基于药材性状及显微组织特征的芫花条与其混淆品的鉴别

金艳+姚俊娜+格小光+张志杰+李娆娆+冯学锋+石金敏

[摘要] 基于药材性状和组织显微鉴别方法，对芫花及其混淆品河朔荛花的茎、叶进行了对比研究；并对芫花根进行了研究。结果表明芫花条药材或饮片主要为茎枝，节处有明显对生的叶柄痕和枝痕，一般未观察到叶或花序梗，折断面皮部有细密银白色絮状纤维。混淆品为带有茎枝、叶和花序梗的段，花序梗可见呈穗状花序的花梗痕。在显微组织方面，芫花的茎横切面韧皮部有单个散在的粗大的木化韧皮纤维，壁极厚；其叶下表皮附有单细胞非腺毛。河朔荛花茎横切面韧皮部未见粗大的木化韧皮纤维；叶表皮细胞外壁有厚角质层，下表皮无非腺毛。此结果可用于芫花条药材与饮片鉴别及质量标准制定。芫花根的组织和横切面观察可用于该品种根类药材的鉴别。

[关键词] 芫花条； 芫花； 河朔荛花； 芫花根； 性状鉴别； 显微鉴别

[Abstract] The purpose of this article is to identify Daphne genkwa and its adulterants， Wikstroemia chamaedaphne， according to the morphological and microstructure characteristics of their stem and foliage. The root of D.genkwa was studied simultaneously. The results indicated that the crude drug and processed pieces of Genkwa Ramulus were mainly composed of stems and branches where obvious opposite petiole scars and branch marks were able to be seen on their nodes. Otherwise， foliage or peduncles generally couldn′t be found. Moreover， the fine silver flocculent fibers could be observed in the bark of fracture surface. The adulterants were the plant segments which were composed of stems， foliage and peduncles with spikelet-pedicel scars. There existed microstructures differences between Genkwa Ramulus and its adulterants. In the former， single thick lignified phloem fibers were interspersed in the stem phloem of the transverse section with very thick wall and unicellular non-glandular hairs could be observed on the lower epidermis of foliage. Nevertheless， in the latter， there was no thick lignified phloem fibers in cross section of stem phloem， the outer wall of epidermal cells of foliage hadthick cuticles and no non-glandular hairs in lower epidermis of foliage. The results can be used for the identification and the quality standard of the crude drug and processed pieces of D.genkwa.The characteristics of the microstructures and the transverse section can be used to identify the radix D.genkwa.

[Key words] Genkwa Ramulus； Daphne genkwa； Wikstroemia chamaedaphne； Genkwa Radix（roots of Daphne genkwa）； morphological dentification； microscopical identification

芫花條为瑞香科瑞香属植物芫花Daphne genkwa Sieb. et Zucc.的干燥枝条。本品为现代民间用药，未见历代本草收载。“芫花条”一名最早见于《山东中草药手册》[1]，山东省中药材标准（1995年版、2002年版）也有收载。本品有逐水，祛痰，解毒杀虫，散风祛湿功效；用于水肿胀满，痰饮积聚，风湿痹痛，外治疥癣[2]。本品是《中国药典》2015年版“消络痛片”和“消络痛胶囊”的君药[3]，用于治疗风湿性关节炎，有较好的疗效。

芫花花蕾的药用最早记载于《神农本草经》，芫花根的药用则记载于《吴普本草》，这2个药至今仍用于中医临床。近些年芫花叶的药用价值也有报道[4]。芫花枝条、根、叶的化学和药理学研究表明，这些不同部位均含有黄酮类，香豆素类，木脂素类、酚酸类及二萜原酸酯类成分；具有抗炎、镇痛作用[4-9]。芫花根总黄酮对小鼠细胞免疫功能具有调节作用，并显示抗肿瘤活性[10-11]。

