高效液相色谱法测定益康胶囊中23－乙酰泽泻醇B含量

杨立志，姜雪敏

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西158100）

·检验检测·

高效液相色谱法测定益康胶囊中23－乙酰泽泻醇B含量

杨立志，姜雪敏

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江鸡西158100）

目的建立测定益康胶囊中23－乙酰泽泻醇B含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为Agilent Extend－C18柱(250 mm× 4.6 mm，5 m)，流动相为乙腈－水（72∶28），检测波长为208 nm，流速为1.0 m L/min。结果23－乙酰泽泻醇B进样量在0.022 1～0.552 6 g内与峰面积线性关系良好，r＝0.999 9；23－乙酰泽泻醇B平均回收率为98.26%，RSD为0.30%(n＝6)。结论该法操作简便、重复性好、结果准确，可作为益康胶囊的质量控制方法。

23－乙酰泽泻醇B；益康胶囊；高效液相色谱法；含量测定

益康胶囊是由人参、三七、黄芪、黄精、天花粉、何首乌、灵芝、丹参、泽泻、珍珠粉层、维生素E、维生素A、甲基橙皮苷制成的中成药，具有调节全身代谢、恢复细胞活力、改善心血管功能、健脑强身、延缓衰老、扶正固本的功效，用于冠心病、高血脂症、脑动脉硬化、老年性视力减弱。其质量标准收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂(第十三册)》[1]，标准中无泽泻的含量测定项。为完善质量控制标准，参考文献[2－12]，建立了测定益康胶囊中23－乙酰泽泻醇B含量的高效液相色谱（HPLC）法，其重复性好，准确度高，可控制益康胶囊的质量。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

岛津2010A型高效液相色谱仪（岛津紫外检测器，LC solution色谱工作站）；XSE205DU型电子分析天平(瑞士梅特勒·托利多公司)；KQ－400KDE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试药

23－乙酰泽泻醇B对照品（中国食品药品检定研究院，批号为111846－201102）；益康胶囊（吉林吉春制药股份有限公司，批号为131002；长春普华制药股份有限公司，批号为130902；通化吉通药业有限公司，批号为140802）；试验用水为哇哈哈纯净水；乙腈(Merck公司）为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent Extend－C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)；流动相：乙腈－水（72∶28）；流速：1.0mL/min；检测波长：208 nm；柱温：25℃；进样量：10μL。理论板数按23－乙酰泽泻醇B峰计不低于3 000，分离度大于1.5。

2.2 溶液制备

对照品溶液：称取23－乙酰泽泻醇B对照品（含量98.5%）11.22 mg，精密称定，加乙腈制成质量浓度为22.10μg/mL的溶液，即得。

供试品溶液：称取本品粉末2.007 7 g（每粒含量为0.414 7 g），精密称定，置锥形瓶中，加入乙腈25m L，称定质量，超声处理30min，放冷，再称定质量，用乙腈补足减失的质量，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

阴性对照品溶液：按处方比例以相同工艺制成不含泽泻的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验：精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液，按拟订方法测定，其色谱图见图1。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液相应位置有一相同保留时间的色谱峰，阴性对照无干扰。

1.23－乙酰泽泻醇BA.供试品溶液B.对照品溶液C.阴性对照品溶液图1高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密吸取23－乙酰泽泻醇B对照品溶液1，2，5，10，15，20，25μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以对照品进样量为横坐标（X，μg）、峰面积积分值为纵坐标（Y）进行回归分析，得回归方程Y＝9.483 6×105X－1.479 6×103，r＝0.999 9(n＝7)。结果表明，23－乙酰泽泻醇B进样量在0.022 1～0.552 6μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取对照品溶液10μL，连续进样6次，测定峰面积。结果23－乙酰泽泻醇B的平均峰面积值为208 504，RSD为0.86%（n＝6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液（批号为131002），于0，2，4，8，12，24 h时分别进样10μL，记录峰面积。结果23－乙酰泽泻醇B峰面积的平均值为240 477，RSD为0.92%（n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

重复性试验：取同一批（批号为131002）样品6份，精密称定，依法制备供试品溶液，进样测定。结果23－乙酰泽泻醇B平均含量为每粒0.132mg，RSD为0.93%，表明方法重复性良好。

加样回收试验：称取已知含量的同一批（批号为131002，含量为每粒0.132mg）样品6份，每份约1.0 g，精密称定，分成3组，每组分别加入0.302 g/L的23－乙酰泽泻醇B对照品溶液0.8，1.0，1.2 m L，依法制备供试品溶液，按拟订色谱条件进样测定，并计算回收率。结果见表1。

