外阴阴道念珠菌病的念珠菌种类及抗真菌药物敏感性分析

刘小平，樊尚荣，彭燕婷，张慧萍



·用药指导·

外阴阴道念珠菌病的念珠菌种类及抗真菌药物敏感性分析

刘小平，樊尚荣，彭燕婷，张慧萍

目的 明确外阴阴道念珠菌病(VVC)患者分离的念珠菌种类及对抗真菌药物的敏感性。方法 选取2003年4月—2012年9月就诊于北京大学深圳医院妇科门诊的3 141例VVC患者为研究对象。采集念珠菌标本进行培养，采用API Candida鉴定分离菌株，采用Rosco纸片扩散法进行抗真菌药敏试验。结果 共分离出3 182株念珠菌(从41例患者中分离出两种念珠菌)。其中白念珠菌分离最多，占85.0%(2 705株)，其次依次为光滑念珠菌(338株)、近平滑念珠菌(49株)、热带念珠菌(31株)、酿酒酵母菌(23株)、克柔念珠菌(15株)、无名念珠菌(11株)、红酵母菌(6株)、鲁希特念珠菌(2株)及土生念珠菌(2株)。白念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、克霉唑及制霉菌素的耐药率分别为1.1%(18/1 612)、2.2%(36/1 612)、4.2%(68/1 612)、0.9%(14/1 612)、0。结论 白念珠菌是VVC主要致病菌，白念珠菌对抗真菌药物的耐药不常见。

念珠菌病，外阴阴道；念珠菌属；敏感性

刘小平，樊尚荣，彭燕婷，等.外阴阴道念珠菌病的念珠菌种类及抗真菌药物敏感性分析[J].中国全科医学，2015，18(7)：834-837.[www.chinagp.net]

Liu XP,Fan SR,Peng YT,et al.Species and antifungal susceptibility of Candida in patients with vulvovaginal candidiasis[J].Chinese General Practice，2015，18(7)：834-837.

外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)是女性寻求妇科护理的最常见原因，白念珠菌是VVC患者的主要致病菌。研究显示非白念珠菌的患病率在增加，主要与光滑念珠菌有关。非白念珠菌常对唑类耐药，一旦被感染很难治愈，非白念珠菌感染的患者数目增加，使VVC的诊断和治疗更加困难[1-3]。本研究对2003—2012年北京大学深圳医院妇科门诊VVC患者的念珠菌种类以及念珠菌对抗真菌药物敏感性进行报道，以期了解念珠菌种类及其对抗真菌药物敏感性的变化，指导临床选择适宜的抗真菌药物。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2003年4月—2012年9月就诊于北京大学深圳医院妇科门诊的3 141例VVC患者为研究对象。VVC诊断依据主要包括：外阴瘙痒、灼痛、黏膜充血和白带增多；阴道分泌物镜检及念珠菌培养阳性。排除已知合并其他生殖道感染，如滴虫性阴道炎、细菌性阴道病或沙眼衣原体感染者。本研究由医院的伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 标本采集 用灭菌棉拭子从阴道侧壁取分泌物，将棉拭子置0.9%氯化钠溶液试管内送检。采用盐水湿片法直接显微镜检查，见到有卵圆形芽生孢子或假菌丝为念珠菌阳性。对所有镜检阳性患者同时采集标本进行真菌培养及药敏试验。

1.3 方法 (1)真菌培养：分离平板采用科玛嘉显色培养基37 ℃培养24～48 h。采用法国梅里埃公司生产的API Candida鉴定分离菌株。菌种保存在脱脂牛乳培养基中，-70 ℃。(2)药敏试验：应用Rosco(A/S Rosco，Taastrup，Denmark)药片扩散法对检出的念珠菌进行体外药敏试验。操作方法见文献[4]介绍。根据制造商的说明判定结果，氟康唑、咪康唑、克霉唑、益康唑和酮康唑，抑菌圈直径≥20 mm为敏感(S)；直径12～19 mm为中介(I)；直径≤11 mm为耐药(R)。制霉菌素和伊曲康唑，抑菌圈直径≥15 mm为敏感(S)；直径10～14 mm为中介(I)；无抑菌圈为耐药(R)。

1.4 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件进行数据分析。计数资料以相对数表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 VVC患者一般情况 3 141例VVC患者年龄为18～55岁，平均为(30±7)岁。其中1 224例以往有VVC病史，405例患有复发性VVC，396例在VVC之前有抗生素治疗史，129例有食物或药物过敏史、过敏性疾病史。

2.2 念珠菌种类 3 141例VVC患者，共分离出3 182株念珠菌(从41例患者中分离出两种念珠菌)。其中白念珠菌2 705株(占85.0%)；2003—2007、2008—2012年白念珠菌分离率分别为88.3%(1 294/1 466 )、82.2%(1 411/1 716),二者比较差异有统计学意义(χ2=22.64,P<0.01)。见表1。

表1 2003—2012年VVC患者念珠菌种类及分布情况(株)

2.3 抗真菌药物敏感性 对其中1 941例VVC患者分离的念珠菌进行抗真菌药敏试验，白念珠菌与非白念珠菌对氟康唑、咪康唑、克霉唑药敏结果分布间差异均有统计学意义(P<0.05)；而对伊曲康唑药敏结果分布间差异无统计学意义(P>0.05)；二者对制霉菌素均无耐药(见表2)。不同年份白念珠菌对氟康唑、克霉唑、伊曲康唑药敏结果分布间差异无统计学意义(P>0.05)；而对咪康唑药敏结果分布间差异有统计学意义(P<0.01)；各年对制霉菌素均无耐药(见表3)。与唑类敏感念珠菌相比，对某一种唑类耐药的念珠菌对其他唑类耐药率增加，差异有统计学意义(P<0.01，见表4)。

