HPLC法测定西帕依固龈液不同制备方法中没食子酸的含量

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喀什地区食品药品检验所，新疆 喀什 844000

HPLC法测定西帕依固龈液不同制备方法中没食子酸的含量

阿依努尔·阿木提司马义江·阿布都热西提

喀什地区食品药品检验所，新疆 喀什 844000

目的研究不同制备方法对西帕依固龈液中没食子酸含量的影响，为其制备工艺提供理论支持。方法采用高效液相色谱法测定两种方法制备的西帕依固龈液中没食子酸的含量。结果标准规定的方法制备的西帕依固龈液中的没食子酸的的含量为0.03183mg/mL，改进后的方法制备的西帕依固龈液中的没食子酸的含量为0.04505 mg/mL。结论新制备方法明显优于原制备方法。

西帕依固龈液；制备方法；没食子酸

西帕依固龈液是维吾尔族传统医药，具有清洁口腔、利咽除臭等功效，其有效成分没食子酸具有清洁口腔、利咽除臭、固涩、燥温、止血等攻效[1]，用于防治口腔粘膜病、咽喉肿痛等疾病[2]，国家部颁标准维吾尔药分册已收载[3]。改进的西帕依固龈液制备方法，同原西帕依固龈液相比，减少了没食子的用量，经改进的方法制备的试样，与市售的2批没西帕依固龈液比对进行了“没食子酸”的含量测定，证明了改进是成功的。现报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Waters Alliance E-2695高效液相色谱(Waters 2695 分离单元， 2998 光电二极管阵列检测器)；岛津UV-2450紫外可见分光光度计； BP211D型分析天平(德国Sartorius公司)；E100H超声波清洗机(德国艾尔玛)。

1.2 材料 没食子酸对照品(批号：110831-201605，中国食品药品检定研究院)；西帕依固龈液(样品1和样品3的批号为161206、161012，新疆奇康哈博维药有限公司；样品2为按照改进的制备方法制备的试样)。甲醇(色谱纯，美国TEDIA试剂公司)；磷酸(分析纯，天津市永大化学试剂开发中心)，水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 处方及制备方法

2.1.1 处方 没食子 20g，甜蜜素2g，薄荷香精1mL，苯甲酸钠0.5g

2.1.2 制备方法 取没食子20g，粉碎成粗粉，加水浸泡1h后，煎煮3次，每次0.5h，合并煎液，滤过，滤液中依次加入甜蜜素2g、薄荷香精1mL及苯甲酸钠0.5g，搅拌使溶解，加水调整至1000mL，分装，即得。

2.1.3 改进的处方 没食子15g，加0.15%的碳酸氢钠溶液200mL，甜蜜素2g，薄荷香精1mL，苯甲酸钠0.5g。

2.1.4 改进的制备方法 取没食子15g粉粹成粗粉 ，加0.15%的碳酸氢钠溶液200mL浸泡并超声处理20min后，煎煮3次,每次0.5h，合并煎液，滤过，滤液中依次加入甜蜜素2g、薄荷香精1mL及苯甲酸钠0.5g，搅拌使溶解，加水调整至1000mL。

2.2 没食子酸含量的比较

2.2.1 色谱条件[5-6]色谱柱： Waters Sunfire C18(250mm×4.6mm, 5μm)；流动相：甲醇-0.025%磷酸溶液(4∶96)；流速：1mL/min；检测波长：270 nm；柱温：25℃；进样量：10μL；分析方法：外标法[4]。

2.2.2 对照品溶液的配制 精密称取没食子酸对照品，加流动相溶解制成0.1060mg/mL的溶液，作为对照品溶液储备液。精密量取对照品溶液储备液5mL置50mL量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的配制 精密吸取样品1、样品2及样品3(各两份)1mL置100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度摇匀即得。微孔滤膜滤过，备用。

2.2.4 系统适应性试验 分别按照2.2.2、2.2.3项下方法制备对照品溶液及供试品溶液，按2.2.1项下色谱条件，各进样10μL，同时采集270nm光谱数据，结果显示，供试品溶液相应色谱峰的光谱与对照品没食子酸一致。没食子酸对照品保留时间为16.2min，理论塔板数大于5000。

2.2.5 线性关系考察 精密量取对照品溶液(0.1060mg/mL)1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别取10μL，按“2.2.1”色谱条件下操作，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得线性方程为：A=2.3×104C+2.3×103，r=0.9996，表明没食子酸10.6～106.0μg. mL-1范围内线性关系良好。

