己酸发酵液中己酸的检测方法

廖勤俭，郭艳，周翰玲，安明哲，李杨华，王小琴，谢正敏

(四川宜宾五粮液股份有限公司，四川宜宾644007)

己酸发酵液中己酸的检测方法

廖勤俭，郭艳，周翰玲，安明哲，李杨华，王小琴，谢正敏

(四川宜宾五粮液股份有限公司，四川宜宾644007)

建立了一种己酸发酵液中己酸的检测方法。己酸发酵液经硫酸酸化处理后，用二氯甲烷萃取，利用气相色谱检测萃取液中的己酸。结果表明，定量检测限为10mg/L，线性相关系数R2值为0.9999，回收率为98.05%～101.88%，检测结果的相对偏差（RSD）为0.32%。

己酸发酵液；己酸；萃取；气相色谱

己酸是浓香型白酒中己酸乙酯的前体物质，也是白酒成分之一。目前，己酸发酵液的检测方法有硫酸铜显色法、比色法、纸上层析法、直接进样毛细管柱气相色谱法[1]，蒸馏进样毛细管柱气相色谱法[2]等，其中硫酸铜显色法、比色法、纸上层析法较适合于生产中的快速检测，但不能准确地检出发酵液中的己酸含量。己酸发酵过程会添加碳酸钙等调节pH值的盐类，不能直接进气相色谱仪进行检测，已有的气相色谱法也有对发酵液样品的前处理，如活性炭吸附，过滤，或是蒸馏己酸发酵液的方式。本实验研究了一种己酸发酵液中己酸的检测方法，经硫酸酸化后，利用二氯甲烷进行萃取，萃取液进气相色谱仪进行检测，该方法简便适用，精确度高，重复性好。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

己酸标准品的配制：准确称取色谱级己酸，以二氯甲烷配制成100 m L浓度为10 g/L的标准储备液放置于4℃冰箱中冷藏。

仪器设备：美国Agilent公司6890气相色谱，FID检测器。

1.2 实验方法

1.2.1 气相色谱条件

色谱柱：HP-INNOWax Agilent30×0.25×0.25；进样口温度：250℃；检测器温度：250℃；柱流速：恒流1.0m L/m in；分流模式：20∶1；进样量：1μL；柱温程序升温：（HPINNOWax Agilent）40℃（保持1 m in），以8℃/m in升温至100℃（保持1m in），再以6℃/m in升温至220℃（保持1m in）。

1.2.2 样品前处理

己酸发酵液200μL，2%的硫酸溶液100μL，混匀后，用2m L的二氯甲烷进行萃取，萃取液用0.2μm的膜过滤后作为待测样品。

2 结果与分析

2.1 标样和样品的检测

取10 g/L的己酸标准溶液，用二氯甲烷稀释至1000mg/L，进行定性检测。标准品和样品的气相色谱图见图1、图2，己酸的出峰时间为20.820m in左右。

2.2 标准曲线及线性范围

取10mg/L的己酸标准溶液，用二氯甲烷稀释至100 mg/L、500 mg/L、1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L共5个浓度梯度，作为定量分析校正。以峰面积Y为纵坐标，以质量浓度（mg/L）为X横坐标进行线性回归。结果表明，化合物线性关系良好，回归方程为y=0.5493x-11.272，R2值为0.9999，满足分析要求。根据3倍信噪比计算出化合物的检测限为10mg/L。

表1 精密度实验结果(n=6)

图1 标样色谱图

图2 发酵液样品色谱图

2.3 精密度实验

用上述实验方法对同一样品平行测定6次，得到发酵液经前处理后的待测样品中己酸含量的检测结果的相对偏差（RSD）为0.32%，满足分析要求，结果见表1。

2.4 加标回收率实验

取发酵液4份，其中1份作为空白本底值进行前处理，另外3份分别加入已知量的标准溶液后进行前处理，处理后的样品进行检测，用上述实验方法进行回收率实验。实验结果表明，化合物的回收率为98.05%～101.88%，满足分析要求。表2中数据为处理后样品及加标处理后样品的实测值。

表2 处理后样品及加标处理后样品的实测值

3 结果与讨论

该方法能快速准确地分析发酵液样品中的己酸含量。发酵液样品只需简单的萃取就能进样分析，R2值、检测的精密度、加标回收率等各项指标均达到分析要求。

该方法还可以检测酿酒废水中的己酸、丁酸等沸点较高的有机酸，省去了对有机酸的衍生等前处理，又避免了直接进样对色谱柱的损害。

[1]罗维,刘永婷.准确测定己酸菌液中己酸含量的方法[J].酿酒科技,2003(5)：83.

[2]钟雨,谢宜辉.己酸菌培养液中己酸含量的测定方法[J].酿酒科技,2004(3)：91-92.

Determination Method of Caproic Acid in Caproic Acid Fermented Liquid

LIAOQinjian,GUOYan,ZHOU Hanling,ANM ingzhe,LIYanghua,WANG Xiaoqin and XIEZhengm in
(Wuliangye Group Co.Ltd.,Yibin,Sichuan 644007,China)

In this study,a method for the determination of caproic acid in caproic acid fermented liquid has been developed.Caproic acid fermented liquid was acidified by using sulfuric acid and then extracted by using dichloromethance,and caproic acid in the extract was determined by using GC.The results suggested that,the quantitative detection limit was 10 mg/L,the linear correlation coefficient R2was 0.9999,the recovery ratewas98.05%to 101.88%,and relative deviation(RSD)of the test results was0.32%.

caproic acid fermented liquid;caproic acid;extraction;gas chromatography

TS262.3；TS261.1；TS261.7

A

1001-9286（2017）02-0118-02

10.13746/j.njkj.2016282

2016-09-18

廖勤俭，女，四川宜宾人，高级工程师，主要从事仪器分析工作。

优先数字出版时间：2016-11-21；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20161121.1632.004.htm l。