3 讨论

3.1 念珠菌种类 Sobel等[5]报道的393例复杂VVC病例，其中96%是与白念珠菌有关。Barnhart等[6]报道的复杂型VVC的念珠菌类型中，91%由白念珠菌引起。Richter等[7]在VVC患者中分离出593株念珠菌，其中包括420株白念珠菌(70.8%)和112株光滑念珠菌(18.9%)。Fan等[4]研究发现，89.5%的VVC患者可分离出白念珠菌，7.9%可分离出光滑念珠菌。近年来研究显示，白念珠菌的检出率为46.9%～76.3%[8-12]。白念珠菌在VVC患者中的分离率差异可能反映了研究对象的不同。在这些报道中，所获得的念珠菌通常来源于顽固性VVC患者和那些用常规显微镜检查未能诊断的患者，导致白念珠菌的检出率可能降低。本研究中，白念珠菌仍是引起VVC最常见的念珠菌种类(占85.0%)。在不同研究中不同的年龄分布也可以解释VVC患者中白念珠菌检出率差异。非白念珠菌种多见于老年患者。Holland等[13]研究显示，白念珠菌和非白念珠菌感染患者的平均年龄分别是33岁和43岁。本研究中，2008—2012年比2003—2007年白念珠菌分离率降低的原因有：(1)非白念珠菌在VVC人群中所占比例上升；(2)非白念珠菌在所研究的VVC人群中比例上升，后者可能与研究者所在医院复杂的VVC病例增加相关。

3.2 念珠菌对抗真菌药物的敏感性 白念珠菌对大多数唑类敏感，但大多数非白念珠菌菌种对唑类耐药[14-17]。不同研究显示，从VVC患者分离的念珠菌对制霉菌素的耐药性不同，Richter等[7]发现念珠菌对制霉菌素都敏感，Consolaro等[18]研究发现45%的VVC患者念珠菌对制霉菌素剂量依赖敏感。本研究支持Richter等[7]的研究结果，VVC患者分离出的念珠菌对制霉菌素敏感。制霉菌素对白念珠菌的高敏感率，可能与过去20余年广泛应用唑类而制霉菌素应用较少有关。本研究发现，白念珠菌对抗真菌药物的耐药少见，非白念珠菌对唑类耐药率高于白念珠菌，所有念珠菌是对制霉菌素敏感。唑类抗真菌药物存在交叉耐药，说明VVC患者的念珠菌对某一种唑类耐药时，很可能对其他唑类耐药，在治疗药物选择时可选择非唑类抗真菌药物或增加药物剂量以达到治疗效果。

由于从VVC患者分离的念珠菌仍然是以白念珠菌为主，且白念珠菌对大多数唑类敏感，经验性治疗建议首选唑类抗真菌药；大多数非白念珠菌菌种对唑类抗真菌药物耐药，鉴定念珠菌种类和药敏试验对于非白念株菌引起的VVC是必要的；白念珠菌和非白念珠菌都对制霉菌素敏感，对于反复发作或无条件做鉴定和药敏试验的患者，制霉菌素是适宜的药物。

表2 VVC患者分离的念珠菌对抗真菌药物的敏感性〔株(%)〕

注：S为敏感，I为中介，R为耐药；*为白念珠菌与非白念珠菌药敏结果分布情况比较 ；-代表无该数据

表3 不同年份VVC患者分离的白念珠菌对抗真菌药物的敏感性〔株(%)〕

注：-代表无该数据

表4 VCC患者唑类抗真菌药物的交叉耐药情况〔株(%)〕

注：-代表无该数据

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(本文编辑：崔沙沙)

Species and Antifungal Susceptibility of Candida in Patients with Vulvovaginal Candidiasis

LIUXiao-ping,FANShang-rong,PENGYan-ting,etal.

DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUniversityShenzhenHospital,Shenzhen518036,China

Objective To determine species and antifungal drug susceptibility of Candida from patients with vulvovaginal candidiasis(VVC).Methods We enrolled 3 141 patients with VVC who received treatment in gynecological clinic of Peking University Shenzhen Hospital from April,2003 to September,2012.Specimens of Candida were collected from enrolled patients,API Candida system was used to identify the species,and Rosco Disk Diffusion method was employed to test drug susceptibility.Results A total of 3 182 strains of two species′ candida were extracted from 41 patients.C.albicans was the predominant species(2 705 strains,85.0%) in VVC,followed by C.glabrata(338 strains),C.parapsilosis(49 strains)，C.tropicalis(31 strains)，Saccharomyces cerevisiae(23 strains)，C.krusei(15 strains)，Candida famata(11 strains)，Rhodotorula sp.(6 strains)， C.lusitaniae(2 strains) and Candida humicola(2 strains).The drug resistance rate of C.albicans to fluconazole,itraconazole,miconazole,clotrimazole,and nystatin were 1.1%(18/1 612),2.2%(36/1 612),4.2%(68/1 612),0.9%(14/1 612)and 0.Conclusion Candida albicans is the predominant Candida species in patients with vulvovaginal candidiasis.Resistance of vaginal C.albicans to antifungal agents is infrequent.

Candidiasis,vulvovaginal;Candida;Sensitivity

深圳科技创新委员会课题(201201001，ZDSY20120619145501681)

518036广东省深圳市，北京大学深圳医院检验科(刘小平)，妇产科(樊尚荣,彭燕婷，张慧萍)

樊尚荣，518036广东省深圳市，北京大学深圳医院妇产科；E-mail:fanshangrong@163.com

R 519.3

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.07.025

2014-12-01；

2015-01-25)