作者在对芫花条药材商品调查及草拟其药材标准时，收集样品的过程发现了2批芫花条的混淆品，样品呈饮片状，为茎枝的小段，并带有果序枝和叶，经鉴定为瑞香科荛花属植物河朔荛花Wikstroemia chamaedaphne Meisn.的枝条与叶。同时作者也注意到芫花条、芫花根药材鉴别方面的工作较少，需要进行详尽的实验研究[12]。因此为了解决这些问题，作者对芫花的枝条、根和叶及其混淆品的药材性状与显微组织进行了比较研究，试图为芫花条、芫花根药材的鉴别及其质量标准制定提供科学依据。endprint

1 材料

1.1 仪器

光学显微镜，型号OLYMPUS-BX51；顯微数码摄影仪，型号OLYMPUS-D72，均购自奥林巴斯株氏会社。

1.2 试剂

冰醋酸，甘油，氢氧化钾均为分析纯（北京化工厂），水为娃哈哈纯净水。

1.3 药材

实验用芫花条药材或饮片样品34份，经中国中医科学院中药研究所冯学锋研究员鉴定均为芫花D.genkwa的枝条、根或叶。另有2份饮片样品（样品35，36），经鉴定为瑞香科荛花属河朔荛花W.chamaedaphne的枝条与叶。样品存于中国中医科学院中药研究所，样品信息见表1。

2 方法

每份样品选取药材5～10个体，观测药材或饮片样品的形状、大小，颜色、质地、断面、气味等性状特征。通过光学显微镜观察茎、根或叶的横切面，叶表面、粉末制片或解离组织制片，对样品的显微组织特征进行描述、测量，并用光学数码显微镜摄影。

2.1 样品横切片制备

选取样品的茎、根或叶软化后，采用常规石蜡切片、徒手或滑走切片法制片。

2.2 样品解离组织制片

采用药典的氢氧化钾法，将样品切成宽或厚约2 mm的小条或片，置于试管中，加5%氢氧化钾溶液适量，加热至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取出少量置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油装片。用于观察、测量纤维、导管等组织特征。

2.3 样品粉末制片

将样品粉碎，过60目筛，粉末用甘油醋酸试液（冰醋酸-甘油-水1∶1∶1）封片。

3 结果

3.1 药材、饮片性状

3.1.1 芫花条（茎枝）药材性状 枝条呈长圆柱形，粗细均匀，或略呈下粗上细，长32～118 cm，直径2～12 mm，上部嫩枝分枝较多。老枝表面无毛，棕色、红褐色至深褐色，可见椭圆形皮孔，节处有明显对生的叶柄痕和枝痕。嫩枝较细，直径1 mm左右，绿色或深棕色，表面覆盖1层黄色的绢状毛。质硬脆，不易折断。折断面不整齐，皮部有2 mm厚细密银白色絮状纤维，木部黄色。气清香，味微辣（图1A）。

3.1.2 芫花根药材性状 根呈长圆柱形，主根直径7～18 mm，表皮红棕色至深褐色，有突起的环状节， 节上多生有支根。质硬脆，不易折断。断面不整齐，皮部纤维性强，折断处呈长绒毛状；木部呈鲜黄色或黄色。气微，味微辣（图1B）。

3.1.3 芫花条（茎枝）饮片性状 样品为长短不等的段，粗细不同，直径1.5～9 mm。老枝周边棕色至 深褐色，无毛，有细纵棱；幼枝周边绿色或深棕色，可见黄色的绢状毛。皮部与木部常分离。切面皮部纤维性强，有细密银白色絮状纤维。木部浅黄色，有同心性环纹。质硬。气清香，味微辣（图1C）。

3.1.4 河朔荛花茎枝饮片性状 样品为枝、叶和花序梗的段，绿棕色，段长1～1.5 cm。枝粗细不等，直径2～10 mm。枝周边红棕色至棕色，有细纵棱，有的可见枝痕。切面皮部黄白色，木部浅黄色，有同心性环纹。质坚硬。花序梗灰棕色，直径1～2 mm，可见呈穗状花序的花梗痕。叶常切断，叶片上面棕绿色，下面灰绿色，革质。气微，味淡（图1D）。