2.2.6 精密度实验 精密量取对照品溶液(0.1060mg/mL)5mL置50mL量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀，取10μL，重复进样5次，以峰面积计算RSD(n=5) 为0.42%，表明本法有较高的精密度。

2.2.7 稳定性实验 取样品2，按“2.2.3”方法配制溶液，分别于0、1、2、4、6h进样，进样量为10μL，测定没食子酸的峰面积为331287， 336952，339956,333458,341125；RSD为1.24%，表明供试品溶液稳定性良好。

2.2.8 重复性实验 取样品2，平行制备5份供试品溶液，按样品测定法测定，并对所得数据进行处理，结果测得没食子酸含量为0.04467 mg/mL，0.04546 mg/mL，0.04498 mg/mL，0.04443 mg/mL，0.04465 mg/mL，RSD为0.89%，表明重复性良好。

2.2.9 加样回收率实验 精密量取已知含量的样品3(批号为161012，含量34.94μg/mL)6份各1mL，分别置100mL量瓶中，再精密加入没食子酸对照品溶液2.0、5.0 、10.0 mL加流动相稀释至刻度，进样测定，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收率实验结果 (n=6)

2.2.10 样品含量的测定 取3种样品(样品1，样品2，样品3)按“2.2.3”方法制备供试品溶液，按“2.2.1”色谱条件下测定，按外标法计算没食子酸含量。结果见表2。

表2 3种样品含量测定结果 (n=3，mg/mL)

3 讨论

根据实验结果，可见不同方法制备的样品中没食子酸的提取率有明显的差别；即样品1和样品3采用同样的方法的制备溶液，其含量无明显差别，样品2为通过改进后的方法来制备的，其中没食子酸的含量明显高于样品1和样品3。说明改进的制备方法对该制剂制备过程中有效成分的提取率有明显的改善。

根据市售西帕依固龈液中测得的没食子酸含量均值与改进的方法制备的试样中的没食子酸含量比值可以看出，改进的制备方法中，通过使用碳酸氢钠溶液及提取工程中的超声处理方法，提取过程中起到膨松作用可提高没食子中没食子酸的有效提取率，导致没食子酸及没食子酸甲酯含量显著增高， 从而节省原料药的投料，在制剂中还起到维持酸碱平衡。节省药液制备时间，缩短制备周期，提高时间的有效利用。

[1]闫亮，吴佩玲.西帕依固龈液用于治疗口腔疾病中的研究现状[J].牙体牙髓牙周病学杂志，2009,19(8)：489-491.

[2]斯拉甫，努尔买买提·艾买提，阿布都热依木·玉苏甫，等.维药西帕依固龈液的药理作用研究[J].中国民族医药杂志, 1999(3):35-36.

[3]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(维吾尔药分册)[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1998:123.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(四部)[M].北京：中国医药科技出版社,2015.

[5]司马义江·阿布都热西提，阿依努尔·阿木提. 高效液相色谱法测定维吾尔药制剂西帕依固龈液中没食子酸含量[J].中国药业，2012,21(21):27-28.

[6]欧亮苗，李柯翱，季志红，等. 西帕依固龈液质量标准研究[J].世界中医药，2015(4):586-589.

DeterminationoftheContentofXipayiMouthRinseDifferentPreparationMethodofGallicAcidinHPLC

Ayinuer Amuti Simayijiang Abudourexiti

Kashi Region for Food and Drug Control，Kashi 844000,China

ObjectiveStudy on the effects of different preparation methods on the xipayi liquid content of gallic acid in the preparation process,to provide theoretical support.MethodsThe two methods was evaluated by high performance liquid chromatography (HPLC) method of the preparation of the content of gallic acid in xipayi mouth rinse.ResultsMethods of the preparation of the xipayi mouth rinse in accordance with the prescribed standards of gallic acid liquid solid gum is the content of 0.03183 mg/mL.The improved method of the preparation of the xipayi mouth rinse in accordance with the solid gum liquid of gallic acid content is 0.04505 mg/mL.Conclusionthe new preparation method is superior to the original preparation methods.

Xipayi Mouth Rinse; Preparation Method; Gallic Acid

R29

A

1007-8517(2017)19-0012-03

2017-08-20 编辑：邓佳丽)

阿依努尔·阿木提 (1974-)，女，维吾尔族 ，大专，主管药师，研究方向为中药及民族药检验。E-mail：simayi1102@126.com