93例女性生殖道感染念珠菌菌种分布及药敏结果分析

李前辉 李 鹤 林 涛 唐朝贵 姜玉章 江 明

·论著·

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93例女性生殖道感染念珠菌菌种分布及药敏结果分析

李前辉1李 鹤2林 涛1唐朝贵1姜玉章1江 明2

目的明确93例女性生殖道念珠菌感染菌种分布及药敏。方法收集93例女性生殖道感染患者分泌物，采用Sabouraud琼脂培养基进行菌落培养，血清芽管试验及CHROMagar显色培养基进行菌株的筛选，DL-96 FUNGUS念珠菌鉴定系统进行念珠菌鉴定及药敏试验。结果菌种构成分布依次为白念珠菌81株(87.10%)，光滑念珠菌8株(8.60%)，都柏林念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各1株(1.08%)。白念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%，其它依次为伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)和伊曲康唑(62.96%)。光滑念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%，其它依次为伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)和伊曲康唑(25.00%)。结论女性生殖道感染的念珠菌主要菌种是白念珠菌，敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶。

女性生殖道； 念珠菌； 药物敏感试验

女性生殖道感染念珠菌是引起妇科炎症常见的原因之一，可导致外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)。很多VVC经治疗后仍容易复发，给病人带来困扰和负担。本研究通过对江苏淮安及周边地区女性患者生殖道感染念珠菌标本进行病原学鉴定及体外药物敏感试验，揭示本地区致病菌种的分布特征和药敏特点，为临床诊疗及合理用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 93例标本来源于南京医科大学附属淮安第一医院2012年6月至2017年3月皮肤科和妇科初诊患者。患者年龄18～80岁，平均30.5岁。患者在就诊前未接受过抗真菌药物治疗、未合并其它生殖道疾病。患者具有外阴瘙痒、白带增多、呈豆腐渣样等典型临床症状。以无菌棉拭子经窥阴器进入阴道，取阴道后穹隆分泌物进行常规镜检，镜检见真菌者进一步做真菌培养。

1.2 培养基与试剂 Sabouraud琼脂培养基购自杭州滨河微生物试剂有限公司，CHROMagar显色培养基购自郑州博赛生物科技有限公司，DL-96 FUNGUS念珠菌鉴定与药敏试验系统购自珠海迪尔生物工程有限公司。

1.3 菌种培养鉴定及药敏试验

1.3.1 标本接种 将采集的标本分区划线接种于Sabouraud琼脂培养基，放置于35℃真菌培养箱孵育24～72 h，菌落白色、奶油样，软而光滑、有光泽。

1.3.2 血清芽管实验 挑取少许菌落混悬在0.2～0.5 mL的健康人血清中，37℃孵育2～4 h，每小时观察1次，取1滴菌悬液置载玻片上，镜下见芽管者为白念珠菌。

1.3.3 菌落筛选 将菌落划线接种于CHROMagar显色培养基，25℃～30℃培养48～72 h，观察结果。白念珠菌为绿色菌落；光滑念珠菌为紫色菌落；热带念珠菌为蓝灰色、铁蓝色菌落；克柔念珠菌为粉红色菌落；白色至淡粉色为其它种类的念珠菌。

1.3.4 菌种鉴定及药敏试验 从培养基上挑取菌落制成浊度为1麦氏单位的菌悬液，利用DL-96 FUNGUS念珠菌鉴定与药敏试验系统进行菌种鉴定及药敏试验，24 h后读取结果。

1.3.5 质控菌株 ATCC 90029(白念珠菌)、ATCC 15126(光滑念珠菌)、ATCC 13803(热带念珠菌)、ATCC 6258(克柔念珠菌)。

2 结果

2.1 念珠菌的菌种分布特征 念珠菌的菌种培养鉴定特点，见表1。

表1 念珠菌的菌种培养鉴定特点

在93例女性患者生殖道感染念珠菌标本中，病原学鉴定显示：菌种构成主要为白念珠菌(81株)，其次为光滑念珠菌(8株)，都柏林念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各有1株。菌种的构成比，见表2。

表2 93株念珠菌的菌种分布特征

2.2 念珠菌的体外药敏试验结果 白念珠菌的体外药敏试验结果显示：敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶(两者均达100.00%)，其它依次为伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)、伊曲康唑(62.96%)。见表3。

光滑念珠菌的体外药敏试验结果显示：敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶(两者均达100.00%)，其它依次为伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)、伊曲康唑(25.00%)。见表4。

表3 81株白念珠菌的体外药物敏感试验结果 例(%)

表4 8株光滑念珠菌的体外药物敏感试验结果 例(%)