3.2 显微组织结构

3.2.1 茎横切面显微组织结构 芫花茎横切面（直径5 mm）：木栓层由6～25层扁平木栓细胞组成，细胞切向延长。皮层狭窄，由2～4层切向延长薄壁细胞组成。中柱鞘部位有纤维束断续环列，纤维壁增厚。韧皮部宽广，韧皮束在外侧弯曲。韧皮部中有大量纤维束切向排列，纤维极长，壁薄，非木化；另有单个散在的粗大的木化纤维，壁极厚，可见层纹。形成层明显，成环。木质部导管径向或切向排列，直径大的和小的导管相间排列，形成年轮。导管周围有木纤维束。木射线由1～2列细胞组成。髓部薄壁细胞较小，类圆形或椭圆形，有的细胞破裂成空洞（图2A）。河朔荛花茎横切面（直径4 mm）与芫花茎的不同处：木栓层由5～12层扁平木栓细胞组成。皮层狭窄，由4～6层切向延长薄壁细胞组成。韧皮部没有粗大的木化纤维。木射线由1列细胞组成。薄壁细胞内充满淀粉粒（图2B）。

3.2.2 根横切面显微组织结构 芫花根横切面木栓层由13～25层扁平木栓细胞组成，细胞切向延长。韧皮部宽广。韧皮部中有大量纤维束切向排列，纤维极长，壁薄，非木化；另有单个散在的粗大的木化纤维，壁极厚，可见层纹。形成层明显，成环。木质部导管切向或径向排列，导管周围有木纤维束。木射线为由1列细胞组成（图3）。

3.2.3 叶横切面显微组织结构 芫花叶横切面：上表皮细胞较大，长方形；下表皮细胞较小，可见气孔和单细胞非腺毛。栅栏组织由2～3列细胞组成，不通过中脉。海绵组织细胞排列疏松。主脉处上表皮内侧有1～2层厚角组织，下表皮细胞内侧有1层厚角细胞或不明显。维管束外韧型，韧皮部外侧有纤维束层，韧皮部较窄，木质部呈新月形（图4A）。河朔荛花叶横切面与芫花叶不同处：上、下表皮细胞外壁有厚角质层，下表皮细胞未见非腺毛。主脉处上、下表皮内侧有3～4层厚角组织。维管束外韧型，韧皮部外侧有纤维束层，纤维壁厚，木化（图4B）。

3.2.4 叶表面显微组织结构 芫花叶表面：上表皮细胞呈多边形，细胞壁平直，气孔极少见。下表皮细胞呈多边形，细胞壁平直，可见较多气孔及非腺毛。气孔为不定式，周围付卫细胞4～6个。非腺毛为单细胞构成，外壁有疣状突起（图5A，B）。河朔荛花叶表面：上、下表皮细胞呈多边形，细胞壁较平直或略弯曲，外壁可见角质层点状或块状突起。上表皮气孔极少见；下表皮可见较多气孔，未见非腺毛。气孔为不定式，周围付卫细胞4～6个（图5C，D）。

3.2.5 粉末显微特征 芫花条（茎枝）粉末：棕黄色。韧皮纤维众多，多碎断，完整者极长，末端圆或尖，有的有不规则突起，或分叉，直径7～13 μm，纤维壁一般较薄，有的有增厚，非木化或微木化。木化韧皮纤维，长梭形，长550～1 300 μm，直径18～50 μm，壁极厚，可见层纹，木化，胞腔狭窄，有时呈线状。导管多见具缘纹孔导管，偶见螺纹导管及梯纹导管，直径20～65 μm。木纤维主要为纤维管胞，长梭形，长73～350 μm，直径10～20 μm，壁有斜向交错的纹理，可见具缘纹孔，纹孔口圆形。木栓细胞多边形，棕黄色（图6A）。河朔荛花茎枝粉末：棕黄色。韧皮纤维多碎断，完整者极长，直径5～21 μm，纤维壁一般较薄，有的有增厚，非木化或微木化。导 管多见具缘纹孔导管，直径23～56 μm。木纤维多成束，长梭形，长110～475 μm，直径8～18 μm，可见纹孔点状或斜缝状。淀粉粒圆形或长圆形，直径3～5 μm。木栓细胞多边形，棕黄色（图6B）。endprint

