微生物分析仪法与常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的调查分析

刘雪梅

[摘要] 目的 探究细菌耐药表型检测中通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测所存在的应用价值。方法 选取学院教学医院细菌室金黄色葡萄球菌80例，均在2014年1月—2016年6月分离保存。为检测细菌耐药表型，对细菌分别运用微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测，并对检测结果进行分析研究。结果 在细菌耐药表型方面，微生物分析仪法与常规纸片扩散法的检测结果相比，差异无统计学意义（P>0.05）。但在临界范围阳性菌株的检测中，微生物分析仪法检测结果更准确。结论 细菌耐药表型检测中通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测所存在的应用价值均较显著，但在临界范围阳性菌株的检测中，微生物分析仪法对其检测更加灵敏，同时具有较高的准确性和特异性，能够为临床诊疗过程提供更加准确的药敏结果，存在一定推广价值。

[关键词] 微生物分析仪法；常规纸片扩散法；细菌耐药表型；临床价值

[中图分类号] R7 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2017）06（b）-0051-02

近年来，由于各种不良因素影响，导致大气中的细菌总量明显增多，严重威胁人类身体健康，患者得到有效治疗的前提在于加强对各类型细菌的有效研究，从而更好地治疗疾病[1-2]。微生物分析仪通过尖端的数据分析软件和独创的检测原理共同作用，从而对细菌进行鉴定，并进行药敏检测。微生物分析仪的主要功能在于自动的菌落计数和对抑菌区的有效测量。微生物分析仪在单位、医院及工业领域进行微生物菌落计数和含量分析、抗生素的抗菌性及細菌的抗生素敏感性分析等工作中较为适用。该文为探究细菌耐药表型检测中通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测所存在的应用价值，选取在2014年1月—2016年6月该院分离保存的金黄色葡萄球菌80例，具体内容如下文所示。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将在2014年1月—2016年6月教学医院微生物实验室分离保存的金黄色葡萄球菌80例确定为该次研究对象。对细菌进行微生物分析仪法与常规纸片扩散法检测，其中常规纸片扩散法检测中的药敏纸片、M-H培养基、麦康凯培养基、血培养基及微生物分析仪检测中的配套检测板均出自正规厂家。

1.2 方法

1.2.1常规纸片扩散法检测细菌药敏 ①检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。在培养基上复种金黄色葡萄球菌，将克隆好的金黄色葡萄球菌制成金黄色葡萄球菌悬浊液，浓度为0.5麦氏单位，在M-H平板上进行均匀涂布，并在M-H平板上将30 ug头孢西丁和1 ug苯唑西林两种药敏纸片固定妥当，将其置于35℃的环境中进行孵育，孵育时间一般为24 h，孵育完成后对抑菌环直径进行有效量取，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阳性标准为：苯唑西林抑菌环直径低于11 mm或头孢西丁抑菌环直径低于19 mm[3-4]。②红霉素耐药克林霉素诱导实验。在培养基上复种金黄色葡萄球菌，将克隆好的金黄色葡萄球菌制成金黄色葡萄球菌悬浊液，浓度为0.5麦氏单位，在M-H平板上进行均匀涂布，并在M-H平板上将15 ug红霉素纸片和2 ug克林霉素纸片两种药敏纸片固定妥当，15 mm为两者中心点相距距离，将其置于35℃的环境中进行孵育，孵育时间一般为24 h，对靠近红霉素纸片一侧的克林霉素抑菌环进行观察，观察其有无截平现象发生，也就是D型环形成。若为阳性，则存在D型环，表明克林霉素诱导的实验为阳性结果。若为阴性，则不存在D型环，表明克林霉素诱导的实验为阴性结果[5]。

1.2.2微生物分析仪检测细菌药敏 金黄色葡萄球菌悬浊液的配制浓度为0.5麦氏单位，检测时，使用梅里埃AST-GP67检测板进行操作。

1.3 观察项目

观察金黄色葡萄球菌通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法两种方法进行检测的结果情况。

1.4 统计方法

选择SPSS 16.0统计学软件分析資料；计数资料以[n（%）]表示，用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测结果情况

检测80株金黄色葡萄球菌，对抑菌环直径进行测量，仅对苯唑西林呈阳性、仅对头孢西丁呈阳性及对苯唑西林和头孢西丁均呈阳性的菌株数分别为3株、2株及48株。总阳性率为66.3%。则对苯唑西林和头孢西丁均呈阴性的菌株数27株，具体情况如表1所示。

2.2 霉素耐药克林霉素诱导实验结果情况

检测80株金黄色葡萄球菌，其中出现D型环的有45株，且对克林霉素诱导为阳性结果。对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测发现，结合表1结果，53株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中，对克林霉素诱导为阳性菌株数为32例，所占比率为60.4%

2.3 微生物分析仪检测细菌结果情况

检测80株金黄色葡萄球菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测结果呈阳性的菌株数为54株，在克林霉素诱导实验中呈阳性的菌株数为48株，结果情况如表2所示。

2.4 微生物分析仪法与常规纸片扩散法两种检测方法分析

在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和红霉素耐药克林霉素诱导实验中，常规纸片扩散法阳性检出率分别为66.3%、60.4%，微生物分析仪法阳性检出率分别为67.5%、60.0%，两种检测方法在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和红霉素耐药克林霉素诱导实验中阳性检测率差异无统计学意义（χ2=0.267，P>0.05）。但在常规纸片扩散法的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测中，阴性例数为27例，但通过微生物分析仪检测发现，其中有1例为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阳性。

3 讨论

在各种致病菌的影响下，使得各类型疾病的发生率呈现逐年增长的趋势，降低人类生存质量，给社会和整个家庭带来沉重负担，对患者进行有效治疗尤为重要。因此必须加强对各类致病菌的有效研究[6-7]。

微生物分析仪法与常规纸片扩散法是检测细菌的常用方法，能够评估和推断常用细菌的耐药表型，两种检测方法各有其利弊，在监测细菌方面均具有一定临床价值[8]。

该文通过探究细菌耐药表型检测中通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测所存在的应用价值，临床数据结果显示，在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和红霉素耐药克林霉素誘导实验中，常规纸片扩散法阳性检出率分别为66.3%、60.4%，微生物分析仪法阳性检出率分别为67.5%、60.0%，两种检测方法在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和红霉素耐药克林霉素诱导实验中阳性检测率差异无统计学意义（P>0.05）。但通过微生物分析仪检测发现，在常规纸片扩散法的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测的27例阴性例数中有1例为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌阳性。综上所述，细菌耐药表型检测中通过微生物分析仪法与常规纸片扩散法进行检测均存在的显著应用价值，微生物分析仪法与常规纸片扩散法相比，在临界范围阳性菌株的检测中，其准确性和特异性较高，存在显著推广价值。

[参考文献]

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（收稿日期：2017-03-15）