HR—HPV DNA PCR和TCT联合检测在宫颈癌前病变诊断中的应用价值

2017-03-16张铁英

中国实用医药 2017年2期

张铁英

【摘要】目的研究宫颈癌前病变患者应用高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）DNA聚合酶链反应（PCR）与液基薄层细胞学检查（TCT）联合检测的诊断价值。方法 474例行宫颈癌前病变筛查的患者，均进行HR-HPV DNA PCR与TCT检测，观察诊断价值。结果 474例患者中，有270例患者TCT结果存在异常，而通过活检显示存在72例异常者， TCT检测符合率为26.67%（72/270）。有130例（27.43%）TCT阳性并HPV阳性者患者，其中鳞状细胞癌、高及低度鳞状上皮内病变、非典型鳞状上皮细胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率对比，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论宫颈癌前病变患者应用HR-HPV DNA PCR与TCT联合检测的诊断价值及推广价值较高。

【关键词】宫颈癌前病变；液基薄层细胞学检查；聚合酶链反应；高危型人乳头瘤病毒

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.02.030

宫颈癌属于妇科一种常见肿瘤，具有较高患病率和病死率，对患者生命安全造成严重威胁，临床对癌前病变和宫颈癌进行早期筛查与采取有效防治措施对生存率提高发挥着十分重要作用[1-4]。本文分析本院近1年对宫颈癌前病变进行筛查的474例患者临床资料，以提高疾病诊断准确率，尽早实施有效防治举措，从而促进患者生存率提高，现将相关研究内容作如下阐述。

1 资料与方法

1. 1 一般资料分析本院2015年11月～2016年11月对宫颈癌前病变进行筛查的474例患者临床资料，年龄21～66岁，平均年龄（42.30±7.92）岁，孕次1～3次，平均孕次（1.86±0.39）次，

受教育程度：初中至高中159例，大专至本科175例，本科以上140例。本文方案均得到医学伦理委员会批准，对象均自愿签署同意书。

1. 2 仪器与检测方法

1. 2. 1 TCT 将患者宫颈表面的黏液擦除，把宫颈细胞刷置入距离宫颈管内约1 cm位置，进行顺时针旋转，圈数为5圈，将其取出置于细胞保存液当中，针对瓶中收集的细胞通过Prep 2000系统予以薄片涂片染色，待TCT制片之后由经验丰富医师进行阅片。

1. 2. 2 HR-HPV DNA PCR 选择由苏州天隆生物科技有限公司提供的核酸扩增仪检测系统对PCR进行扩增和显色等，用原装的配套试剂HR-HPV核酸定量加以检测，采取PCR荧光分析方法，且将宫颈刷置患者宫颈口，转4圈，将宫颈刷置于备有1 ml洗脱液的洗脱管中，置零下20℃冰箱待检或者立即送检。检测时把宫颈刷于洗脱管中漂洗，将洗脱液完全转移至1.50 ml微量离心管内，进行离心，时间维持10 min，将上清液去除，对管底细胞快予以保留，且加50 μl裂解液沉淀，用100℃水浴加热10 min，进行离心，时间为10 min，将上清液保留待用。取1 μl DNA抽提溶液，置HPV PCR的扩增体系，严格遵照扩增程序予以扩增。

1. 2. 3 病理学针对TCT与HR-HPV DNA PCR检测结果均通过宫颈锥切下或者借助电子阴道镜实施病理性活检，组织病理学子宫颈上皮内新生病灶分级依据Riehart标准[5]对诊断结果进行评定。

1. 3 统计学方法采用SPSS21.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率（%）表示，采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 TCT检测结果宫颈癌前病变筛查的474例患者中，有270例患者TCT结果存在异常，而通过活检显示存在72例异常者， TCT检测符合率为26.67%（72/270）。

2. 2 宫颈癌前病变不同类型HPV感染率宫颈癌前病变筛查的474例患者中，有130例（27.43%）TCT阳性并HPV阳性者患者，其中鳞状细胞癌、高及低度鳞状上皮内病变、非典型鳞状上皮细胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 3 TCT与HR-HPV DNA PCR单用和联合检测特异度、敏感度和阳性预测值通过活检确诊子宫颈上皮内新生病灶分级Ⅱ级以上患者36例， TCT 30例阳性， HR-HPV 33例阳性，且HR-HPV DNA PCR与TCT联合检测敏感度100.00%和阳性预测值27.69%均较单纯TCT、HR-HPV高（P<0.05）。

