子痫前期患者A-FABP表达水平与胰岛素抵抗相关性研究*

李亚萍，邹余粮，张 琳，黄 新，秦 勇

(1.陕西省西安市中心医院妇产科 710003；2.西安交通大学第一附属医院，西安 710061； 3.陕西省西安市中心医院神经内科 710003；4.陕西省西安市中心医院普通外科 710003)

子痫前期是人类妊娠特发疾病之一，发病率约为5%，主要表现为高血压和蛋白尿，可累及肝、肾、心血管系统多个器官以及胎盘，严重时会危及围生儿及孕妇生命[1-2]。已有大量关于子痫前期发病机制的研究，但尚未取得明确结论[1,3]。脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)作为细胞质脂肪酸结合蛋白家族中的一员，与2型糖尿病、动脉粥样硬化、代谢综合征等密切相关[4-5]。而胰岛素抵抗(IR)是糖尿病、动脉粥样硬化的病理生理基础，且IR时机体代谢发生紊乱[6]。研究表明，A-FABP及IR可能与子痫前期的发病相关[7]，但关于A-FABP、IR之间相关性的研究较少。本研究通过对比分析血清及胎盘组织A-FABP的水平、空腹胰岛素(FINS)、IR等指标，探讨子痫前期患者A-FABP水平与IR之间的相关性。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2013年10月至2015年10月陕西省西安市中心医院妇产科收治的子痫前期患者，共76例，其中轻度子痫前期42例、重度子痫前期34例。子痫前期的诊断标准参照《妊娠高血压疾病诊治指南》[8]。所有病例均为单胎，无原发性高血压、心脏病或肝、肾疾病史，无其他妊娠合并症，孕期未使用激素类及影响血压的药物。随机选取同期健康孕妇48例作为对照组。收集并统计所有孕妇的一般资料，包括年龄、孕周、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MABP)等，见表1。子痫前期患者的年龄、孕周及BMI与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性；SBP、DBP、MABP与对照组间差异有统计学意义(P<0.05)，重度子痫前期患者的SBP及MABP水平高于轻度子痫前期患者(P<0.05)。

1.2方法

1.2.1标本采集 抽取所有研究对象(子痫前期患者未用药前)空腹6 h以上的肘静脉血5 mL，取其中3 mL常规分离血清，-80 ℃冰箱保存备用；2 mL用于检测空腹血糖(FBG)的水平。胎盘娩出后，于母面中央取小块组织(避开钙化、出血、梗死区等)，生理盐水漂洗后，于10%的中性甲醛中固定24～48 h，常规石蜡包埋，切片备用。

表1 各组研究对象一般资料比较

注：与子痫前期组比较，*P<0.05;与重度子痫前期数期相比，#P<0.05

1.2.2检测方法及指标 血清A-FABP及FINS的测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。采用全日立自动生化分析仪检测FBG、24 h尿蛋白的水平。取胎盘标本切片苏木精-伊红(HE)染色：将组织切片脱蜡入水，加入苏木精、伊红染色，冲洗后脱水封片，于光学显微镜下观察各组胎盘组织形态学变化。胎盘组织中A-FABP的检测采用免疫组织化学SABC法，一抗为兔抗人A-FABP，阴性对照组的一抗为PBS。计算稳态模型的IR指数(HOMA-IR)=(FINS×FBG)/22.5。

1.2.3结果判定方法 胎盘合体滋养层细胞中出现棕黄色颗粒为阳性，无色或与背景颜色一致为阴性。随机选取4个高倍视野，计算阳性细胞百分率。无阳性细胞为0分，阳性细胞百分率1%～25%为1分，>25%～49%为2分，>49%为3分。根据多数细胞的着色强度计算强度得分，无着色为0分，浅棕褐色为1分，棕褐色为2分，深棕褐色为3分。阳性细胞百分率与强度的得分之和：0～1分为(-)，2分为(+)，3～4分为(++)，5～6分为(+++)。

2 结 果

2.1各组研究对象实验室指标比较 与对照组相比，子痫前期组患者的血清A-FABP、FBG、FINS及HOMA-IR水平均明显升高(P<0.01)；对子痫前期两个亚组进行比较发现，重度子痫前期患者的24 h尿蛋白、血清A-FABP、FINS及HOMA-IR水平明显高于轻度子痫前期组(P<0.05)，见表2。

