新辅助介入动脉化疗对宫颈癌组织基质细胞衍生因子1及其受体表达的影响

王成德，王爱，刘杭

(潍坊市益都中心医院，山东青州262500)

宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤，多见于40～49岁的妇女。目前，化疗已成为治疗宫颈癌的重要手段之一。新辅助化疗是在对肿瘤进行手术或放疗前先进行2～3个疗程的化疗方法，能够明显提高手术切除率、降低肿瘤浸润及淋巴结转移等的发生风险[1]。根据给药途径不同可分为新辅助介入动脉化疗与新辅助静脉化疗，新辅助介入动脉化疗是通过直接对肿瘤供血动脉灌注化疗药物，相比于新辅助静脉化疗，其优势在于一方面增加了局部的药物浓度，另一方面降低了全身的药物浓度。基质细胞分泌的基质细胞衍生因子1(SDF-1)是一种趋化因子，可以激活和吸引白细胞及其他免疫细胞。CXCR4是SDF-1的受体，其在肿瘤细胞的生长、迁移中起着重要作用。研究表明，CXCR4/SDF-1轴可通过激活MAPK通路，调控宫颈癌细胞的黏附能力，进而调控肿瘤细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达，使得肿瘤细胞从原发部位更容易脱落，侵袭入细胞外基质和血管，参与宫颈癌的侵袭和转移[2]。2012年8月～2014年12月，我们对72例行新辅助介入动脉化疗的ⅠB～ⅡB期宫颈癌患者肿瘤组织SDF-1、CXCR4的表达情况进行了检测，探讨新辅助介入化疗对宫颈癌组织SDF-1、CXCR4表达的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择同期在我院就诊的72例ⅠB～ⅡB期宫颈癌患者，年龄33～56岁、中位年龄44岁。均经宫颈肿瘤组织病理检查确诊，病理类型为鳞癌59例、腺癌11例、腺鳞癌2例。按2009年国际妇产科联盟(FIGO)分期标准分为Ⅰb期42例、Ⅱa期17例、Ⅱb期13例。纳入标准：首次接受治疗；肿瘤直径≥4 cm；妇科检查示宫颈旁软组织增厚。随机分为新辅助介入动脉化疗组(治疗组)36例和新辅助静脉化疗组(对照组)36例。两组年龄、病情程度等一般资料差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 化疗方法 治疗组采用新辅助介入动脉化疗，经股动脉穿刺插管至对侧髂内动脉，造影显示子宫动脉或肿瘤主要供血动脉，靶血管内注入化疗药物总量的1/2，然后退出导管，在腹主动脉成袢后插入同侧髂内动脉，造影显示子宫动脉或肿瘤主要供血动脉，靶血管内注入剩余的化疗药物。对鳞癌患者采用长春新碱1 mg/m2+博来霉素25 mg/m2+顺铂60 mg/m2+丝裂霉素10 mg/m2的化疗方案，对腺鳞癌及腺癌患者采用阿霉素30 mg/m2+顺铂70 mg/m2的化疗方案。对照组采用长春新碱1 mg/m2+博来霉素25 mg/m2的介入静脉化疗方案。两组均间隔2周后重复一次给药。

1.3 近期疗效评价 化疗结束2周后，由两位妇科医师进行常规妇科检查，同时行盆腔MR检查，综合评定化疗的近期疗效。完全缓解(CR)为肿瘤全部消失，且没有发生新病灶；部分缓解(PR)为肿瘤缩小>50%，且没有发生新病灶；病灶稳定(SD)为肿瘤大小改变≤25%，且没有发生新病灶；疾病进展(PD)为肿瘤体积无明显缩小，有新病灶发生。以CR+PR计总有效率评价近期疗效。

1.4 化疗不良反应评估 采用WHO有关抗癌药不良反应的分度标准，分为 0～4 度。分别观察恶心呕吐、骨髓抑制等不良反应，每周复查血常规1～2次、肝肾功能1次。计算2度及以上不良反应的发生率。

1.5 宫颈癌组织SDF-1、CXCR4蛋白表达检测 采用免疫组织化学SP法。收集术前宫颈活检组织及化疗后手术切除的宫颈癌组织，制备5 μm厚切片，依次进行脱蜡水化、抗原修复、孵育、显色、复染、分化封片等处理。然后用高倍显微镜进行观察、计数，依据染色强度和阳性细胞所占百分比分别进行评分，两项相加得出综合评定结果。①染色强度评分：0分为没有染色；1分为染色呈淡黄色；3分为染色呈黄色至棕黄色；2分为染色强度介于淡黄色与黄色之间。②阳性细胞百分比评分：0分为阳性细胞≤10%；1分为阳性细胞>10%～25%；2分为阳性细胞>25%～50%；3分为阳性细胞>50%。总积分=阳性细胞百分比评分+染色强度评分。以总积分0～3分为阴性，≥4分为阳性。