3.3 芫花条与其混淆品（河朔荛花茎枝）的区别

芫花条与其混淆品（河朔荛花茎枝）在药材或饮片性状方面的区别在于：芫花条是以茎枝为主。枝节处有明显对生的叶柄痕和枝痕。嫩枝表面覆盖1层黄色的绢状毛。折断面皮部有细密银白色絮状纤维。河朔荛花茎枝饮片为枝、叶和花序梗的段。花序梗可见呈穗状花序的花梗痕。皮部纤维不呈银白色絮状（表2）。

在显微组织方面，芫花的茎横切面在韧皮部有单个散在的粗大的木化韧皮纤维，壁极厚，可见层纹。木纤维主要为纤维管胞，长梭形，壁有斜向交错的纹理，可见具缘纹孔，纹孔口圆形。薄壁细胞内淀粉粒较少。芫花的叶下表皮附有单细胞非腺毛，中脉处厚角组织1～2层。河朔荛花的茎韧皮部没有粗大的木化韧皮纤维。木纤维壁没有斜向交错的纹理。薄壁细胞内充满淀粉粒。河朔荛花的叶表皮外有厚角质层，下表皮无非腺毛，中脉处厚角组织3～4层（表2）。

4 结论与讨论

在药材商品调查时，发现芫花条混淆品，经鉴定为瑞香科荛花属植物河朔荛花W.chamaedaphne的茎叶，经过对2种药材性状与显微组织比较鉴别研究，认为两者有区别，可以用于2种药材的鉴别。实验结果显示，芫花条药材或饮片主要为茎枝，一般看不到叶或花序梗，节处有明显对生的叶柄痕和枝痕，折断面皮部有细密银白色絮状纤维。混淆品（河朔荛花）为带有茎枝、叶和花序梗的段，花序梗可见呈穗状花序的花梗痕。两者的药材外形容易区别。在显微组织方面，芫花的茎横切面韧皮部有单个散在的粗大的木化韧皮纤维，壁极厚；其叶下表皮附有单细胞非腺毛。河朔荛花茎横切面韧皮部未见粗大的木化韧皮纤维；叶表皮细胞外壁有厚角质层，叶下表皮无非腺毛。

由于芫花条混淆品（河朔荛花）中带有碎叶片，因而对河朔荛花与芫花的叶显微结构进行了比较，发现两者叶片显微组织有区别。芫花叶的下表皮附着有单细胞非腺毛，非腺毛外壁有疣状突起；主脉表皮内侧的厚角组织较薄，只有1～2层细胞。河朔荛花的叶下表皮无非腺毛，但其叶表皮细胞外壁有厚的角质层，主脉上、下表皮内侧有较厚的厚角组织，为3～4层细胞组成。此实验结果与芫花叶纸质，河朔荛花叶近革质[13]的形态描述相符。芫花的叶未见有药用记载，但是近年有学者对其含有的黄酮类、木脂素化合物进行分析研究[8-9]。

芫花的根有药用记载，最早见于《吴普本草》。芫花根在《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》第十七册所附“药典未收载的药材名称及来源”的药材名单中有收录。芫花根具有逐水，解毒，散结功效，用于水肿，瘰疬，乳痈，痔疮，疥疮，风湿痹痛[3]。以往，仅见其根皮药材及显微鉴别工作[12]。因此，做了芫花根的药材性状和横切面观察，其结果可供芫花根药材鉴别。

有文献记载芫花茎皮纤维可用来作造纸和人造棉原料[13]。实验中发现，芫花茎皮折断时呈细密银白色絮状，其根也有类似情况。显微镜观察，芫花茎或根的韧皮层含有大量的韧皮纤维束，韧皮纤维细而极长，直径7～13 μm，壁薄。由于纤维众多，易被切片刀刮带，在做其根或茎横切片时，很难达到满意的切片效果。

[参考文献]

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[责任编辑 吕冬梅]endprint