3 463例O型血孕妇产前IgG抗A(B)抗体效价分析*

屈琳，刘凤霞

(中南大学湘雅三医院a.检验科，b.输血科，长沙 410013)

·临床实验研究·

3 463例O型血孕妇产前IgG抗A(B)抗体效价分析*

屈琳a，刘凤霞b

(中南大学湘雅三医院a.检验科，b.输血科，长沙 410013)

目的探讨微柱凝胶法检测IgG抗A(B)抗体效价的临界值，分析抗体效价水平变化和孕妇年龄与新生儿溶血病发生率的关系。方法根据围产期3 463例孕妇及其丈夫血型，分别用微柱凝胶法和试管法检测IgG抗A、抗B抗体效价。根据不同妊娠次数(1次、2次、≥3次)，将1 620例O型孕妇分3组，从22周开始每隔 4 周检测血清中IgG抗 A(B)的效价，分别用微柱凝胶法检测IgG抗A、抗B抗体效价，检测新生儿溶血病相关指标。结果微柱凝胶法抗体效价256作为参考值；3 463例围产期孕妇检测IgG抗A(B)，IgG抗A检测共2 257人次，其几何平均效价为169，IgG抗B检测共1 711人次，其几何平均效价为143。连续监测1 620例不同孕次数O型血孕妇，首次妊娠896例中IgG抗A(B)抗体效价≥256的共260例(29.02%)，2次妊娠248例IgG抗A(B)抗体效价≥256的共107例(43.15%)，≥3次妊娠共476例IgG抗A(B)抗体效价≥256的共220例(46.70%)；抗体效价滴度分别升高1、2、3个及以上孕妇的平均年龄分别为26.4、27.8、29.9岁，新生儿溶血病的发生率分别为21.66%、40.94%、84.90%。结论检测O型孕妇产前血清中IgG抗体时，微柱凝胶法的敏感性高于传统试管法，微柱凝胶法检测抗体效价的参考值高于试管法；多次妊娠者IgG抗A(B)抗体效价阳性率高于首次妊娠者；且当抗体效价升高2个及以上滴度时，年龄越高，HDN发病率越高。

IgG抗A(B)抗体；抗体效价；连续监测；新生儿溶血病

Abstract:ObjectiveTo investigate the threshold of IgG anti-A (B)antibody with microcolumn gel method and analyze the correlations between the incidence of neonatal hemolytic disease and IgG antibody titer in pregnant women as well as their age for the guidance of prenatal early prevention.MethodsBased on blood type of 3 463 perinatal pregnant women and their husbands, the titers of prenatal antibody IgG against A and B were determined by both microcolumn gel and test tube method. The 1 620 pregnant women with blood type O were divided into three groups according to different pregnancy times (1, 2, 3 or more than 3 times). The titers of serum IgG anti A and B were determined every 4 weeks from the 22th week using micro column gel method. The newborn hemolytic disease-related indicators were detected simultaneously.ResultsIn this laboratory, 256 of the antibody titer by microcolumn gel method was used as the indoor reference value. The geometric average titer of IgG anti-A was 169 in 2 257 person-times of perinatal women, and the titer of IgG anti-B was 143 in 1 711 person-times of perinatal women. The 1 620 women with blood type O were continuous monitored at different pregnant times. In 896 women with first pregnancy, 260 cases (29.02%)showed 256 or more than 256 of IgG anti A (B)antibody titer, 107 cases (43.15%)in 248 women with the second pregnancy showed 256 or more of IgG anti A (B)antibody titer, and 220 cases (46.70%)in 476 women with the third pregnancy or more showed 256 or more of IgG anti A (B)antibody titer. The average ages of the pregnant women with increased 1, 2 and 3 antibody titers were 26.4, 27.8 and 29.9 respectively, and the incidences of hemolytic disease of newborn (HDN)were 21.66%, 40.94% and 84.90% respectively.ConclusionIn detecting IgG antibody in prenatal serum of pregnant women with O type, the sensitivity of microcolumn gel method for IgG antibody should be obviously higher than that of the traditional test tube method. The reference value of microcolumn gel method or IgG antibody titer was obviously higher than that of test tube method. The positive rate of IgG anti-A antibody in multiple pregnancies was significantly higher than that in the first pregnancy. The incidence of HDN may increase with the age of pregnant women when the titer of IgG antibody increased by 2 or more titers.

