国产化学发光免疫分析系统检测AFP的性能评价

郭绘芳

（太原市太航医院，山西太原030006）

国产化学发光免疫分析系统检测AFP的性能评价

Performance evaluation of domestic chemiluminescence immunoassay system for AFP

郭绘芳

（太原市太航医院，山西太原030006）

目的：探讨不同化学发光检测系统测定甲胎蛋白（AFP）结果的可比性，探讨不同检测系统的临床适用性。方法：依据美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的规定，以罗氏cobas-e601电化学发光免疫分析仪检测结果为参比系统（X），以迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪测试结果为待对比系统（Y），通过检测AFP指标，对两套系统结果进行对比分析和偏倚评估。结果：两检测系统对AFP的检测结果具有良好的相关性，相关系数大于0.95；预期偏差均在可接受范围内，具有良好的一致性。结论：国产迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪检测AFP能够满足临床需要，可以推广应用。

甲胎蛋白；化学发光免疫分析系统；性能评价

甲胎蛋白（AFP）是一种糖蛋白，正常情况下低浓度AFP存在于成人体内，是一种常见的肿瘤标志物［1］。对于原发性肝癌来说，70%～95%患者的AFP升高，所以AFP是早期诊断最敏感、最特异的指标，其需要较高特异性的确定试验来完成相对低特异性的AFP检测［2］。目前临床试验越来越重视AFP项目结果的准确性，实验室大多采用国外的检测系统，但其检测成本高昂，如何利用高性价比的检测系统更好地服务于临床工作还需要不断探讨。

本次研究参照美国临床实验室标准化协会（NCCLS）指南中EP9-A2文件要求分析评价，检测指标AFP并对检测结果进行验证分析和偏倚评估，比较国产迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪与进口罗氏cobas-e601电化学发光免疫分析仪两种检测系统的优良，探讨不同检测系统的临床适用性。

1 材料与方法

1.1 样本来源

样本来源于本院健康体检及肿瘤病患。采集样本为受检者当天新鲜血液，采集待凝集后完全分离血清，无溶血、脂血，分装2份，在2 h内完成操作。按照EP9－A2文件中方法对比实验数据分布建议，其浓度选择需涵盖正常参考区间和异常高值，浓度控制在分析方法线性范围内。

1.2 分析系统

参比检测系统（X）：罗氏cobas-e601电化学发光免疫分析仪，配套各项目检测试剂、校准品和质控品。对比检测系统（Y）：迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪，配套各项目检测试剂、校准品和质控品。

1.3 检测方法

1.3.1 精密度检测 参考CLSI EP9－A2文件［6］检测总精密度：取出质控品（低值和高值）同时段内在两种分析系统进行指标检测，连续检测20 d。检测其批内精密度：取出质控品（低值和高值）同时段内在两种分析系统进行指标检测，每天测定2批，2批间隔时长超过2 h，每个检测对象需重复检测20次，测试结果满足质控靶值范围需求。记录总精密度和批内精密度的均值、标准差和CV等统计指标。

1.3.2 比对试验和线性回归 收集新鲜病人血清，选择均匀分布在测量范围内的样本浓度，在2 h内完成迈瑞系统和罗氏系统的检测，受试样本重复2次操作取均值。严格按照厂商说明书，在试验前对各仪器进行全面维护和校准；严格执行实验室内质控，在可控时进行标本检测。以罗氏cobas-e601电化学发光免疫分析仪检测结果为参比系统（X），以迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪测试结果为待对比系统（Y），进行统计分析得到线性回归方程以及相关系数。

1.3.3 离群值检测 方法内和方法间进行离群值的检查，按照EP9－A2文件要求操作。方法内离群值：根据每台系统上的样本双份测定结果，计算平均值和绝对差值，以平均绝对差值的4倍为界限，超出界值定义为离群值。方法间离群值：根据方法间成对测定结果，计算平均值和绝对差值，以平均绝对差值的4倍为界限，超出界值定义为离群值。允许从分析数据中删除2.5%的离群值，若离群值超过2.5%则需检查原因并重新采集数据。

1.3.4 X测定范围的检验 计算相关系数来粗略判断取值范围是否合适。当（或）认为取值范围适当，斜率和截距通过线性回归方程得出。如果相关系数不满足上述条件，则需要加大样本量来扩大数据浓度分布范围。

1.3.5 偏倚评估及可接受性能判断 偏倚评估中涉及与可接受性能判断之间相应的预期偏倚和相对偏倚，是由研究给定的医学决定水平浓度代入回归方程得出。鉴于不同检测系统间比对的有关临床可接受性能的统一判断标准在国际上还没有共识，我们按照澳大利亚室间质评标准的靶值± 20%的诊断标准［3］，判断不同检测系统的测定结果是否具有可比性，其偏倚是否可接受。