3 讨论

白念珠菌是人体最重要的机会致病真菌之一[1]，在口腔、呼吸道、肠道、女性阴道均有分布，一般数量较少，不引起疾病，但是当机体免疫力降低时，则会大量繁殖而引起疾病。

有研究表明念珠菌感染已成为阴道感染的第二大病因，仅次于细菌性阴道炎[2]。女性在青春期以后雌激素水平增高，局部皮肤温暖潮湿，微生态环境发生改变，更适合念珠菌生长[3]，特别是妊娠期女性由于体内雌激素迅速增加而使阴道黏膜充血、水肿、通透性增强，阴道环境糖原水平较高，同时宫颈腺体分泌明显增加，导致阴道分泌物明显增多，这些都有利于念珠菌生长繁殖而引起VVC。妊娠期VVC检出率为10.0%～44.3%[4]。

有报道显示VVC占门诊阴道炎的30%[5]，有10%的患者为重复感染[6]。近年来由于性传播疾病的逐渐增多，加之广谱抗菌药物的滥用，生殖器念珠菌病(包括女性外阴阴道念珠菌病和男性包皮龟头炎)的发病率上升，并且随着抗真菌药物的频繁使用，耐药现象亦日益严重[7,8]，给治疗带来困难。

两性霉素B和5-氟胞嘧啶抗真菌活性较高，但由于这两种药物都具有较大不良反应，包括肾毒性大和肝功能损伤等，临床使用应谨慎，一般不作首选用药。伏立康唑为新一代三唑类抗真菌药，通过竞争性抑制细胞色素P450依赖的14α-脱甲基酶而阻断细胞膜麦角固醇的生物合成，导致细胞膜的构成和功能障碍，从而抑制真菌的生长和繁殖。

本研究对93例女性患者生殖道感染念珠菌标本进行了菌种培养与鉴定，结果显示：江苏淮安及周边地区女性患者的致病菌种主要是白念珠菌(占87.10%)，其次为光滑念珠菌(占8.60%)，其它菌种则少见。此项结果与国内外相关报道均一致[9-12]。同时本研究还对主要致病菌种进行了体外药敏试验，结果表明：对白念珠菌敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶，其它依次为伏立康唑、氟康唑及伊曲康唑；对光滑念珠菌敏感率最高的药物也是两性霉素B和5-氟胞嘧啶，其它依次是伏立康唑、氟康唑，而伊曲康唑对光滑念珠菌作用较差。由于临床上致病菌种主要是白念珠菌，因此临床治疗抗真菌药物可优先选用伏立康唑、氟康唑。

及时了解本地区致病菌种的分布特征及其药敏特点，合理规范使用相关抗菌药物，既有利于减轻患者负担，又有利于医疗资源优化配置。

本次研究仅收集到8株光滑念珠菌，样本量尚少，且抗真菌药物的种类亦偏少，其体外药敏试验分析还有待进一步补充。

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AnalysisofstraindistributionanddrugsensitivitytestofCandidain93femalepatientswithgenitaltractinfection

LIQianhui1,LIHe2,LINTao1,TANGChaogui1,JIANGYuzhang1,JIANGMing2.

1DepartmentofClinicalLaboratory,Huai'anFirstPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Huai'an223300,China; 2DepartmentofDermatology,Huai'anFirstPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Huai'an223300,China

LIHe,E-mail:hellomrlqh@163.com

Objective: To determine characteristics of the strain distribution and drug sensitivity test ofCandidain 93 female patients with genital tract infection.MethodsThe genital tract secretion specimens were collected from 93 female patients. TheCandidaisolates were cultured in Sabouraud dextrose agar. The types ofCandidaisolates were identified by CHRO Magar medium, germ tube test with serum and DL-96 FUNGUS System. The drug sensitivity ofCandidaisolates was detected by DL-96 FUNGUS System.ResultsOut of 91 specimens, 81 strains (87.10%) were identified asCandidaalbicans, 8 (8.60%) asCandidaglabrata, one (1.08%) asCandidadublinstrain, one (1.08%) asCandidatropicalis, one (1.08%) asCandidakruseiand one (1.08%) asCandidakefyrstrain. The drug sensitivity test ofCandidaalbicansshowed that the sensitivity rates of amphotericin B and 5-flucytosine were 100.00%, followed by voriconazole (93.83%), fluconazol (85.19%) and itraconazole (62.96%). The drug sensitivity test ofCandidaglabratashowed that the sensitivity rates of amphotericin B and 5-flucytosine were 100.00%, followed by voriconazole (87.50%), fluconazol (62.50%) and itraconazole (25.00%).ConclusionThe mostCandidaspecies in female genital tract infection isCandidaalbicans. The most sensitive drugs were amphotericin B and 5-flucytosine.

female genital tract;Candidaspecies; drug sensitivity test

1南京医科大学附属淮安第一医院检验科，江苏淮安，223300 2南京医科大学附属淮安第一医院皮肤科，江苏淮安，223300

李鹤，E-mail：hellomrlqh@163.com

(收稿：2017-08-02 修回：2017-09-25)