鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin表达及其与肿瘤侵袭、转移及患者预后的关系

李琴，谢琼

(华中科技大学同济医学院附属荆州医院，湖北荆州434020)



鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin表达及其与肿瘤侵袭、转移及患者预后的关系

李琴，谢琼

(华中科技大学同济医学院附属荆州医院，湖北荆州434020)

目的 探讨埃兹蛋白(Ezrin)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在鼻咽癌发生、发展中的作用。方法 选择鼻咽癌患者53例(观察组)、慢性鼻咽炎症患者50例(对照组)，取两组病变组织，采用免疫组化法观察Ezrin、E-cadherin蛋白表达；分析鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果 观察组Ezrin阳性表达率明显高于对照组，E-cadherin阳性表达率明显低于对照(P均<0.05)；临床分期Ⅲ～Ⅳ期、伴淋巴转移、浸润深度T3～4者Ezrin阳性表达率明显升高(P均<0.05)，E-cadherin阳性表达率明显降低(P均<0.05)；Ezrin阴性者3年生存率明显高于Ezrin阳性者，E-cadherin阳性者3年生存率明显高于E-cadherin阴性者(P均<0.05)。结论 鼻咽癌组织Ezrin高表达、E-cadherin低表达，其表达变化与鼻咽癌侵袭、转移及患者预后有关。

鼻咽癌；埃兹蛋白；上皮细胞钙黏蛋白；预后

上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)属于Ca2+依赖性的细胞黏附分子，对胚胎发育的细胞识别、迁移等具有重要作用。有研究证实，E-cadherin功能或表达缺失与恶性肿瘤的进展和转移有关[1～3]。埃兹蛋白(Ezrin)属于ERM家族的一员，为膜蛋白骨架连接蛋白，在维持细胞形态稳定、连接黏附分子及调节信号转导等方面具有重要作用。Ognibene等[4]研究发现，在乳腺癌、子宫内膜癌、骨癌等侵袭和转移能力较强的恶性肿瘤组织中Ezrin过表达。但目前关于Ezrin、E-cadherin在鼻咽癌侵袭和转移中的研究较少，二者是否参与了鼻咽癌的不良预后亦不十分明确。本研究观察了鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin表达变化，并分析其表达与肿瘤侵袭、转移及患者预后的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2010年5月～2012年5月我院收治的鼻咽癌患者53例(观察组)，均经术后组织病理检查确诊，入组前未行放疗、化疗及手术治疗。排除合并其他恶性肿瘤及既往给予其他抗肿瘤治疗者。其中，男31例、女22例，年龄21～84(47±5)岁；临床分期[5]：Ⅰ期3例，Ⅱ期10例，Ⅲ期22例，Ⅳ期18例；浸润深度：T1～223例，T3～430例；合并淋巴结转移34例。同期选择在我院就诊的慢性鼻咽炎症患者50例(对照组)，男29例、女21例，年龄18～87(48±4)岁，鼻窦炎27例、咽炎23例。两组性别、年龄具有可比性。

1.2 病变组织Ezrin、E-cadherin表达检测 留取两组相应的病变组织，10%甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm厚切片。切片常规脱蜡、水化，去除内源性过氧化物酶，微波修复，封闭组织非特异性抗原，以鼠抗人Ezrin单克隆抗体或鼠抗人E-cadherin单克隆抗体作为一抗，4 ℃孵育24 h，阴性对照以PBS代替一抗；以生物素标记的羊抗兔IgG作为二抗，37 ℃孵育30 min；滴加辣根过氧化酶标记的复合物，37 ℃孵育20 min；最后DAB显色，苏木精复染，二甲苯透明，中性树胶封片，镜检。随机取5个高倍镜视野(×400)，计数阳性细胞数，以染色强度和阳性细胞所占比例综合评定。Ezrin阳性主要定位于细胞质和细胞膜，呈黄色；E-cadherin阳性主要定位于细胞质或细胞膜，呈棕黄色或棕色。染色强度判定：无染色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕红色为3分；阳性细胞所占比例：无阳性细胞为0分，阳性细胞所占比例<30%为1分、≥30%～<60%为2分、≥60%为3分。二者之和≤2分为阴性，≥3分为阳性。

