倒入锥形瓶中；用封口膜盖上锥形瓶顶部，在室温下搅拌6 h得到3%卡拉胶溶液。溶液贮存于4℃，使用前在室温下搅拌1 h。

34只SD大鼠常规饲养，自由饮水。除正常对照组外，将各组大鼠建立卡拉胶炎症模型。将大鼠用3%异氟烷麻醉，使用连有25 g无菌针头的1 mL注射器将100 μL 3%的卡拉胶注入到足底下部。卡拉胶的溶液黏性较大，在针管中要注意不要有空气。正常对照组注射同等剂量的生理盐水。注射完成后大鼠自然苏醒。造模后1 h，实验各组分别灌胃给药。

1.5.2实验分组及处理 实验当天随机分为正常对照组、模型组、白及提取液组、川乌提取液组和白及川乌提取液配伍组。正常对照组4只和模型组6只大鼠，其余各组8只。正常对照组和模型组口服给予大鼠蒸馏水5 mL/kg,白及组给予白及提取液2.25 g/kg，川乌组川乌提取液2.25 g/kg，配伍组白及川乌提取液配伍（2.25+2.25）g/kg。

1.5.3测量指标 大鼠机械性疼痛测量：分别于造模后1 h和3 h测量大鼠后足压痛值（analgesimeter,Ugo Basile,Italy）。测试时将大鼠肿胀足放置于压痛仪上，启动仪器后大鼠感觉后痛觉会将肿胀足缩回，仪器自动记录大鼠缩回肿胀足时承受的压力，单位为g。

大鼠足血流速度测量：分别于给药后1 h和3 h，将大鼠使用3%异氟烷麻醉，在大鼠肿胀足和对侧足底放置激光多普勒血流仪探头，检测大鼠双侧足的血流速度，计算其差值（左足值减去右足值），以PU作为相对血流量单位。检测完成后大鼠自然苏醒。

1.3统计方法 采用SPSS 17.0统计软件进行分析，各组数值以均值±标准差（x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，检验水平α=0.05。

2 结果

2.1白及、川乌及其配伍对大鼠足压痛值的影响，见表 1，图 1。

表1 白及、川乌及其配伍对大鼠足压痛值的影响（±s）

表1 白及、川乌及其配伍对大鼠足压痛值的影响（±s）

注：与正常对照组比较，#P＜0.05；与模型组比较，*P＜0.05。

给药前及给药后压痛值（g）0 h 1 h 3 h正常对照组 4 - 104.3±5.3 99.0±7.8 95.8±8.1模型组 6 - 108.5±6.6 50.5±22.3# 51.5±22.8#川乌组 8 2.25 106.5±6.5 83.9±10.1* 84.6±12.0*白及组 8 2.25 109.7±5.4 65.5±16.1 51.3±23.5配伍组 8 2.25+2.25 111.0±7.0 97.3±10.9* 98.7±9.4*组别 n 剂量（g/kg）

图1 各组药物对大鼠卡拉胶模型压痛值的影响（，散点图）

给药后1 h及3 h，与模型组相比，川乌提取液和白及川乌提取液配伍均能显著提高大鼠卡拉胶炎症足的压痛值,与正常对照组相近。白及提取液则对大鼠卡拉胶压痛值无明显影响。

2.2白及、川乌及其配伍对大鼠足血流速度的影响见表 2，图 2。

给药后1 h及3 h，与模型组相比，白及提取液和白及川乌提取液配伍均能降低大鼠卡拉胶炎症足的血流速度，但是没有统计学差异。川乌提取液则对大鼠血流速度无明显影响。

表2 白及、川乌及其配伍对大鼠足血流速度的影响（±s）

表2 白及、川乌及其配伍对大鼠足血流速度的影响（±s）

注：与正常对照组比较，#P＜0.05，与模型组比较，*P＜0.05。

给药后左右足血流速度差值（L-R，PU）1 h 3 h正常对照组 4 - 5.00±13.39 13.50±19.33模型组 6 - 72.33±25.6## 97.83±55.91##川乌组 8 2.25 67.00±58.38 79.62±58.38白及组 8 2.25 18.42±20.26* 32.50±25.07配伍组 8 2.25+2.25 27.12±19.28 52.25±22.56组别 n 剂量（g/kg）

图2 各组药物对大鼠卡拉胶模型炎症足血流速度的影响（，散点图）

3 讨论

白及与川乌配伍同用，是“十八反”配伍禁忌之一。关于白及与川乌配伍，是否出现毒性反应和药理作用降低或毒性化学成分的含量是否增加的现象，是中药研究中的热点课题[19-21]。既然古代医家明确总结出两药组合为配伍禁忌，那么也就从另一方面说明，两药在临床治疗特定疾病时可能存在配伍应用的情况。基于此，本研究基于两药的传统功效与临床应用特点，选择了卡拉胶模型，考察白及川乌配伍对该模型大鼠的足趾疼痛程度和微循环血流速度[22-24]是否具有一定影响。

卡拉胶模型是一种急性炎症模型[25-27]，它模拟人体发生急性炎症的症状，大鼠足底注射卡拉胶后，会在短时间内发生红肿、疼痛症状。本文以大鼠卡拉胶模型为动物模型，观察白及和川乌提取液在降低血流速度和镇痛方面的效果是否互相影响。

结果显示大鼠在造模后2 h（给药后1 h）和4 h（给药后3 h）足趾血流速度对比正常对照组均明显加快，其机械性疼痛值对比正常对照组明显降低。给药后1 h和3 h川乌提取液均可显著提高卡拉胶大鼠的疼痛值（P＜0.05），说明其有明显的镇痛作用，与白及提取液配伍应用后，镇痛作用未受影响。白及提取液在给药后1 h可显著降低卡拉胶大鼠的血流速度（P＜0.05）。白及川乌提取液配伍组血流速度值有降低，虽未有统计学差异，但是可将血流速度绝对值降低1/2左右，且给药后1 h，两者的对血流速度的降低程度数值接近。白及降低血流速度可能与其止血功效有关。从文章可以看出，川乌镇痛，白及止血，两者配伍应用时，其镇痛作用与止血作用较之单独应用时，未受影响，亦未见“相反”作用出现。

本研究结果提示，白及与川乌配伍在改善炎性疼痛方面具有一定协同增效作用，但“十八反”配伍禁忌是临床长期用药经验的总结，目前研究在模型的选择、给药时间、生物效应的关注点等方面均具有一定的局限。

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