柿木屑基质下香菇培养基的优化
2016-11-07刘敏齐悦歌申小燕徐啸晨王谦
刘敏,齐悦歌,申小燕,徐啸晨,王谦
(1.河北大学生物技术研究中心,河北保定 071002;2.河北大学生命科学学院,河北保定 071002)
柿木屑基质下香菇培养基的优化
刘敏,齐悦歌,申小燕,徐啸晨,王谦
(1.河北大学生物技术研究中心,河北保定071002;2.河北大学生命科学学院,河北保定071002)
以柿木屑为基质,以菌丝长速和生物转化率为主要指标,对香菇(Lentinusedodes)的栽培培养基进行了优化,结果表明:配方B是栽培香菇较为适宜的栽培配方,各组分的质量分数为柿木屑60%,杂木屑20%,麸皮19%,石灰1%.
香菇;柿木屑;栽培
香菇(Lentinusedodes)又名冬菇、香蕈、香菌等,隶属于担子菌门、伞菌纲、多孔菌目、多孔菌科、香菇属,是世界著名的食用菌之一[1].香菇营养丰富,口味鲜美,是一种食药兼用菌,其主要成分有香菇多糖、香菇嘌呤、三萜类化合物、核苷酸、多种蛋白质和氨基酸、膳食纤维素等,有研究表明香菇还具有一定的免疫调节作用[2],故深受消费者的喜爱.目前行业内主要使用杂木屑栽培香菇,近年来香菇产业发展迅速,杂木屑的价格也一路飙升,且难以满足香菇生产日益增长的需求,因此,寻找新原料栽培香菇具有重大的现实意义.柿子的栽培历史悠久、栽培面积广,河北省柿子的产量居全国第一.由于柿树枝条的修剪,每年产生大量的废弃柿木,不能被很合理地利用,只是被烧火或堆置,不仅浪费资源,还污染环境.本文利用柿木屑来部分代替传统的杂木屑栽培香菇,初步确定适宜的配方,为柿木屑的开发利用提供参考.
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1供试菌株
香菇菌株X006,河北大学食药用真菌研究所保藏菌种.
1.1.2培养基
斜面培养基:质量分数分别为马铃薯15%,麸皮5%,琼脂2%,蔗糖2%.
原种培养基:质量分数分别为杂木屑80%,麸皮19%,石灰1%.
栽培培养基配方见表1.
表1 栽培培养基配方(干料)
1.2方法
1.2.1不同配方菌丝生长情况实验
按照表1进行培养基的配制,配好后装入18 mm×180 mm试管中,每管干料约8 g,121 ℃、0.15 MPa灭菌2.5 h,待培养基冷却至室温时进行接种.接种时将X006菌株取等量菌块分别转接在各个培养基上,每组5个平行,25 ℃恒温避光培养,培养过程中注意观察,待菌丝萌发长齐后开始划线,每隔5 d划1次线,记录菌丝的长速、长势.
1.2.2不同配方栽培比较实验
按表1栽培培养基配方,称重,混合均匀后,按料水质量比1∶(1.2~1.3)将水加入干料中,使培养料中水的质量分数达65%~75%(紧攥感觉指缝有水分溢出但不滴落),待培养基质充分吸收水后装入17 cm×32 cm×0.005 cm栽培袋中,每袋装干料约320 g,每个配方接100袋.灭菌、接种.
在18~30 ℃条件下避光培养,定期观察菌丝生长情况,并记录满袋时间,菌丝长满后,移至出菇棚,准备脱袋转色,进行出菇管理.定时观察各不同配方中的出菇情况,并计算生物转化率.
生物转化率=子实体鲜重/培养料干重×100%.
1.2.3香菇多糖的提取
子实体多糖的提取采用常规的水提醇沉法[3-6].首先将子实体烘干、去柄、粉碎.称取10 g香菇干粉,加入200 mL蒸馏水,85 ℃水浴浸提5 h,粗蛋白去除采用Sevag 法:氯仿、正丁醇按体积比4∶1 混合后再以样液、氯仿-正丁醇3∶1的体积比加入到多糖样品中震荡,使样品中蛋白质与混合液形成凝胶[7],过滤收集滤液.向滤液中加入2.5倍体积的无水乙醇,4 ℃静置过夜,过滤后收集沉淀即为香菇多糖,烘干、称重,计算多糖含量,每组做3个平行.
多糖含量=多糖质量/样品质量×100%.
实验数据采用SPSS软件进行统计分析.
2 结果与分析
2.1不同配方菌丝生长情况
香菇菌株在不同配方培养基中菌丝生长情况见表2.
从表2可以看出,香菇在B、D培养基上长速较快并且与对照无显著性差异,可以初步判断,柿木屑完全可以用来栽培香菇,并且能达到与杂木屑相当的水平.