1.3 术后治疗及随访 鼻咽癌患者术后行常规局部根治性放疗联合化疗。放疗剂量：原发灶65～76 Gy，颈淋巴结50～65 Gy；放疗时间35～54天。其中31例患者联合1～6个疗程辅助化疗，化疗方案为PF方案。术后随访3年，随访方式包括电话和门诊复查，记录患者生存期。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验或Fishers确切概率法。相关性分析采用Spearman相关性分析。生存分析采用Kaplan-Meier法，生存率比较采用Log-rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Ezrin、E-cadherin阳性表达比较 观察组及对照组Ezrin阳性表达率分别为67.9%(36/53)、6.0%(3/50)，E-cadherin阳性表达率分别为17.0%(9/53)、98.0%(49/50)。观察组Ezrin阳性表达率明显高于对照组，E-cadherin阳性表达率明显低于对照组(P均<0.05)。

2.2 鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin表达的关系 鼻咽癌组织Ezrin阳性表达与E-cadherin阳性表达呈负相关关系(r=-0.471，P<0.01)。

2.3 鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin阳性表达与患者临床病理参数的关系 见表1。

表1 鼻咽癌组织Ezrin、E-cadherin阳性表达与患者临床病理参数的关系

2.4 生存分析 鼻咽癌Ezrin阴性者17例，3年生存率为22.3%；Ezrin阳性者36例，3年生存率为6.2%；二者比较差异有统计学意义(χ2=6.071，P<0.01)。鼻咽癌E-cadherin阳性者9例，3年生存率为40.8%；E-cadherin阴性者44例，3年生存率为22.7%；二者比较差异有统计学意义(χ2=4.715，P<0.01)。

3 讨论

现已证实，Ezrin、E-cadherin异常表达与恶性肿瘤的侵袭、转移有关。Ezrin是维持细胞形态和功能完整的主要蛋白之一。正常情况下，Ezrin蛋白在体内以激活状态和休眠状态两种形式存在[6，7]；当Ezrin末端被活化后能诱导其与黏附分子连接，从而导致细胞发生迁移。有研究证实，Ezrin通过介导细胞膜与细胞骨架的连接来调节细胞活动[8，9]。细胞内Ezrin异常变化可导致某些肿瘤的进展，并与患者预后有关。如王繁等[10]报道，子宫内膜癌组织Ezrin过表达与肿瘤侵袭和转移有关，且患者生存期缩短。本研究观察组Ezrin阳性表达率明显高于对照组，临床分期Ⅲ～Ⅳ期、伴淋巴转移、浸润深度T3～4者Ezrin阳性表达率明显升高，且Ezrin阴性者3年生存率明显高于Ezrin阳性者。说明Ezrin过表达与鼻咽癌侵袭和转移有关，且其过表达多预示患者预后不良。

E-cadherin在各种上皮细胞中广泛存在，可介导同型细胞发生连接。Nakagawa等[11]研究证实，E-cadherin在维持上皮细胞形态、组织结构和功能完整等方面具有重要作用。正常组织中E-cadherin表达稳定；上皮性肿瘤组织中E-cadherin表达下调[12]。Ohishi等[13]报道，E-cadherin表达降低会抑制其与细胞内catenin形成稳定复合物，导致细胞骨架发生松动，细胞脱离原位而侵袭周围组织。Koyuncuoglu等[14]研究证实，E-cadherin表达降低可导致由其介导的细胞间黏附性降低，细胞脱离原发灶并穿透基膜侵袭周围组织。刘青等[15]研究发现，鼻咽癌组织E-cadherin低表达与鼻咽癌临床分期、淋巴结转移有关。本研究观察组E-cadherin阳性表达率明显低于对照组，临床分期Ⅲ～Ⅳ期、伴淋巴转移、浸润深度T3～4者E-cadherin阳性表达率明显降低；E-cadherin阳性者3年生存率明显高于E-cadherin阴性者。提示E-cadherin阳性表达可抑制肿瘤侵袭和转移。本研究还发现，鼻咽癌组织Ezrin阳性表达率与E-cadherin阳性表达率呈负相关，说明Ezrin高表达、E-cadherin低表达均与鼻咽癌的侵袭和转移有关。

综上所述，Ezrin高表达、E-cadherin低表达参与了鼻咽癌的侵袭、转移并与患者预后有关。

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谢琼(E-mail： 1279566754@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.40.032

R739.6

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1002-266X(2016)40-0094-03

2016-07-24)