四格小孔径包埋盒在常规病理技术中的应用改进

李明显，赵杰，何青莲，郑广娟

(广东省中医院病理科，广州，510120)

四格小孔径包埋盒在常规病理技术中的应用改进

李明显，赵杰，何青莲*，郑广娟

(广东省中医院病理科，广州，510120)

目的探讨四格小孔径包埋盒应用于胃肠镜活检组织病理标本取材和石蜡包埋过程中的改进方法，以提高制片效率和质量。方法将胃肠镜活检组织随机放入四格小孔径包埋盒内作为对照组，包埋盒上不记录（对照组A）或记录（对照组B）每例活检组织的数量；改进组对四格小孔径包埋盒的四个分区重新定义为I-IV四个象限，取材时将1-4个活检组织分别对应放入I-IV四个象限的小格中。对照组和改进组标本均进行常规石蜡包埋、切片以及HE染色，比较3组间病理组织取下后放入包埋盒内的耗时、石蜡包埋过程中收集标本的耗时以及显微镜观察标本数与实际标本数的符合率。结果改进组平均每例标本取材后放置标本和包埋收集标本耗时均显著短于对照组B；与对照组A相比，改进组放置标本耗时无显著差异，而收集标本耗时显著缩短。改进组镜检标本数量符合率为100%，显著高于两个对照组。结论对四格小孔径包埋盒的四个小格重新定义并赋予特定的数量关系，将该规则应用于病理组织取材过程和常规石蜡包埋过程中可提高胃肠镜活检组织的制片效率和质量。

胃肠镜活检；四格小孔径包埋盒

胃肠镜活检组织是病理科日常工作中的重要标本来源，由于其体积小且标本间存在数量差异，在传统的石蜡包埋过程中给操作者带来一些不便。我们将胃肠镜活检组织应用四格小孔径包埋盒的特殊处理方式，经反复实践，证明了该方法不但保证了标本制片过程中的效率和质量，而且使取材过程和石蜡包埋过程变得更加简便。

材料与方法

1 材料

收集2017年2月本院胃肠镜室行消化道内窥镜检查术中钳取的活检标本90例，每例标本的组织数量1～4粒，每粒胃组织标本及肠组织标本直径0.1～0.5cm，标本均采用10%中性福尔马林固定。

2 实验设备

四格小孔径包埋盒（威格斯,广州），自动脱水机（Thermo，美国），石蜡包埋机（Thermo，美国），石蜡切片机（Leica,德国），自动染色机（Leica,德国）。

3 实验分组与方法

90例胃肠镜活检组织随机分成3组，即对照组A，对照组B和改进组，每组30例标本，依次编号为1～30。

传统方法：将胃肠镜活检组织随机放入四格小孔径包埋盒内，包埋盒上不记录每例活检组织的数量，该组作为对照组A（图1A）；在包埋盒上记录每例活检组织的数量，该组作为对照组B（图1B）。记录每例标本病理组织取材后从打开标本瓶至将该标本瓶内所有活检组织放入四格小孔径包埋盒内所消耗的时间（即放置标本耗时），取材后点染伊红并合上盖子，依次脱水、透明、浸蜡、包埋。包埋过程：按石蜡包埋原则[1-4]进行操作，并记录每例标本常规石蜡包埋过程中从打开包埋盒至将该包埋盒内所有活检组织收集完毕所消耗的时间（即收集标本耗时）。然后常规切片及HE染色，并于显微镜下计数每例标本的组织数量。

图1 对照组四格小孔径包埋盒标本放置示意图。A1～A4，分别显示对照组A中1～4个组织标本随机放置在不同的小格内； B1～B4，分别显示对照组B中1～4个组织标本随机放置在不同的小格内Fig. 1 Placement of samples in control groups. A1 – A4, in control group A, samples from one to four pieces were random ly placed into dif erent partitions; B1 – B4, in control group B, samples from one to four pieces were random ly placed into dif erent partitions

改进方法：将四格小孔径包埋盒的四个格子分别定义为相应的四个象限（图2A）。标本放置规则：①组织数量为1时，将活检组织放置在象限Ⅰ的小孔中；②组织数量为2时，将活检组织均放置在象限Ⅱ的小孔中；③组织数量为3时，将活检组织均放置在象限Ⅲ的小孔中；④组织数量为4时，将活检组织均放置在象限Ⅳ的小孔中，且每个包埋盒内最多放置4粒组织（图2B）。记录每例标本病理组织取材后放置标本耗时，取材后点染伊红并合上盖子，依次脱水、透明、浸蜡、包埋。包埋过程：按石蜡包埋原则[1-4]进行操作，并记录每例标本常规石蜡包埋过程中收集标本耗时。然后常规切片及HE染色，并于显微镜下计数每例标本的组织数量。

4 统计学分析

采用SPSS22.0统计软件，取材耗时、包埋耗时及每例标本取材时及制片后组织数量的差异在三组间的比较采用t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

为了明确在常规病理技术中改进四格小孔径包埋盒的使用规则后是否能快速、高效的处理病理标本，我们记录各组标本取材后从打开标本瓶至将该标本瓶内所有活检组织放入四格小孔径包埋盒内所消耗的时间（即放置标本耗时）和石蜡包埋过程中从打开包埋盒至将该包埋盒内所有活检组织收集完毕所消耗的时间（即收集标本耗时），以及染色后显微镜镜检每例标本的数量与实际数量的符合率。结果显示：与对照组B比较，改进组放置标本耗时和收集标本耗时均显著缩短；与对照组A比较，改进组放置标本耗时无明显变化，而收集标本耗时显著缩短。此外，改进组显微镜下观察到的每例标本数量与实际标本数量完全吻合，符合率为100%，而两组对照组标本数量符合率均显著低于改进组（表1）。这些结果提示改进后的四格小孔径包埋盒使用规则能显著提高病理标本检测的效率和质量，更好的服务于临床病理诊断。