Keywords: IgG-A (B)antibody; antibody titer; dynamic monitoring；hemolytic disease of newborn

新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn，HDN)是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。我国以ABO血型不合者占多数[1]。鉴于微柱凝胶法的普及，传统采用IgG 抗 A(B)效价>64 作为临界值的标准是否适用于微柱凝胶法值得商榷。本研究通过用微柱凝胶法连续检测我院门诊和住院孕妇及其出生48 h内新生儿血液中的IgG抗A(B)抗体，分析孕妇血清IgG血型抗体与HDN的关系。

1 对象与方法

1.1研究对象 纳入标准：孕周为38至40周的血型为O型的孕妇，其丈夫血型为A、B或AB型。排除标准：排除患肝病、肾病、肿瘤、自身免疫病、血液系统疾病及有输血史者，排除不规则抗体检测阳性者。选择2010年5月至2013年5月中南大学湘雅三医院符合纳入、排除标准的门诊及住院孕妇及其新生儿各3 463例，孕妇年龄22～38岁，中位年龄32岁，其丈夫血型为A型1 752例，B型1 206例，AB型505例，其中1 620例孕妇自22周始每隔4周检测1次血清中 IgG抗A(B)效价。

1.2标本采集 采集孕妇血液2 mL(EDTA-K2抗凝)、4 mL(分离血清)，采集婴儿血液1 mL(EDTA-K2抗凝)、3 mL(分离血清)(如新生儿抽血困难，应尽量保证抗凝血标本的量)。

1.3试剂 0.2 mol/L巯基乙醇(2-Me)应用液、抗人球蛋白微柱卡均购自长春博迅公司。

1.4方法 孕妇血清标本0.4 mL加入0.4 mL 2-Me应用液并混合，37 ℃温育1 h[2]，处理后的血清用生理盐水倍比稀释，试管法以凝集1+为终点，微柱凝胶法以红细胞完全或大部分停留在凝胶柱的上部或上半部判读为阳性。阳性者以最高稀释度作为效价。每份标本均同时用试管法和微柱凝胶法检测。对出生48 h内新生儿血液标本进行3项HDN试验，即直抗试验(抗凝血)、游离试验(血清)和释放试验(抗凝血)，同时检测新生儿胆红素、血红蛋白。诊断HDN参照文献[3]。

1.5统计学分析 用 SPSS 19.0 统计软件进行。平均效价以加权法计算，等级资料的比较用秩和检验，计数资料的比较用卡方检验；P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1微柱凝胶法抗体效价的临界值 微柱凝胶法与试管法检测3 463例孕妇IgG抗A(B)抗体效价结果见表1。

微柱凝胶法IgG抗A效价为64、128、512、1 024和2 048时，与试管法效价临界值64比较，两法IgG抗A阳性检出率差异均有统计学意义(χ2分别为682.47、173.641、429.494、699.84、825.037，P均<0.01)；微柱凝胶法IgG抗A效价为256时，两法抗A阳性检出率差异无统计学意义(χ2=2.294，P=0.138)。

微柱凝胶法IgG抗B效价为64、128、512、1 024和2 048时，与试管法效价临界值 64 比较，两法IgG抗B阳性检出率差异均有统计学意义(χ2分别为282.742、26.077、343.450、526.149、610.738，P均<0.01)；IgG抗B效价微柱凝胶法为256时，两法IgG抗B阳性检出率差异无统计学意义(χ2=2.447，P=0.127)。

综合对比结果，微柱凝胶法血清抗体效价≥256判为阳性。

表1 试管法与微柱凝胶法检测IgG抗A(B)抗体效价结果

注：-，无数据。

2.2孕妇血清IgG抗A(B)效价分布 IgG抗A检测共2 257人次，其几何平均效价为169；IgG抗B检测共1 711人次，其几何平均效价为143；IgG抗A效价水平明显高于IgG抗B效价水平。

2.3不同孕次孕妇IgG抗A(B)效价 连续监测1 620例不同孕次O血型孕妇，896例首次妊娠者中IgG抗A(B)抗体效价≥256者260例(29.02%)，248例2次妊娠者中IgG抗A(B)抗体效价≥256者107例(43.15%)，476例≥3次妊娠者中IgG抗A(B)抗体效价≥256者220例(46.70%)，多次妊娠者IgG抗A(B)抗体效价阳性率高于首次妊娠者(P<0.05)。孕22、26、30、34、38周IgG抗A(B)效价变化见图1。

图1 不同孕次O血型孕妇IgG抗A(B)抗体效价与孕周的关系

2.4孕妇抗体效价变化与HDN的关系 1 620例孕妇，抗体效价升高2个及以上滴度，年龄越高，HDN发病率越高，见表2。

表2 抗体效价变化与HDN发病率的关系

3 讨论

微柱凝胶技术具有高敏感性、高特异性、操作简单及重复性良好等优点[4]。目前很多医院用微柱凝胶检测卡法取代传统的试管法测定抗体效价。若以效价 64作为阳性临界值，微柱凝胶检测卡法阳性率远远高于试管抗球蛋白法[5]。周金安等[6]研究也证实，微柱凝胶卡检测IgG 抗 A(B)效价比试管抗球蛋白法高。DiaMed微柱凝胶法检测IgG抗A(B)的决定值为≥216[7]，与本文的≥256接近。