1.3.6 一致性评价 迈瑞系统和罗氏系统分别使用系统各自的参考范围来确定阴性和阳性，统计其对应的阳性和阴性一致率、总一致率等流行病学指标，假设检验使用McNemar配对卡方检验，对两种方法临床测定结果进行一致性评价。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 19.0，对试验数据进行回归与相关性分析，得出线性回归方程和相关系数，其一致性比较采用Kappa值进行描述。当R＞0.90，可认为两种检测系统间检测结果相关性良好。

2 结果

2.1 精密度评价

比对试验数据真实可靠，AFP在两种检测系统的总精密度和批内精密度测定结果均满足本实验室对精密度评价的要求。国产迈瑞CL-2000仪器性能表现良好，与罗氏水平相当。结果见表1。

表1 甲胎蛋白（AFP）在两种检测系统的精密度测定结果 （%）

2.2 离群值检验

在两台系统显示的甲胎蛋白（AFP）测值，方法内和方法间测定结果均无出现离群点，其绝对差值和相对差值均在平均绝对差值的4倍范围内。

2.3 回归分析与相关性分析

回归方程为：Y=1.138X+0.233 6，相关系数为0.993 2，大于0.975，取值范围合适。

2.4 偏倚评估

与之间对应的预期偏倚和相对偏倚均在允许偏倚之内，偏倚可被接受，试验方法正确度的性能得到验证。结果见表2。

表2 甲胎蛋白（AFP）在两种检测系统的偏倚评估

2.5 一致率比较

将罗氏和迈瑞系统同时测定270例样本，计算两个检测系统结果的一致率并对测定结果差异的显著性进行McNemar配对卡方检验；统计得出阴性一致率为99.17%、阳性一致率为98.67%以及总一致率为98.89%。McNemar配对卡方检验表明，按水平，差异无统计学意义，可认为两种方法临床测定结果差异无统计学意义。结果见表3。

表3 甲胎蛋白（AFP）在两种检测系统的一致率比较

3 讨论

甲胎蛋白在正常人体内剂量很低，一般小于20 ng/mL，当AFP一直超过400 ng/mL时，被作为判断肝癌的检测指标。目前实验室用放射免疫法、酶联免疫法和化学发光法等方法对AFP这类肿瘤标志物进行检测，而近些年化学发光免疫分析在其中逐渐得到更多重视［4］。目前在临床实验室内采用的检测系统中进口系统所占比重巨大，虽然其各项性能优异，但这些仪器与对应进口试剂配套，必须相互使用缺一不可，导致耗材成本高昂，不可避免产生了巨大的经济负担，并不利于在国内的普及和推广。所以值得我们关注的课题是同一份样本在进口和国产的不同发光免疫系统测定的结果是否存在差异，是否有可比性。

与进口罗氏分析系统比对结果显示，两套检测系统的比对试验数据真实可靠，数据分布均匀通过离群值检测。从精密度评价结果来看符合肿瘤标志物临床应用的指导原则中对精密度的基本要求，检测指标的总精密度和批内精密度的CV均不超过10%。在评价低、中、高浓度水平的AFP的预期偏差均在可接受范围内，偏倚是可接受的。我们的研究结果表明两检测系统对AFP的检测结果具有良好的相关性，相关系数大于0.95；测定甲胎蛋白阳性样品一致率98.67%，阴性样品符合率99.17%，总符合率达98.89%，罗氏和迈瑞系统检测结果的一致性强度结果满足条件。

研究显示对于AFP，国产电化学发光免疫分析系统已具备与进口产品竞争市场的水平，机器性能稳定精准表现良好，能够满足临床上对肿瘤标志物的监测需要。国产仪器经过自我的创新，在吸收国外先进仪器的精华同时，严格把控质量提高服务，在医疗检测仪器中逐渐拥有一席之地。此外与进口仪器和试剂相比，鉴于其成本低廉，对基层医院病人检测以及健康人群的体检普查等项目更适合推广使用［5］。因此，国产化学发光免疫分析系统的甲胎蛋白项目在临床实验室检测中前景光明。

［1］常彬霞，辛绍杰.甲胎蛋白及其临床应用研究进展［J］.世界华人消化杂志，2010（6）：576-580.

［2］戴志文，蔡祥霞，杨湘越，等.甲胎蛋白化学发光免疫定量检测试剂的研制与临床应用［J］.实验与检验医学，2014（2）：121-123.

［3］陈岩松，陈燕，胡敏华，等.罗氏Modular E170与Cobase e601电化学发光免疫分析系统检测血清甲胎蛋白的比对分析［J］.检验医学与临床，2012（16）：1 974-1 976.

［4］肖勤，林金明.化学发光免疫分析方法的应用研究进展［J］.分析化学，2015（6）：929-938.

［5］薛恒，饶冬东，陈登锴，等.国产洪诚免疫分析系统与雅培ARTITECT i2000SR分析系统对肿瘤标志物检测结果的比较分析［J］.中国当代医药，2012（31）：92-94.

（编辑：翟春涛）

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1671-0258（2017）04-0057-03

郭绘芳，副主任检验师，E-mail：13303518716@163.com