改良气相色谱分析法分离测定11种杂醇油

□ 李 珍 杨 洋 鄂尔多斯市药品医疗器械检验研究中心

改良气相色谱分析法分离测定11种杂醇油

□ 李 珍 杨 洋 鄂尔多斯市药品医疗器械检验研究中心

本试验的目的是对酒中杂醇油进行气相色谱测定分析，监测白酒中杂醇油的成分及其含量。方法：采用气相色谱（GC）法，改良国标方法，由DB-1701毛细管柱替代GDX-102填充柱（60-80目），分流并程序升温，直接进样，氢火焰离子化检测器（FID）检测。结果：改良后的GC法可以同时有效分离出混合标准液中11种杂醇油并能进行定量分析。结论：本试验在国标方法基础上进行改进研究，解决了国标方法中GC法无法实现酒中常见醇类各组分分离的问题，并应用到样品的测定当中取得了满意的结果。

气相色谱（GC）法；杂醇油；白酒

“杂醇油”是来源于酒精生产过程中一种术语。在酒精生产过程最终得到的产品是酒精（乙醇），对乙醇而言，除了乙醇之外的醇统称为杂醇，因其在液体里以油状出现，故称之“杂醇油”。杂醇油是碳原子数大于2的脂肪族醇类的统称，这些醇的分子量比乙醇的分子量大，又称为高级醇[1]。

白酒在发酵过程中，杂醇油除由糖类产生外，氨基酸分解也能产生杂醇油。原料中蛋白质含量多时，酒中杂醇油的含量也高。杂醇油是酒的芳香成分之一，其含量多少对白酒的风味很重要，其主要成分是异戊醇、戊醇、异丁醇、丙醇等[2]，除了异戊醇微甜以外，其他如异丁醇、正丙醇、正丁醇都是苦的，干酪醇虽香气柔和，但也有苦味，并且苦味又重又长。因此，白酒的杂醇油不能过高，否则带有较重的苦涩味，且对人有毒害作用，能使神经系统充血，使人头痛。杂醇油的碳链比乙醇高，沸点比乙醇高，在体内的氧化速度比乙醇慢，在机体内停留时间较长，所以对人体的毒性和麻醉作用也比乙醇高[3]，其毒性随分子量增大而加剧，其中以异戊醇、异丁醇的毒性较大，异丁醇为乙醇的8倍，异戊醇比乙醇大19倍，因此国家标准《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》（GB/T 5009.48-2003）规定了甲醇和杂醇油的限量。但是在实际工作当中，国家标准GC法存在常见醇类无法实现的各组分分离等问题，本试验在国家标准方法基础上进行改良，对方法的性能指标进行考察，以期达到有效分离并测定酒中杂醇油的目标。

1 仪器及试药

配有氢火焰离子化检测器（FID）的安捷伦G3440A型气相色谱仪；BP211D型电子天平，异丁醇、异戊醇及乙酸乙酯（均为色谱纯）；纯化水（由超纯水系统制备）；杂醇油混合标准液（由内蒙古质监局提供）。

2 杂醇油的测定

2.1 制备无甲醇的乙醇溶液

取300 mL乙醇（95%），加高锰酸钾少许，蒸馏，收集馏出液。在馏出液中加入硝酸银（取1 g硝酸银溶于少量水中）和氢氧化钠溶液（取1.5 g氢氧化钠溶于少量水中），摇匀，取上清液蒸馏，弃去最初50 mL馏出液，收集中间馏出液约200 mL，用酒精比重计测其浓度，然后加水配成无甲醇的乙醇（体积分数为60%）。

2.2 制备无杂醇油的乙醇

取2.1中间馏出液，加0.25 g盐酸间苯二胺，加热回流2 h，用分馏柱控制沸点进行蒸馏，收集中间馏出液100 mL。

2.3 色谱条件

色谱柱：DB-1701毛细管柱。柱长：30 m。内径：0.25 mm。FID检测器温度：250 ℃。进样口温度：220℃。载气（N2）流速：20 mL/min。氢气（H2）流速：40 mL/min。空气流速：400 mL/min。尾吹气或柱气流+尾吹气：30 mL/min，分流比为4∶1。

2.4 对照品溶液的制备

准确称取异丁醇、异戊醇各600 mg及乙酸乙酯800 mg，以少量水洗入100 mL容量瓶中，并加水稀释至刻度，置冰箱保存。

吸取10 mL标准液于100 mL容量瓶中，加入一定量处理后的乙醇定容后，乙醇含量控制在60%，并加水稀释至刻度。

图1 杂醇油混标液组分

图2 样品中检测出的成分

3 结果与分析

3.1 定性分析

以各组分保留时间定性。吸取标准使用液和样液各0.50 μL，分别测得保留时间，试样与标准出峰时间对照而定性。

3.2 定量分析

进0.50 μL标准使用液，制得色谱图，分别量取各组分峰高。进0.50 μL试样，制得色谱图，分别量取峰高，与标准峰比较计算。

3.3 结果计算

杂醇油混标液组分如图1所示。方法检出限为异丁醇不得高于0.22 ng、异戊醇不得高于0.15 ng。

杂醇油以异丁醇、异戊醇总量计算：X=h1×A×V1×100/（h2×V2×1000）

式中：X为试样中某组分的含量，单位为克每百毫升（g/100 mL）；A为进样标准中某组分的含量，单位为毫克每毫升（mg/mL）；h1为试样中某组分的峰高，单位为毫米（mm）；h2为标准中某组分的峰高，单位为毫米（mm）；V2为试样液进样量，单位为微升（μL）；V1为标准液进样量，单位为微升（μL）。

异丁醇结果为0.032 g/100mL 、异戊醇结果为0.035 g/100mL，均小于检出限，杂醇油以异丁醇、异戊醇总量计算为0.067 g/100mL。

4 讨论

测定酒中杂醇油常用的方法主要有比色法和气相色谱（GC）法。比色法的原理是异戊醇和异丁醇在硫酸作用下生成戊烯和丁烯，再与对二甲胺基苯甲醛作用显橙黄色，与标准系列比较定量，操作比较繁琐且不能测定单一组分；采用GC法测定杂醇油的原理是利用不同醇类在氢火焰中的化学电离进行检测，根据峰高与标准比较定量，GC法除蒸馏酒外都需蒸馏后才能分析，在蒸馏过程中可能会造成某些易挥发成分的损失而导致结果偏低。国家标准中的GC法采用填充柱，因甲醇、杂醇油与其他组分难以分离，使定量产生较大误差[4]，本试验在国家标准的方法测定基础上进行改进研究，选用DB-1701毛细管柱，利用毛细管柱柱效高、热稳定性好、分离速度快的优点，采用直接进样，用氢火焰离子化检测器检测，对杂醇油混合标准液进行分析测定，实现了11种组分较好的分离效果，并应用到样品的测定当中取得了满意的结果。

[1]孙慧.浅析白酒杂醇油的含量[J].酿酒,2003(30):82-83．

[2]寻思颖.关于白酒中甲醇和杂醇油的测定[J].标准化报道,2001(22):33-34．

[3]陈建文,曹爱华,匡云峰,等.如何测定酒中的杂醇油[J].预防医学文献信息,2001(7):284-285．

[4]彭清涛，王力.毛细管气相色谱法同时测定白酒中的甲醇和杂醇油[J].化学分析计量,2007(1):33-35．

李珍（1984—），女，内蒙古鄂尔多斯人，硕士，鄂尔多斯药品医疗器械检验研究中心检验一室副主任，中级工程师。研究方向：药品、食品、化妆品检验。