1.6 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件，计数资料比较行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组近期疗效比较 对照组CR 2例、PR 29例、SD 5例、PD 0例、总有效率为86.11%，治疗组分别为5、28、3、0例及91.67%，两组近期疗效差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组发生2度及以上不良反应25例，发生率为69.4%，对照组发生2度及以上不良反应34例，发生率为94.4%，治疗组化疗期间不良反应发生低于对照组(P<0.05)。

2.2 两组化疗前后宫颈癌组织SDF-1及CXCR4蛋白表达比较 治疗组化疗前SDF-1蛋白阳性29例、化疗后阳性20例，化疗后SDF-1蛋白阳性表达率低于化疗前(P<0.05)。治疗组化疗前CXCR4蛋白阳性30例、化疗后阳性21例，化疗后CXCR4蛋白阳性表达率低于化疗前(P<0.05)。对照组化疗前SDF-1蛋白阳性30例、化疗后阳性20例，化疗后SDF-1蛋白阳性表达率低于化疗前(P<0.05)。对照组化疗前CXCR4蛋白阳性29例、化疗后阳性19例，化疗后CXCR4蛋白阳性表达率低于化疗前(P<0.05)。两组化疗后SDF-1及CXCR4表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。

3 讨论

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌，并呈年轻化的趋势[3]。宫颈癌的发病因素很多，其中高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌的主要危险因素。HPV是一种球形DNA病毒，能导致人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖，其有很多不同的类型，其中HPV-16是导致宫颈癌的主要亚型。研究表明，HPV-16可以通过提高CXCR4的运动能力来诱导趋化因子CXCR4的高表达，进而刺激表达活跃的细胞系在人工基底膜的侵入，从而促进肿瘤的转移[4,5]。

宫颈癌的治疗方式主要以手术和放疗为主，但是对于宫颈癌Ⅱb期及以上分期患者，其5年生存率约在50%[6]。随着化疗药物的不断更新、给药途径和给药方法的不断改善，化疗已从姑息治疗转变为治疗宫颈癌的重要手段之一。目前新辅助化疗已经成为最常用的化疗方法，其给药途径主要有静脉全身给药和介入动脉给药两种方式，其中新辅助介入动脉化疗其原理是应用血管性介入技术,在动脉内超选择性插管进行相应的化疗，包括单纯动脉化疗药物灌注及动脉化疗栓塞等。这样避免了药物第一次经过肝肾等组织时的首过效应，并减少了药物与血浆蛋白结合而失活的可能，可有效提高局部组织化疗药物血药浓度,使抗癌药物效价显著上升[7～9]，因而更有利于提高化疗疗效，并且不良反应发生率低。刘萍等[10]研究表明，介入动脉化疗后癌组织内化疗药物的峰值较静脉化疗高2.1倍，曲线下面积是静脉化疗的1.7倍。肿瘤供血动脉完全栓塞后，肿瘤达到了去血管化，肿瘤体积显著缩小，肿瘤与周围组织的粘连减轻，便于手术分离，可以降低术中出血，从而提高肿瘤的手术切除率。本研究发现，两组近期疗效差异无统计学意义，分析原因一方面与病例数少有关，另一方面与未对后续手术治疗效果进行评价、无法观察两种方法对手术治疗的影响有关。但是治疗组患者化疗期间2度及以上不良反应发生率低于对照组，分析原因为新辅助介入动脉化疗在增加局部药物浓度的同时减少了全身的药物浓度，从而明显降低了患者的不良反应发生率。

SDF-1是一种骨髓基质细胞的分泌型因子，对淋巴细胞的生长分化具有重要作用，其具有多种生物学功能，能够显著趋化CXCR4。研究发现，肿瘤细胞能够分泌SDF-1，促进肿瘤组织内血管的形成和肿瘤细胞的迁移，从而导致肿瘤的快速生长，因此SDF-1、CXCR4的水平可以反映肿瘤的活性。本研究所用的化疗药物顺铂能够破坏DNA的结构和功能，阿霉素能够干扰DNA和RNA的合成，博来霉素能够引起DNA链的断裂，长春新碱主要抑制微管蛋白的聚合而影响纺锤体微管的行成，还可干扰蛋白质代谢及抑制RNA多聚酶的活力，均对DNA和(或)RNA有一定的破坏作用。本研究发现，治疗组术后宫颈癌组织SDF-1、CXCR4阳性表达率均低于术前，表明新辅助介入动脉化疗能显著降低宫颈癌组织中SDF-1和CXCR4蛋白的表达，进而抑制肿瘤细胞的增殖及转移。

综上所述，新辅助介入动脉化疗治疗晚期宫颈癌临床疗效好，不良反应少，是一种安全有效的给药途径，值得临床推广应用。