孕妇血清抗A 效价异常率高于抗B效价异常率，除与本地区人口血型所占比例有关外，还可能与红细胞上 A 抗原性较强相关[8]。连续监测1 620例不同孕次O血型孕妇，多次妊娠者抗A(B)抗体阳性率高于首次妊娠者，与王林奎[9]、李东晖等[10]报道一致。首次怀孕孕妇IgG抗体效价阳性的原因可能是在怀孕前就已从其他途径接触过A、B血型物质，如花粉、植物或注射某些免疫疫苗等，因此首次怀孕仍然有可能娩出 HDN 婴儿[11]。由于每一次妊

娠结束，胎盘绒毛膜受损，胎儿红细胞进入母体，刺激母体产生抗体，妊娠次数越多，抗体的堆积也越多，从而产生高价的抗体。随妊娠次数的增加，发病率会相应增高[12]。随着年龄的增加，日常生活中母体接触血型物质的几率也增加，机体处于一个低免疫应答状态，当妊娠过程中接触到血型抗原时，产生的IgG抗体效价就呈上升状态。

我们观察发现复检效价持续增高者较效价水平维持不变或降低者HDN发生率高，1 620例产妇中，孕期IgG抗体效价与 ABO-HDN 发病率成正相关。这是因为IgG抗体效价过高，通过胎盘的几率增加所致。连续监测，及早发现，及时干预治疗，可减少由于母婴血型不合引起的溶血病。

[1]胡丽华.临床输血学检验[M].北京：人民卫生出版社，2012:255-261.

[2]叶应妩，王毓三，申子瑜. 全国临床检验操作规程[M].南京：东南大学出版社，2006：257.

[3]中国医师协会输血科医师分会．新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验推荐方案[J]．中国输血杂志，2012，25(2): 95-96．

[4]Dittmar K，Procter JL，Cipolone K，etal． Comparison of DATs using traditional tube agglutination to gel column and affinity column pro- cedures[J]． Transfusion，2001，41(10): 1258-1262．

[5]张军，管政，周浩，等. 微柱凝胶技术与传统试管法检测孕妇IgG抗-A(B)效价[J].中国输血杂志，2008，21(12):948-949.

[6]周金安，魏晴，涂同涛，等. 微柱凝胶卡及试管法对抗-D效价检测的比较[J]. 中国输血杂志，2008，3(21): 197-198.

[7]李建新，吴夏枫，陈梅莲，等.抗人球蛋白微柱凝胶法和试管法检测孕妇IgG抗-A(B)的比较[J].临床检验杂志，2006,24(3):214.

[8]袁咏梅,刘和录,何亚,等.孕期效价变化的连续监测及ABO新生儿溶血病发病各因素的相关性研究[J].中国输血杂志,2014,27(3):291-293.

[9]王林奎． 新生儿 ABO 溶血病与孕妇IgG抗体效价的相关性分析[J]． 青海医药杂志，2014,44(10): 61-62．

[10]李东晖，黄捷丽，高玉洁，等． 母婴 ABO 血型不合孕妇Ig G 抗体效价与新生儿溶血病之间的关系探讨[J]．华南国防医学杂志，2014,28(6): 549-551．

[11]Komaru Y，Higuchi T，Koyamada R，etal． Primary sjogren syndrome presenting with hemolytic anemia and pure red cell aplasia following delivery due to coombs-negative autoimmune hemolytic anemia and hemophagocytosis[J]．Intern Med，2012,52(20): 2343-2346．

[12]柳爱华，储穆庭. 2537 例孕妇 ABO 血型抗体效价检测结果及分析[J]. 现代预防医学，2011, 38(1)：49-51.

Analysisofanti-A(B)IgGantibodytiterin3463pregnantwomenwithbloodtypeO

QULina,LIUFeng-xiab

(a.DepartmentofLaboratoryMedicine,b.DepartmentofBloodTransfusion,TheThirdXiangyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha410013,Hunan,China)

R446

A

2017-02-11)

(本文编辑王海燕)

湖南省自然科学基金(14JJ7015)。

屈琳，1979年生，男，主管技师，硕士，主要从事医学检验工作。

刘凤霞， E-mail:632089417@qq.com。

10.13602/j.cnki.jcls.2017.09.08