图2 改进组四格小孔径包埋盒标本放置示意图。A，四格小孔径包埋盒I-IV四个象限的定义；B1～B4, 分别显示改进组中1～4个组织标本分别放置在定义为I-IV象限的不同小格内Fig. 2 Placement of samples in the improvement group. A, def nition of quadrants I to IV in the boxes; B1 – B4, in the improvement group, samples from one to four pieces were placed into quadrants I to IV, respectively

表1 对照组与改进组胃肠镜活检组织制片效率和质量比较Tab. 1 Com parison of the ef ciency and quality of gastrointestinal biopsy slice preparation between control groups and the im provement group

讨 论

胃肠镜活检组织是病理科日常工作中的重要标本来源，由于其体积小且标本间存在数量差异，在病理组织取材和常规石蜡包埋过程中给操作者带来一些不便。传统的取材方法是普通包埋盒与包埋纸相结合，而小孔径包埋盒的密集孔径设计可以省去包埋纸的相关操作，一定程度上简化了工作流程，但取材时仍需在包埋盒上记录组织的数量以保证制片质量。对照组A表明省去该操作，虽然可以节省制片时间，但带来更严重的问题是质量控制工作无法保证。常规石蜡包埋过程中，操作者需仔细检查包埋盒内及顶部盖子以防止组织丢失，但实际数量仍然不能明确。因为“多粒”组织可能是一个形状不规则的息肉，而“一粒”组织也可能是大小不同的几粒组织相互嵌合在一起，出现这种情况时若操作者仅凭经验来处理就会造成工作上的失误，进而影响质量控制工作及诊断结果的准确性。对照组B通过在包埋盒上记录每例组织数量在一定程度上降低了上述失误发生的可能性，而整个制片过程的工作效率也因该操作而降低，而且常规石蜡包埋的质量控制工作仍然有待提高。因为包埋盒上的记录数字大多是记录者用铅笔书写，字迹在多次摩擦碰撞过程中会变得模糊不清，尤其是数字“3”常被误认为“2”，从而造成对记录数字的辨认错误，进而引起后续操作失误。

四格分区的设计保证了小组织在脱水过程中限制在某个分区内而不发生多个分区间的相互迁移，改进方法利用这一特点对四格小孔径包埋盒的四个分区重新定义并赋予特定的数量关系，在常规石蜡包埋过程中操作者根据组织所在象限就能准确判断出组织的数量，从而正确反映取材时组织的数量，这不但解决了对照组B的工作效率问题，而且解决了对照组A的制片质量问题。应用该方法需要注意的是：①当组织数量超过4时，需增加包埋盒的数量并依次编号，同时参照规则进行取材。②当组织直径小于0.05cm时，需用包埋纸将组织包好后再进行脱水。该方法同样适用于宫腔镜、膀胱镜、纤支镜及鼻咽镜等钳取的小组织在常规标本制片过程中的应用。

应用改进方法不但保证了制片过程的工作效率，而且提高了石蜡包埋工作的质量控制，是一种值得推广的技术应用方法。

[1] 中华医学会.临床技术操作规范-病理学分册.北京：人民军医出版社，2004，31-32.

[2] 李敏，吴在增，曾玲，等. 多组织块集合包埋制片法在冷冻切片中的应用. 临床与实验病理学杂志，2011，27（2）：215.

[3] 马恒辉，周晓军. 组织固定处理及包埋常见问题与对策.临床与实验病理学杂志，2011，27（6）：638-641.

[4] 徐金永，赵夫娟，陈阳.胃肠黏膜琼脂竖式包埋与常规包埋对比分析. 临床与实验病理学杂志，2014，30（4）：461-462.

An improved method of app lying four-partition small-aperture embedding boxes in routine pathological practice

Li M ingxian, Zhao Jie, He Qinglian*, Zheng Guangjuan
(Department of Pathology, Guangdong Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, China)

ObjectiveTo explore an improved method of applying four-partition small-aperture embedding boxes (the boxes) in sampling and embedding the pathological specimens of gastrointestinal biopsies for an improvement of the ef ciency and quality of slice preparation.MethodsIn control groups, pieces of gastrointestinal biopsy tissue were random ly placed in the boxes w ithout (control A) or w ith (control B) record of the number. In the improvement group, the four partitions of the boxes were defned as four quadrants from I to IV respectively, and samples from one to four pieces were placed into corresponding quadrants. All samples were embedded in paraf n, sectioned and stained by HE. The time spent to place the samples into the boxes after sampling (placement time), time spent to collect the specimens during embedding (collection time), and the rate that the sample number observed under the microscope was in accordance w ith the actual number (accordance rate) were compared among the three groups.ResultsBoth the placement time and collection time of the improvement group were obviously shorter than those of control B. There was no signif cant dif erence in the placement time between the improvement group and control A, but the collection time of the former was obviously shorter. The accordance rate of the improvement group was 100%, signif cantly higher than those of the control groups.ConclusionBy redefning the four partitions of four-partition small-aperture embedding boxes and taking advantage of the quantitative relationship between partitions and sample numbers during pathological sampling and regular paraf n embedding processes, the ef ciency and quality of gastrointestinal biopsy slice preparation can be improved.

Gastrointestinal biopsy; four-partition small-aperture embedding box

R-331

A

10.16705/ j. cnki. 1004-1850.2017.03.014

2017-03-19

2017-06-10

李明显，男(1980年)，汉族，硕士研究生

*通讯作者(To whom correspondence should be addressed)：2312836233@qq.com