3 讨论

临床相关研究表明：系统性宫颈筛查可有效降低疾病患病率，对患者生存率提高至关重要，临床需引起临床医师和患者重视，并积极寻求可靠检测方法[6-12]。

本研究结果显示：宫颈癌前病变筛查的474例患者中，有270例患者TCT结果存在异常，而通过活检显示存在72例异常者， TCT检测符合率为26.67%（72/270）。表明临床对宫颈癌前病变筛查者应用TCT检测的异常检测符合率较低，易出现漏诊，单一检测价值不高。宫颈癌前病变筛查的474例患者中，有130例（27.43%）TCT阳性并HPV阳性者患者，其中鳞状细胞癌、高及低度鳞状上皮内病变、非典型鳞状上皮细胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率对比，差异均具有统计学意义（P<0.05）。鳞状细胞癌与高、低度鳞状上皮内病变及非典型鳞状上皮细胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率显示高度差异，其中非典型鳞状上皮细胞HPV感染几率60.00%均较鳞状细胞癌3.08%与高、低度鳞状上皮内病变6.15%、30.77%高， HR-HPV感染率18.18均较鳞状细胞癌100.00%与高度鳞状上皮内病变71.43%低，且HR-HPV DNA PCR与TCT联合检测敏感度100.00%和阳性预测值27.69%均较单纯TCT、HR-HPV高，和邓弘[5]研究结果具有较高一致性。提示：伴随宫颈癌前病变的级别升高， HR-HPV感染率也不断升高， HR-HPV感染和宫颈病变严重度呈现正相关性，且感染HPV危险类型和细胞学分级存在一致性，高危型患者细胞分化较差，低危型患者细胞分化较好[13-20]。

总之，临床对宫颈癌前病变者应用HR-HPV DNA PCR与TCT联合检测具有较高价值，属于宫颈病变筛查一种可靠方法，有利于尽早发现宫颈存在的异常细胞，为疾病防治举措开展提供重要依据，从而促进患者病情改善和生存率提高，临床应用及推广价值较高。

参考文献

[1] 康慧杰，王金桃，高晨菲，等. DNA甲基转移酶1与甲基-CpG-结合蛋白2异常表达在宫颈病变中的作用及相互关系.中华流行病学杂志， 2013， 34（12）：1223-1227.

[2] 赵宇倩，宋艳，赵方辉，等.阴道镜下四象限活檢在宫颈癌前病变筛查中的价值.中华肿瘤杂志， 2015， 37（11）：875-879.

[3] 常小垒，郭科军，张颐.HPV亚型与子宫颈癌前病变及癌变的关系探讨.中国医科大学学报， 2014， 43（8）：720-723， 727.

[4] 柯水香，郭玲.高危HPV病毒分型与液基细胞学检查在早期宫颈病变筛查中的临床价值.海南医学院学报， 2014， 20（6）： 825-827， 831.

[5] 邓弘.宫颈液基细胞学检测在宫颈癌防治中的作用.中国药物与临床， 2013， 13（2）：241-242.

[6] 陈炎添，陈青龙，熊燕，等. HR-HPVDNAPCR联合TCT检测对宫颈癌前病变的诊断价值. 检验医学， 2013， 28（6）：516-518.

[7] 宋林林，李迎莉. 宫颈癌及癌前病变筛查中TCT和HPV-DNA联合检测的分析研究. 中国伤残医学， 2012（12）：44-45.

[8] 毕倩波. 宫颈TCT和HPV-DNA联合检测在宫颈癌前病变中的诊断意义. 吉林医学， 2015（14）：3027-3028.

[9] 夏莉花. 液基细胞学检查联合HR-HPV DNA PCR检测对宫颈癌前病变筛查的应用评价. 医学理论与实践， 2016（21）：2973-2974.

[10] 王娟利. 超薄液基细胞学和人乳头瘤病毒检测在宫颈癌和癌前病变筛查中的价值. 中国肿瘤临床与康复， 2014（5）：528-530.