德国洋甘菊对实验性高血脂症大鼠的降脂作用

兰 卫， 王 莹， 郝宇薇， 刘婧怡， 安冬青

(新疆医科大学1中医学院， 乌鲁木齐 830011； 2附属中医医院， 乌鲁木齐 830002)

高脂血症(hyper lipidemia，HLP)是指以血浆中一种或多种脂质成分[主要指甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)]异常增高为特征的代谢紊乱综合病症[1]。因发病比较隐匿，患者几乎没有特异的症状，偶尔会出现胸闷、头晕、失眠等症状，如不及时治疗，则会引发冠心病、心肌梗死、脑卒中等严重的疾病，因此血脂水平的控制是从源头上防治心脑血管疾病的关键[2]。目前临床中使用的降血脂药物主要有他汀类、贝特类、胆汁酸螯合剂以及烟酸等，这些药物均通过不同的途径发挥降血脂作用，但部分患者出现横纹肌溶解、肝脏损害、精神抑郁等一系列不良反应[3-4]。中药降脂药物具有疗效持久、副作用小等特点[5]。有学者对中药中具有降脂作用的活性成分进行研究，发现中药降脂作用主要通过抑制胆固醇吸收、调节血脂代谢、促进胆固醇排泄来实现[6]。本研究采用大鼠高脂饲料灌胃造模，给予药物干预，评价德国洋甘菊提取物对实验性高血脂大鼠的降脂作用，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1仪器AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)，DK-S24型电热恒温水浴锅 (上海精宏实验设备有限公司)，Centrifuge 5804型全高速冷冻离心机 (德国 Eppendorf)，AO86A0182型全自动生化分析仪(迈瑞生物医疗电子股份有限公司)，BCD-238WF型冰箱 (中国海尔集团)，一次性普通真空采血管(江苏康健医疗用品有限公司，批号151201)，一次性使用采血针(江西丰临医用器械有限公司，批号 20140099)。

1.2试药辛伐他丁片(杭州默沙东制药有限公司，批号 J20130068)，水合氯醛(武汉市和盛化工有限公司，批号1005412)，复方氯化钠注射液(新疆制药有限公司，批号H65020068)，胆固醇(北京博奥拓达科技有限公司，批号201312)，普通鼠粉末饲料(购自新疆医科大学动物中心)。

1.3药材德国洋甘菊样品2016年6月采于和田地区策勒县博斯坦乡，经新疆医科大学中医学院李永和主任药师鉴定为德国洋甘菊(Matricariachamomilia)的全草。

1.4动物Wistar大鼠，雄性，体质量(200±20)g，批号：20160126，动物许可证号：SCXK(新)2011-0003，由新疆医科大学实验动物中心提供。

2 方法

2.1样品的制备德国洋甘菊醇提取物：德国洋甘菊药材，12倍，70%乙醇，回流提取，提取3次，每次2 h，冷冻干燥，得干膏粉，出膏率为32.0%；德国洋甘菊水提取物：德国洋甘菊药材，20倍水提取，提取3次，每次2 h，冷冻干燥，得干膏粉，出膏率45.0%。

2.2高脂饲料的制备[7-10]将猪油加热融化，按猪油-胆固醇粉末-蔗糖-普通鼠粉末饲料(10∶2∶6∶82)混合均匀，制粒，晾晒1～2 d，即得。

2.3高脂模型的建立大鼠给予普通饲料适应性喂养1 w，按体质量随机分成2组，其中10只大鼠给予基础饲料为正常对照组，其余92只大鼠给予高脂饲料建立高血脂模型。每周称重1次，造模30 d后，期间大鼠不禁食，断尾采血，血样经3 500 r/min离心20 min后，取血清测定大鼠血清中总胆固醇TC、低密度脂蛋白水平(LDL-C)、TG，正常对照组大鼠同样处理。