2.2不同配方栽培比较实验
香菇菌株在不同配方培养基中生物转化率情况见表3.
表2 香菇菌株在不同培养基中的生长速度
不同小写字母表示0.05水平上差异显著;不同大写字母表示0.01水平上差异极显著;“+++”表示菌丝生长浓密.
表3 香菇菌株在不同培养基中的生物转化率
不同小写字母表示0.05水平上差异显著;不同大写字母表示0.01水平上差异极显著.
从表3的实验结果可以看出,CK培养基中香菇的满袋天数最短,生物转化率最高,配方B、C、D与对照相比虽然生物转化率有但是并无显著性差异,因为配方B的柿木屑含量较高,实际生产成本更低,结合2.1的实验结果综合考虑,利用柿木屑栽培香菇的适宜配方为B:其中各组分的质量分数为柿木屑60%,杂木屑20%,麸皮19%,石灰1%.
2.3不同配方香菇多糖含量
不同配方栽培得到的香菇子实体中多糖含量情况见表4.
表4 香菇菌株在不同培养基中的多糖含量比较
相同小写字母表示0.05水平上无显著性差异.
由表4可知,不同配方栽培得到的香菇子实体中香菇多糖含量无显著性差异,说明利用柿木屑栽培香菇并没有影响香菇的药用价值.
3 结论
本文从菌丝长速、满袋时间、生物转化率和多糖含量4个方面对利用柿木屑栽培香菇时的配方进行了探讨,适宜配方为B,其中各组分的质量分数为柿木屑60%、杂木屑20%、麸皮19%、石灰1%,不仅降低了生产成本、丰富了食用菌栽培原料,还为农林废弃物柿木屑的资源化利用开辟了一条新途径.
[1]暴增海,杨辉德,王莉.食用菌栽培学[M].北京:中国农业科学技术出版社,2010:63-74.
[2]董晓宇,宁安红,曹婧,等.香菇及其药理作用研究进展[J].大连大学学报,2005,26(2):63-69.
DONG Xiaoyu,NING Anhong,CAO Jing,et al.On progress of the research onLentinusedodes(Berk) Sing.and the pharma cological effect[J].Journal of Dalian University,2005,26(2):63-69.
[3]张楷正,杨跃寰,李光辉,等.香菇多糖提取方法研究进展[J].四川理工学院学报(自然科学版),2009,22(6):63-66.
ZHANG Kaizheng,YANG Yuehuan,LI Guanghui,et al.Research adavances on the extracting methods of lentinan[J].Journal of Sichuan University of Science &Engineering(Natural Science Edition),2009,22(6):63-66.
[4]刘树兴,齐香君,李敏康,等.香菇多糖提取工艺的研究[J].西北轻工业学院学报,2002,20 (20):23-25.
LIU Shuxing,QI Xiangjun,LI Minkang,et al.Study on the extraction of polysaccharide fromLentinuseodes[J].Journal of Northwest University of Light Industry,2002,20(20):23-25.
[5]王谦,钱先来.弱碱性介质下微波法提取灵芝多糖的优化[J].河北大学学报(自然科学版),2010,30(2):196-200.
WANG Qian,QIAN Xianlai.Optimization for the extraction of polysaccharides by microwave in weak ilkaline medium [J].Journal of Hebei University(Natural Science Edition),2010,30(2):196-200.
[6]王卫国,赵永亮.香菇多糖分离最佳工艺及最佳工艺原料探讨[J].中草药,2000,31(8):584-585.
WANG Weiguo,ZHAO Yongliang.Studies on the choice of material and optimal conditions for the extraction of lentinan from mushroom[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2000,31(8):584-585.
(责任编辑:赵藏赏)
Optimization of the cultivation medium for Lentinus edodes based on persimmon wood chips
LIU Min1,QI Yuege2,SHEN Xiaoyan2,XU Xiaochen2,WANG Qian1
(1.Research Center of Biotechnology,Hebei University ,Baoding 071002,China;2.College of Life Sciences,Hebei University,Baoding 071002,China)
Taking persimmon wood chips as materials,the formula of cultivation medium was studied according to the mycelial growth rate and biological efficiency.The results showed that the optimal cultivation medium was B.The mass fraction of each component was:persimmon wood chips 60%,sawdust 20%,bran 19%,and quicklime 1%.
Lentinusedodes;persimmon wood chips;mushroom cultivation
10.3969/j.issn.1000-1565.2016.02.012
2015-05-25
河北省现代农业产业技术体系食用菌创新团队项目
刘敏(1985—),女,河北保定人,河北大学实验师,主要从事食药用真菌研究与开发工作.
E-mail:liumin870115@163.com
Q93-335
A
1000-1565(2016)02-0180-04