不同产地民族药材大黄中蒽醌类成分的含量对比研究

2017-12-22乌仁图雅萨日盖萨茹拉其力格尔

中国民族医药杂志 2017年6期

关键词：甲醚蒽醌芦荟

乌仁图雅萨日盖萨茹拉其力格尔

(内蒙古鄂尔多斯市蒙医研究所,内蒙古鄂尔多斯 017010 )

不同产地民族药材大黄中蒽醌类成分的含量对比研究

乌仁图雅萨日盖萨茹拉其力格尔

(内蒙古鄂尔多斯市蒙医研究所,内蒙古鄂尔多斯 017010 )

目的：比较不同产地大黄中的总蒽醌及游离蒽醌的含量差异。方法参考《中华人民共和国药典》(2015年版)方法，色谱柱采用ZORABAX SB-C18柱(4.6 mm × 150 mm，5μm)，以甲醇-0.1%磷酸溶液(80%-20%)及甲醇- 0.1%磷酸溶液 (78：22)为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为254 nm，对不同产地的3批大黄药材进行含量测定。结果不同产地大黄均含有5种蒽醌类衍生物，山西质量最优。结论本实验考察了不同产地大黄的质量差异，可为大黄的质量评价及规范化种植提供参考。

大黄；芦荟大黄素；大黄酸；大黄素；大黄酚；大黄素甲醚；高效液相色谱法；含量测定

大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L. 、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim.ex Balf. 或药用大黄 Rheum officinale Baill.的干燥根和根茎。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖，除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串阴干，烘干或切成纵横较薄的片子晒干。

掌叶大黄主产于甘肃、青海、西藏、四川等地，主要为栽培，产量最大。唐古特大黄主产于青海、甘肃、西藏及四川地区，药用大黄唐古特大黄主产于四川、贵州、云南、湖北、陕西等地，栽培或野生。以甘肃、青海产品为地道药材(西大黄)，尤以甘肃武威(凉州)，张掖及河西地区所产的野生品，视为大黄中之珍品，称为“凉黄”。商品中又将产于四川的川东与湖北、贵州及陕西毗邻地区药用大黄的栽培品称为“南大黄”；将产于甘孜、阿坝、凉山州、青海(德格)及云南等地药用大黄的产品称为“雅黄”。

大黄主要含蒽醌类衍生物。其中游离蒽醌衍生物有大黄酸(Rhein)、大黄素(Emodin)、大黄酚(Chrysophanol)’芦荟大黄素(Aloeemodin)、大黄素甲醚(Physcion)等，为大黄的抗菌成分。结合性蒽醌类衍生物为游离蒽醌类的葡萄糖甙或双葡萄糖甙和双蒽酮甙。为大黄的主要泻下成分，其中以双蒽酮甙作用最强。双蒽酮甙-番泻叶甙A及B(Sennoside A、B,互为异构体)、番泻叶甙C (Sennoside C)。

大黄是蒙医药常用药材，具有泻热通肠，凉血解毒，逐淤通经的作用。主要用于实热便秘，积滞腹痛，泻痢不爽，湿热黄疸，血热吐衄，目赤，咽肿，肠痈腹痛，痈肿疔疮，淤血经闭，跌扑损伤，外治水火烫伤[1-3]。本试验以《中华人民共和国药典》(2015版第一部)[4]所载HPLC方法为参考，通过调整色谱条件，测定和比较了山西大黄及批号不同的甘肃大黄中5种游离蒽醌和总蒽醌的含量，其结果对人工栽培大黄质量控制具有较大意义，同时可为人工栽培大黄的临床的合理应用提供参考数据。

1 材料

1.1 仪器：Agilent 1260型高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)；SK-3300LHC型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；RE-2000型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；DV215CD型天平(美国OHAUS公司)。

1.2 试剂：芦荟大黄素对照品(批号 110795- 201308)、大黄酸对照品(批号 110757- 200206)、大黄素对照品(批号 110756-201512)大黄酚对照品(批号 110796- 201319)、大黄素甲醚对照品(批号 110758-201415)均购自中国食品药品检定研究院供含量测定用。甲醇(色谱纯)、水(娃哈哈牌纯净水)、其他试剂均为国产分析纯。 3批大黄饮片分别购自(山西；批号：1305001)山东嘉泰中药饮片有限公司，(甘肃-1；批号：20160302)安徽纪淞堂中药饮片有限公司，(甘肃-2；批号：1508011173)河北蔺氏盛泰药业有限公司。

2 方法

2.1 色谱条件：流动相：甲醇- 0.1%磷酸溶液 (80%-20%)及甲醇- 0.1%磷酸溶液(78%-22%)；流速：1.0 mL/min；色谱柱：ZORABAX SB-C18柱(4.6 mm × 150 mm，5μm)；检测波长：254 nm；进样量：10 μL。

2.2 对照品溶液制备：精密称取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品适量，置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，制成浓度为含芦荟大黄素17.4 μg/mL、大黄酸16 μg/mL、大黄素16μg/mL、大黄酚 16 μg/mL、大黄素甲醚 8 μg/mL 的混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

2.3.1 游离蒽醌供试品溶液：取大黄样品各粉末(过四号筛)约0.5 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3.2 总蒽醌供试品溶液: 取大黄样品各粉末(过四号筛)约0.15 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5 mL置锥形瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10mL，超声处理2 min，再加三氯甲烷10mL，加热回流1 h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，10 mL/次，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇置水浴中微热溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 样品含量测定：精密量取按和“2.3”所制备的对照品溶液及供试品溶液10μL按“2.1”所建立的色谱条件对3批不同产地的大黄药材进行含量测定。计算含量时游离蒽醌以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的总量计，总蒽醌以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的总量计。