2.4动物分组及给药选取造模成功的大鼠70只，随机分为7组(n=10)，分别为正常对照组(蒸馏水1 mL/kg)，模型对照组(蒸馏水1 mL/kg)，阳性对照组(辛伐他丁7 mg/kg)，德国洋甘菊醇提物高、中、低剂量组(971、485、243 mg/kg)，德国洋甘菊水提物组(1 366 mg /kg)。将大鼠固定，口腔与食道成直线，灌胃，连续灌胃4 w。正常对照组大鼠喂养普通饲料，其余各组大鼠均喂养高脂饲料，自由饮水。

2.5指标的测定方法末次给药后禁食不禁水12 h，称取体质量，将大鼠腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg以麻醉，仰卧固定于大鼠台上，剪开腹腔，分离出血管，手固定血管以及血管两旁的脂肪和其他脏器，右手持一次性采血针，针尖斜面朝下，朝向心端方向入针，进针后迅速将采血针另一端插入真空采血管中，收集全血。在收集大鼠全血后3 500 r/min离心20 min，使用移液枪精密吸取上层淡黄色澄明血清，分装，存入-80℃冰箱备用。使用全自动生化分析仪对大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平进行测定。

3 结果

3.1实验前后大鼠体质量变化情况在实验开始前，7组大鼠体质量差异无统计学意义 (P>0.05)，但在造模成功实验结束时，与对照组比较，阳性对照组、德国洋甘菊醇提物高剂量组大鼠体质量降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与正常组比较，阳性对照组大鼠体质量下降，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

3.2德国洋甘菊提取物对高血脂大鼠体内TC、TG、LDL-C、HDL-C的影响与模型组大鼠相比，德国洋甘菊醇提物高剂量组大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低，差异有统计学意义(P<0.01)；德国洋甘菊醇提物中剂量组大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低，差异有统计学意义(P<0.05)，德国洋甘菊醇提物高剂量组和中剂量组的HDL-C值升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 实验前、后大鼠体质量变化情况

注：与模型对照组比较，*P<0.05；与阳性对照组比较，**P<0.05。

表2 德国洋甘菊对高血脂大鼠体内TC、TG、LDL-C、HDL-C的影响

注：与正常对照组比较，aP<0.01；与模型对照组比较，bP<0.05，cP<0.01。

4 讨论

血脂异常表现为血液中TC、TG、LDL-C一种或者几种升高，或者HDL-C水平降低。其中HDL-C的缺乏和LDL-C的升高是导致高脂血症的重要原因之一。从中草药中提取的多种天然黄酮类成分具有良好的降血脂作用。天然黄酮类成分在抗低密度脂蛋白的氧化作用、清除体内自由基及抑制脂质过氧化的产生等多靶点、多途径发挥降血脂作用。研究发现，复方山楂黄酮提取物具有抑制 TC、TG 升高的作用。在治疗过程中给药高剂量组与高血脂模型阳性对照组相比，胆固醇水平降低，高密度脂蛋白水平提高[11]。松针黄酮能降低高脂饮食诱导的高脂血症大鼠模型的血清甘油三酯和胆固醇水平，说明松针黄酮有一定的降血脂作用[12]。木槿花总黄酮通过降低高脂血症大鼠血清中甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白水平，升高高密度脂蛋白、载脂蛋白A的水平而发挥降血脂作用[13]。三七总黄酮能够降低Wistar大鼠建立的高脂血症模型血清中甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白水平，同时升高高密度脂蛋白水。体外细胞实验结果显示，三七总黄酮抑制细胞中二脂酰甘油酰基转移酶、羟甲基戊二酸单酰辅酶还原酶水平，升高胆固醇 7α-羟化酶、肝脏甘油三脂脂肪酶的活性[14]。本研究发现德国洋甘菊醇提取物具有较好地降脂作用，而德国洋甘菊水提取物的降脂作用不明显，德国洋甘菊醇提取物降脂作用的原因及机制还需进一步深入研究。

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