益生菌对老年人口腔念珠菌的影响
2018-01-24葛家华
何 云,葛家华
念珠菌是一种常见的条件致病菌,主要存在于人体口腔、阴道、皮肤等处[1],当人体免疫力降低或者是发生微生态环境紊乱时,比如老年人、儿童、艾滋病患者、长期服用抗生素患者等[2],易导致机体感染念珠菌。念珠菌作为一种共生菌,在老年人口腔中检出率可达20%~65%,并随着年龄的增加而提高[3-4]。益生菌是一类对机体有益的活性微生物,主要包括酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌等,能通过调节宿主微生态平衡而促进机体健康。有研究显示,规律适量的服用益生菌制品,可以调节胃肠道和阴道的菌群平衡,从而降低机体致病微生物的感染率[5]。Mendonca等[6]也证实,益生菌可以降低口腔念珠菌感染。目前大部分的研究主要集中在益生菌对幼儿和重病患者念珠菌感染上,对于益生菌对老年人口腔念珠菌的影响还鲜有报道。本研究就益生菌含片对老年人口腔念珠菌的影响进行了观察。
1 对象与方法
1.1 研究对象 选择2013年6月~2015年6月医院门诊老年患者为研究对象。纳入标准:(1)年龄>65岁;(2)能配合完成口腔检查及唾液样本采集。排除标准:(1)有严重的慢性疾病或肿瘤;(2)使用免疫抑制剂或抗生素;(3)有精神疾病或认知障碍;(4)患有口腔干燥综合症。共纳入对象168例:年龄65~94(75.48±5.60)岁;男性 66 例,女性 102 例;文化程度:大专及以上34例,高中以下134例;城市户口57例,农村户口111例;上颌牙:义齿88例;无齿23例;<6颗 27例,>6颗 30例;下颌牙:义齿 88例;无齿18例;<6颗20例,>6颗42例。按照病例入组顺序编号,采用奇偶数法将患者随机分为试验组和对照组,各84例,两组间基线资料比较无统计学差异(P>0.05)。本研究方案得到医院医学伦理委员会批准,所有患者本人及家属均对本研究知情同意。
1.2 研究方法 试验组每天含服含有活菌的益生菌含片 (BLIS K12口腔益生菌含片,新西兰),2片/次,2次/d,早晚含服。每片含罗伊乳杆菌(菌株号DSM17938)108个活菌。指导研究对象正确含服的方法,使药片在口腔完全融化,避免嚼服或吞服。同时指导研究对象或其家人每天记录服用情况,并由试验者每周电话跟踪监督研究对象的服用情况。对照组按同样的方式服用安慰剂含片,其大小、颜色、味道、质地等与益生菌含片相同,只是不含有活菌。两组均连续服药3个月。
1.3 检测指标
1.3.1 口腔检查 在试验开始前和3个月后试验结束时,研究对象在医院门诊接受口腔检查,常规对其口腔卫生情况、牙齿数目、义齿、牙龈炎症等进行检查。同时检查牙菌斑情况,以“可见”或“未见”进行记录。让研究对象咀嚼一块经过预热的石蜡(约2 g),用塑料吸管收集约1 ml唾液,用探针在上下前牙收集菌斑约30 mg。
1.3.2 念珠菌检测 将唾液样本和菌斑样本分别接种在沙氏培养基上,培养基中含有氯霉素和庆大霉素抑制杂菌生长,37℃温浴4 d,用放大镜观察并计数菌落。为避免人为计数误差,菌落计数由两个人分别计数,取平均数。菌落评分标准[7]:0分:未观察到菌落生长;1 分:1~20 菌落形成单位(cfu)(103cfu/ml);2 分:21~50 cfu(104cfu/ml);3 分:>50 cfu(>105cfu/ml)。失访病例菌落评分记为3分。
1.4 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行统计学分析,计数资料以例和率的形式表示,采用χ2检验;计量资料以±s表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组服药依从性比较 由于研究对象的死亡和其他不明原因,造成试验组失访6例,对照组失访5例。整个试验过程中没有病例发生严重的不良反应,其中对照组有2例分别在试验第1 w和第2 w反映有胃部轻微不适,并终止继续试验。从研究对象记录的服药情况来看,都存在未服用或漏服的情况,组间差异无统计学意义(P>0.05,表1)。
表1 两组服药依从性比较
2.2 两组口腔念珠菌菌落评分比较 试验前,两组唾液念珠菌菌落评分无统计学差异(P>0.05);试验3个月后,试验组菌落评分高分比例由47.62%降至26.19%(P<0.05);而对照组试验前后菌落评分无显著变化(P>0.05),但试验后对照组菌落评分高分比例显著高于试验组(P<0.05,表2)。两组菌斑菌落评分也得到与唾液菌落评分相似的结果(表3)。
3 讨论
口腔正常微生物群是经过长期的自然选择形成的与宿主口腔存在相互受益的微生物群。在不同个体的口腔微生态环境中,微生物群的组成种类及数量处于动态平衡状态。口腔念珠菌也是正常口腔微生物群中的一种,一般不会引起念珠菌口炎。但随着年龄的增长,人体免疫力降低、机体出现一系列衰老变化,以及长期持续或间断刺激因素对口腔微环境的影响不断积累,最终可能导致口腔正常微生物群的动态平衡状态被打破,口腔念珠菌所占比例增高,引发患者出现口腔念珠菌口炎的风险,有研究提示,应用口腔益生菌可以显著降低老年人口腔念珠菌感染风险[8]。而国内对于应用益生菌防治老年人口腔念珠菌感染鲜有研究。
表2 两组唾液念珠菌菌落评分比较[n(%)]
表3 两组菌斑念珠菌菌落评分比较[n(%)]
本研究结果显示,试验组规律的含服口腔益生菌含片,可以显著降低受试者试验前后口腔念珠菌菌落数,与对照组服用安慰剂相比具有统计学差异,揭示含服益生菌含片可能降低老年人口腔念珠菌感染风险。本试验所采用的菌株(DSM17938)来源于人类,在研究过程中,除了有两例报告轻微的胃部不适以外,未没有发现受试者产生严重的不良反应,说明此菌株可以安全应用在老年群体中。
关于益生菌对口腔念珠菌的抑制作用的机制,有研究证明是因为罗伊乳杆菌通过产生罗氏菌素抑制念珠菌的生长;也有研究发现,可能是通过调节全身免疫系统和增加IgA的分泌而加强口腔黏膜屏障功能[9]。本研究发现,益生菌对念珠菌高携带量的个体的控制效果更好,其具体机制有待进一步研究。
本研究对益生菌制剂的用量没有做深入的探讨,且样本量小、随访时间不长,试验结果还需要更大样本量和多中心研究结果加以证实。
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