骨科患者伤口脓液标本分离菌药敏试验结果分析

黎日海， 刘建瑜， 莫庆森， 吴甲文， 程金玲

·论著·

骨科患者伤口脓液标本分离菌药敏试验结果分析

黎日海， 刘建瑜， 莫庆森， 吴甲文， 程金玲

目的 了解桂平市人民医院骨科患者伤口脓液标本分离菌分布及其药物敏感性，为临床治疗提供参考依据。方法 对2009—2013年骨科住院患者伤口脓液标本培养结果回顾性统计分析。结果 分离到2 544株细菌共73种，前6位分别是铜绿假单胞菌（17.9%）、肠杆菌属（14.2%）、大肠埃希菌（10.5%）、不动杆菌属（9.6%）、克雷伯菌属（9.0%）和金黄色葡萄球菌（金葡菌）（8.8%）。主要分离菌中，不动杆菌属对所有药物敏感率＜75%。对不同年度的药物敏感率分析：金葡菌对苯唑西林敏感率由2009-2012年度的78.6%下降为2013年的56.9%（P=0.002）；对左氧氟沙星敏感率由2009-2012年度的88.1%下降为2013年的70.8%（P=0.003）。铜绿假单胞菌对美罗培南敏感率由95.9%下降为86.9% （P=0.008），对哌拉西林-他唑巴坦的敏感率由75.4%上升为91.8%（P=0.007）。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮-舒巴坦和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑敏感率由2009—2012年度的40.7%和20.6%上升为2013年的57.9%和52.6%（P = 0.000和0.003）。大肠埃希菌对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑敏感率由2009—2012年度的18.4%上升为2013年的38.9% （P=0.002）。肺炎克雷伯菌对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑敏感率由2009—2012年度的43.2%下降为2013年的39.6%（P=0.000）。2009-2012年金葡菌中MRSA检出率为21.4%，2013年则为43.1%。大肠埃希菌中ESBL检出率为41.4%，对碳青霉烯类耐药率0.5%；肺炎克雷伯菌ESBL检出率为27.4%，耐碳青霉烯类占1.7%；阴沟肠杆菌耐碳青霉烯类占3.6%。结论 该院骨科患者伤口脓液标本分离菌中不动杆菌属耐药率较高，常规所选药物敏感率均＜75%。不同年度药物敏感性比较：金葡菌对苯唑西林、左氧氟沙星敏感率下降，铜绿假单胞菌对美罗培南敏感率下降，铜绿假单胞菌对哌拉西林-他唑巴坦敏感率上升。2013年MRSA发生率上升明显。

骨科； 伤口分泌物； 药物敏感试验

骨科创口的开放性及伤口接触环境多样性，使分离菌也呈多样和复杂。给骨科创伤治疗带来许多困难。为更好了解骨科伤口脓液标本分离菌的情况，对我院2009—2013年骨科送检的伤口分泌物、脓液、切口分泌物培养分离菌及其药敏进行回顾性分析，以期揭示这几年来骨科伤口脓液标本分离菌及其药敏情况，更好地为临床服务。

1 材料与方法

1.1 资料来源

2009—2013年我院骨科送检伤口分泌物（包括脓和术后切口）的细菌培养，共6 080例次，2 912份标本细菌培养阳性，阳性率47. 9%。收集有伤口红肿或有分泌物流出、发热等有伤口或切口的患者，并仅分析首次培养阳性的样本，共2 544份。

1.2 方法

1.2.1 菌株鉴定与药敏试验 细菌鉴定应用ATB Expression 半自动微生物鉴定系统。药敏试验用K-B 法。采用英国 OXOID 公司生产的培养基及抗菌药物纸片。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218，粪肠球菌ATCC29212，铜绿假单胞菌 ATCC27853 和金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC25923。

1.2.2 研究方法 统计2009-2013年骨科患者伤口脓液标本分离菌的分布、主要分离菌药敏和多重耐药菌发生率。对分离菌前6位细菌（铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和金葡菌）进行2013年度与2009-2012年度药物敏感性对比分析。

1.2.3 统计分析方法 采用IBM SPSS Statistics 22统计学软件，主要为卡方独立性检验（Crosstabs）。药敏结果用WHONET5.6统计分析，结果判断采用2014年CLSI推荐标准。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.12009 -2013 年度骨科患者伤口脓液标本细菌分布

在2 544株分离菌中，革兰阳性菌573株（22.5%），革兰 阴性菌1 971株（77.5%）。分离的菌种见表1。

表1 2009—2013 年度骨科患者伤口脓液标本细菌分布Table 1 Distribution of the pathogens isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients during the period from 2009 to 2013