2.4 样品含量测定

取益康胶囊3批，依法制备方供试品溶液，按拟订色谱条件测定含量。结果批号为131002，130902，140802的样品中23－乙酰泽泻醇B含量分别为每粒0.132，0.120，0.146mg（n＝6）。

3 讨论

3.1 流动相选择

曾考察了以乙腈－水、甲醇－0.2%甲酸溶液、甲醇－0.1%磷酸溶液为流动相，结果以乙腈－水为流动相时分离效果较好；并对其流动相比例进行了适当调整，结果乙腈－水（72∶28）分离度更好。

3.2 主要成分选择

方中泽泻为主药，23－乙酰泽泻醇B是其主要成分，质量标准中尚未对其含量进行控制，该方法简便易行，故采用测定处方中泽泻量来控制该制剂的质量。

3.3 提取条件选择

分别考察了以水、乙腈、80%甲醇作为溶剂，结果乙腈提取效果好，故以乙腈为溶剂；样品分别超声提取15，30min及加热回流1 h，结果超声30min提取较完全，故选择超声30min。

表1 23－乙酰泽泻醇B加样回收试验结果（n＝6）

3.4 检测波长选择

对23－乙酰泽泻醇B对照品溶液于200～400 nm波长范围内进行紫外扫描，于208 nm波长处有最大吸收，故选择该波长为检测波长。

[1]WS3－B－2605－97.卫生部药品标准·中药成方制剂(第十三册)[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社，2015：229.

[3]陈卫琳，陈红，林月贞，等.不同等级川泽泻中23－乙酰泽泻醇B含量测定[J].辽宁中医药大学学报，2012，14(12): 87－88.

[4]张英丰，朱黎霞，吴阳，等.反相高效液相色谱法测定泽泻提取物中23－乙酰泽泻醇B含量[J].现代医药卫生，2012，28(6):805－806.

[5]李清，周以飞，白泽方，等.HPLC法检测建泽泻中23－乙酰泽泻醇B含量[J].现代农业科技，2014(7):293－294.

[6]何丽君，马少丹，郑芳，等.HPLC法测定复方泽泻滴丸中23－乙酰泽泻醇B的含量[J].福建中医药大学学报，2011，21(4):41－44.

[7]赵顺，孙辉，丁野，等.HPLC法测定龙胆泻肝丸(大蜜丸)中23－乙酰泽泻醇B的含量[J].中国药师，2014，17(12): 2149－2151.

[8]蔡洪玲，陈福.泽泻配方颗粒中23－乙酰泽泻醇B的含量测定[J].中国疗养医学，2015，24(2):183－185.

[9]李小艳，许文，丘建芳，等.MPLC合p－HPLC法分离制备泽泻中23－乙酰泽泻醇B[J].福建中医药大学学报，2013，23(3):35－37.

[10]罗张炎，周爱存，张朝风，等.HPLC同时测定泽泻中4种泽泻醇成分的含量[J].中国中药杂志，2010，35(24):3306－3308.

[11]李丽霞，王书林，王强，等.HPLC法测定泽泻中3种成分的含量[J].中药材，2015，38(7):1444－1446.

[12]赵顺，孙辉，丁野，等.龙胆泻肝丸的质量标准补充研究[J].药物分析杂志，2015，35(1):133－138.

Content Determ ination of 23－Acetyl A lisol B in Yikang Capsu le by HPLC

Yang Lizhi,Jiang Xuemin
(Jixi Food and Drug Inspection and Testing Center,Jixi,Heilongjiang,China 158100)

Ob jective To establish an HPLC method for content determination of 23－Acetyl Alisol B in Yikang Capsule by HPLC.M ethods The separation was performed on a Agilent Extend－C18column(250 mm×4.6 mm,5μm)with acetonitrile－water(72∶28), The detection wave length was 208 nm and The flow rate was 1.0 m L/min.Resu lts There was good linearity between the peak area and injection volume in the ranges of 0.022 1－0.552 6μg(r＝0.999 9).The average recovery of 23－Acetyl Alisol B was 98.26%,RSD＝0.30%(n＝6).Conclusion The method is simple,reproducible and accurate,which can be used for quality control of Yikang Capsule.

23－Acetyl Alisol B;Yikang Capsule;HPLC;content determination

R927.2

A

1006－4931(2017)09－0033－03

2017－02－15)

10.3969/j.issn.1006－4931.2017.09.010

杨立志(1977－)，男，大学本科，副主任药师，主要从事药品检验检测工作，(电子信箱)lizhi669＠sohu.com。