表2 各组研究对象血清A-FABP、FBG、FINS、HOMA-IR的比较

注：与子痫前期组比较，*P<0.01;与重度子痫前期数期相比，#P<0.05

2.2免疫组化检测结果

2.2.1A-FABP在胎盘组织中的表达 观察各组胎盘组织HE染色的形态学发现，对照组正常的胎盘组织中绒毛表面滋养层细胞无分层现象，而子痫前期胎盘组织滋养层细胞出现弥漫性的增生，见图1。免疫组化结果显示A-FABP主要在合体滋养层细胞、细胞滋养层细胞表达，主要分布于细胞质和细胞核中，阳性颗粒为棕黄色颗粒，见图2。

注：A为对照组正常的胎盘组织；B为轻度子痫前期患者的胎盘组织；C为重度子痫前期患者的胎盘组织

图1不同胎盘组织的HE染色(200×)

2.2.2胎盘组织中A-FABP表达强度的比较 与对照组相比，子痫前期患者胎盘组织中A-FABP的表达强度明显升高(P<0.01)，且胎盘组织中A-FABP的表达强度在轻度子痫前期和重度子痫前期组间差异有统计学意义(Z=-2.104，P=0.035)。见表3。

注：A为滋养层细胞中A-FABP阴性表达；B为滋养层细胞中A-FABP弱阳性表达；C为滋养层细胞中A-FABP中阳性表达；D为滋养层细胞中A-FABP强阳性表达

图2 免疫组化滋养层细胞中A-FABP的表达(400×)

2.3血清A-FABP、胎盘A-FABP及HOMA-IR之间的相关性分析 子痫前期胎盘组织A-FABP表达强度与血清A-FABP水平呈正相关(P<0.01)；血清A-FABP水平及胎盘A-FABP表达强度均与HOMA-IR呈正相关(P<0.01)。见表4。

表4 实验室各血清指标相关性分析结果

注：-表示无数据

3 讨 论

子痫前期是危害母婴健康的妊娠特发性疾病。目前认为其发病机制与脂质代谢紊乱、IR及血管内皮细胞功能异常等因素密切相关，但确切的机制尚不清楚[9]。有研究表明，子痫前期明显的高空腹胰岛素及IR状态从多方面发挥作用诱导发病[10]，且脂肪细胞因子A-FABP的水平与子痫前期的发病呈正相关[11-12]。但极少有研究报道A-FABP与IR之间的关系。笔者前期研究基础已证实A-FABP表达与子痫前期的发病及病情严重程度之间存在相关性[13]，但其具体机制及与IR的关系尚未能确定。因此，本研究旨在分析子痫前期患者血清及胎盘组织A-FABP水平与IR之间的相关性，初步探讨A-FABP在子痫前期发生、发展中可能的机制，以指导临床采取针对性的治疗改善患者症状。

已有大量研究证实血清A-FABP水平及在胎盘组织中的表达与子痫前期的发生及严重程度有关[14-15]。A-FABP是一种参与机体脂质代谢的脂肪因子，其表达与糖尿病、代谢综合征密切相关。IR是指各种原因引起的糖代谢异常状态，亦是导致代谢综合征的原因之一。典型的IR状态是正常妊娠期的一种生理适应性反应，而较高的IR会引起脂代谢紊乱，进而影响血管内皮细胞的功能，促进妊娠高血压进一步发展，最终诱发子痫前期[10]。因此，研究A-FABP与IR是否互相影响共同参与子痫前期的发生和发展具有重要的临床意义。本研究结果发现，子痫前期患者的血清A-FABP水平、胎盘A-FABP表达强度、FINS及HOMA-IR均高于对照组，且重度子痫前期患者A-FABP的水平、胎盘A-FABP表达强度、FINS及HOMA-IR明显高于轻度子痫前期患者(P<0.05)，即A-FABP水平及HOMA-IR均与子痫前期的发生及严重程度相关，与文献[16-17]的研究结果一致。进一步对血清A-FABP水平、胎盘A-FABP表达及HOMA-IR进行相关性分析发现，子痫前期胎盘组织A-FABP表达强度与血清A-FABP水平呈正相关，同时二者均与HOMA-IR呈正相关。因而推测A-FABP在调节脂代谢的同时可能影响胰岛素灵敏度，导致IR的发生，共同参与子痫前期的发生和发展。因此，A-FABP可以作为妊娠期表征代谢状态的临床指标之一，当该指标异常升高时，可以提示患者存在IR状态、代谢综合征及子痫前期发生的可能；同时，临床上也可以通过采取一定方法调控该蛋白的表达水平，进行妊娠代谢综合征、子痫前期的预防和治疗。

综上所述，A-FABP水平及高IR与子痫前期的发生密切相关，其机制可能是高水平A-FABP通过异常的脂代谢状态引起糖代谢异常，共同诱导子痫前期的发生。但具体的分子机制有待进一步研究。

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