表1（续）Table 1（continued）

2.2 药敏试验结果

本次分离细菌中铜绿假单胞菌对所测试的抗菌药物敏感率均接近或超过70%。肠杆菌属细菌对氨苄西林、阿莫西林-克拉维酸、头孢西丁、头孢呋辛和头孢唑林为天然耐药；对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星和左氧氟沙星等药物敏感率＞75%。大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星等药物敏感率也＞75%。不动杆菌属细菌对全部所测药物的敏感率均＜75%。克雷伯菌属对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率均＞75%。主要革兰阴性菌药敏结果见表2。

表2 骨科患者伤口脓液标本主要革兰阴性菌药敏结果Table 2 Susceptibility of the gram-negative bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients to antimicrobial agents （%）

表2（续）Table 2（continued）

金葡菌中甲氧西林耐药株（MRSA）检出率为27.7%（62/224），凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株（MRCNS）检出率83.3%（160/192）。MRSA和MRCNS对β内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类和喹诺酮类等抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）。粪肠球菌对所测试的大多数抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌。骨科患者伤口脓液标本主要革兰阳性分离菌的药敏结果见表3。

表3 骨科患者伤口脓液标本主要革兰阳性菌药敏结果Table 3 Susceptibility of the gram-positive bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients to antimicrobial agents （%）

2.3 重要耐药菌检出情况

重要耐药菌包括MRSA，耐万古霉素肠球菌（VRE），产超广谱β内酰胺酶（ESBL）肠杆菌，耐碳青霉烯类肠杆菌（CRE），耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CR-AB），耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌。骨科患者伤口脓液标本主要分离的耐药菌分别为：耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌（2.9%）；耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌（3.6%）；产ESBL大肠埃希菌（41.4%）；耐碳青霉烯类大肠埃希菌（0.5%）；CR-AB（34.7%）；产ESBL肺炎克雷伯菌（27.4%）；耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（1.7%）；MRSA（27.7%）。

2.4 不同年度主要6种分离菌的药物敏感率比较

金葡菌2013年与2009—2012年相比，苯唑西林（P=0.002）和左氧氟沙星（P=0.003）的敏感率下降均有统计学意义，其余抗菌药物的敏感率变化差异均无统计学意义，见表4。

不同年度铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的药物敏感率比较见表5。

表4 不同年度金葡菌的敏感率比较Table 4 Susceptibility of Staphylococcus aureus to antimicrobial agents compared between two time periods

表5 不同年度铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对抗菌药物敏感率比较Table 5 Susceptibility of P. aeruginosa and A. baumannii to antimicrobial agents compared between two time periods

金葡菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌 2009—2012年与2013年度的药物敏感率结果经统计学比较差别有统计学意义的是：金葡菌对苯唑西林（头孢西丁）敏感率由78.6%下降为56.9%；对左氧氟沙星敏感率由88.1%下降为70.8%。铜绿假单胞菌对美罗培南敏感率由95.9%下降为86.9%；对哌拉西林-他唑巴坦的敏感率由75.4%上升为91.8%。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮-舒巴坦和甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感率由40.7%和20.6%上升为57.9%和52.6%。大肠埃希菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感率由18.4%上升为38.9%。肺炎克雷伯菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感率由43.2%下降为39.6%。见表6。

表6 不同年度大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌对抗菌药物敏感率比较Table 6 Susceptibility of Enterobacteriaceae species E. coli， E. cloacae and K. pneumoniae to antimicrobial agents compared between two time periods

3 讨论

骨科患者伤口接触环境多种多样，分离的细菌种类也呈现多样性。给骨科患者伤口经验治疗带来困难。

骨科患者伤口标本分离菌分离率排位各地报道不一，王燕等［1］报道占分离菌前6位分别是铜绿假单胞菌15.4%、表皮葡萄球菌15.2%、金葡菌14%、大肠埃希菌13.3%、肠杆菌属8.1%和肠球菌8.1%。而我院骨科患者伤口脓液标本分离菌依次是铜绿假单胞菌17.9%、肠杆菌属14.2%、大肠埃希菌10.5%、不动杆菌属9.6%、克雷伯菌属9.0%和金葡菌8.8%。

在排前6位分离菌中，肠杆菌属、大肠埃希菌、克雷伯菌属对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星敏感率＞75%，可推荐为疑肠杆菌伤口感染的经验治疗用药［2-3］。排位第1的铜绿假单胞菌对除头孢哌酮-舒巴坦外所测抗菌药物敏感率均＞75%，这些药物均可作为疑铜绿假单胞菌伤口感染的经验治疗用药。不动杆菌属作为医院感染主要菌对美罗培南、亚胺培南、米诺环素、甲氧苄啶-磺胺甲唑、头孢哌酮-舒巴坦敏感率较高，可选用这些药物联合治疗［4］。从本统计分析看，骨科患者伤口分离的金葡菌主要是MSSA，治疗可考虑苯唑西林。而对MRSA，可选用万古霉素、利奈唑胺，它们敏感率均100%。

2013年度与2009—2012年的药敏结果比较显示：金葡菌对苯唑西林和左氧氟沙星、铜绿假单胞菌对美罗培南和哌拉西林-他唑巴坦、鲍曼不动杆菌对头孢哌酮-舒巴坦和甲氧苄啶-磺胺甲唑、大肠埃希菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑、肺炎克雷伯菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感率均下降，差异有统计学意义。金葡菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对其他药物敏感率变化不大（P＞0.05）。

［1］王燕，刘文良，王春娟. 2007-2009年骨折患者创面感染病原菌分布及耐药性监测［J］.中华医院感染学杂志，2013，23 （23）：5866-5868.

［2］周乐飞，陈利珍，丁雅萍，等.骨科患者伤口分泌物病原菌分布及药敏277例分析［J］.浙江中医药大学报，2014，38（4）：445-336.

［3］王殷红，陈俊华，李锡生.创伤骨科患者医院感染的病原菌分布及药敏分析［J］.中华医院感染学杂志，2014，24（2）：332-336.

［4］王娜，李少侠，张莎莎，等.骨科患者伤口感染的病原菌分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2014，24（7）：1603-1605.

Antimicrobial susceptibility of the bacterial strains isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients

LI Rihai， LIU Jianyu， MO Qingsen， WU Jiawen， CHENG Jinling. （Department of Laboratory Medicine，Guiping People′s Hospital， Guigang Guangxi 537200， China）

Objective To investigate the distribution and antimicrobial susceptibility of pathogenic bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients for better clinical treatment. Methods The bacterial strains were isolated from pus or wound secretion during the period from 2009 to 2013. Bacterial identification and susceptibility testing were conducted routinely. The data were analyzed retrospectively. Results A total of 2 544 strains of pathogenic bacteria were collected， belonging to 73 species. The top six pathogens were P. aeruginosa （17.9%）， Enterobacter spp. （14.2%）， Escherichia coli （10.5%）， Acinetobacter spp. （9.6%）， Klebsiella spp. （9.0%） and Staphylococcus aureus （8.8%）. Less than 25% of the Acinetobacter strains were susceptible to any of the antimicrobial agents tested. The susceptibility rate of S. aureus to oxacillin declined from 78.6% during 2009-2012 to 56.9% in 2013 （P=0.002）. The susceptibility rate of S. aureus to levofloxacin decreased from 88.1% during 2009-2012 to 70.8% in 2013 （P=0.003）. The susceptibility rate of of P. aeruginosa to meropenem declined from 95.9% to 86.9% （P=0.008）， while the susceptibility rate to piperacillin-tazobactam increased from 75.4% to 91.8% （P=0.007）. The percentage of theAcinetobacter baumannii strains susceptible to cefoperazone-sulbactam and trimethoprim-sulfamethoxazole increased from 40.7% and 20.6% during 2009-2012 to 57.9% and 52.6% in 2013 （P = 0.000， P = 0.003）. The susceptibility rate of the E. coli strains to trimethoprim-sulfamethoxazole increased from 18.4% during 2009 - 2012 to 38.9% in 2013 （P = 0.002）. The susceptibility rate of the K. pneumoniae strains to trimethoprim-sulfamethoxazole decreased from 43.2% during 2009 - 2012 to 39.6% in 2013 （P = 0.000）. The prevalence of MRSA in S. aureus was 21.4% duirng the period from 2009 to 2012 and 43.1% in 2013. About 41.4% of the E. coli isolates were ESBLs-producing strains， 0.5% were carbapenem-resistant Enterobacteriaceae （CRE）. And 27.4% of the K. pneumoiae strains were ESBLs-producing， and 1.7% were CRE. A few （3.6%） of the Enterobacter cloacae strains were CRE. Conclusions The top six pathogenic bacteria isolated from pus and wound secretion are P. aeruginosa， Enterobacter spp.， E. coli， Acinetobacter spp.， S. aureus and Klebsiella spp. The Acinetobacter strains were highly resistant to the antimicrobial agents tested. The susceptibility rate of S. aureus to oxacillin and levofloxacin， P. aeruginosa to meropenem has declined from 2009 to 2013， while the susceptibility rate of P. aeruginosa to piperacillin-tazobactam increased. The prevalence of MRSA increased significantly in 2013 relative to the prevalence in previous years.

orthopedics； wound secretion； antimicrobial susceptibility

R63

A

1009-7708（2016）02-0221-06

10.16718/j.1009-7708.2016.02.017

2015-01-24

2015-10-23

桂平市人民医院检验科，广西贵港 537200。

黎日海（1964—），男，大学专科，主管检验技师，主要从事医学微生物检验工作。

黎日海，E-mail：L6909370@163.com。