炮制对含生物碱类中药的影响分析

马定耀 付晓蕾 罗昭嫔

摘要：目的分析炮制对黄连中盐酸小檗碱含量影响以及中药炮制对临床药效的影响，探讨炮制对生物碱影响可能机制，总结炮制经验。方法参照《中国药典》2005版收录的净黄连、酒炙黄连、姜黄连、萸黄连工艺，分别炮制，绘制对照品黄连盐酸小檗碱标准曲线，y（峰面积）=-0.1065±50.0671x（对照品溶液量），r=0.999，线性范围300～700μg，设计酒炙黄连炒炙温度（150℃、170℃、190℃）、炒炙时间（2 min、4 min、6 min）正交实验。结果炒炙时间6 min、170℃盐酸小檗碱水平最高，达到6.23%；酒黄连盐酸小檗碱水平低于姜黄连，高于萸黄连，萸黄连高于生品，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论经过炮制，酒炙黄连、姜黄连、萸黄连生物碱水平均明显提高，其中先酒炙、姜制后生物碱水平最高；生物碱受炮制方式影响较显著，对温度较敏感。

关键词：生物碱；黄连；炮制方法

中图分类号：R283文献标志码：A文章编号：1007-2349（2016）10-0081-03

Analysis of Processing of Alkaloids Containing Chinese Medicine

MA Ding-yao， FU Xiao-lei， LUO Zhao-bin

（People’s Hospital of Yingde City， Yingde 513000， Guangdong）

【Abstract】Objective： To analyze the influence of processing berberine hydrochloride in Coptis chinensis and TCM processing on its clinical effect and to explore the possible mechanism of processing alkaloids. Methods： Refering to Chinese Pharmacopoeia （2005） edition， net berberine， wine berberine， curcuma berberine and fructus evodiae berberine were respectively processed， and the standard curve of reference substance berberine hydrochloride was drawn， y （peak area） = -0.1065 ± 50.0671x （amount of reference substance solution）， r=0.999， at the linear range of 300 to 700g and frying temperature （150℃， 170℃ and 190℃） was designed for wine berberine， frying time （2 min， 4 min and 6 min） was orthogonal experiment. At the same time 60 patients taking traditional Chinese medicine were randomly selected and divided into groups according to their conditions， treating them with processed alkaloids and tannins containing Chinese medicine to observe the clinical effect. Results： The berberine hydrochloride fried for 6 min at 170℃ had the highest level， reaching 6.23%. The level of wine berberine hydrochloride was lower than that of curcuma berberine and higher than that of fructus evodiae berberine， but fructus evodiae berberine was higher than that of raw material. The difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： After processing， the alkaloid levels of wine berberine， curcuma berberine and fructus evodiae berberine significantly increase， among which the highest level of alkaloid is the berberine prepared first with wine and then with curcuma. The alkaloid processing is affected by its way and more sensitive to temperature.

【Key words】alkaloids， berberine， influence

生物碱是生物体内含氮有机化合物的总称，是中药常见的一类有效成分。炮制是中药饮片制作的必要过程，但炮制本身可能带来一些理化反应，进而影响中药内部化学成分[1～3]。本次研究以黄连为例，分析炮制对黄连中生物碱类物质的影响。

1材料与方法

1.1仪器与试剂高效液相色谱仪，色谱工作站。可见紫外线检测器。非接触式远红外测温仪，超声提取器，电热鼓风干燥箱，电子天平，黄酒，生姜，盐酸小檗碱（分析纯）、乙腈（色谱醇等）。实验用黄连购自湖北恩施利川黄连示范基地，并按照最佳炮制方法制得净黄连。

1.2方法

1.2.1炮制本次研究参照《中国药典》2005版收录的净黄连、酒炙黄连、姜黄连、萸黄连工艺研究为主。净黄连经净选、水洗、浸润切制、干燥4个流程，其中水洗（加2倍水、洗2次，每次60 s）。润软切制：浸润6 h，切片。干燥工艺：60℃，干燥4 h，翻动2次，药材以松散为佳。采用照酒炙法（ⅡD），炒干，每100 kg黄连，用黄酒12.5 kg，药典中未明确炒炙温度与时间，本次研究试设计正交。分炒炙温度（150℃、170℃、190℃）、炒炙时间（2 min、4 min、6 min）。

1.2.2盐酸小檗碱含量测定精密测定盐酸小檗碱对照品适量，加入甲醇制得0.04 mg/mL溶液，作为对照组溶液。供试品，取粉末精密称定0.1 mg，置100 mL量瓶中，加入盐酸-甲醇（1∶100）溶液95 mL，60℃热浴15 min，取出，超声处理30 min，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液作为供试品。色谱Agilent C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：乙腈：水（磷酸盐溶液，磷酸调pH值）（28：72 v/v），波长346nm，柱温25℃，流速1 mL/min。取盐酸小檗碱对照品、供试品溶液制得0.05 mg/mL的对照品溶液，精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液6、8、10、12、14 μL进样，绘制峰面积，以其作为纵坐标，对照品溶液量为横坐标，绘制标准曲线，y=-0.1065±50.0671x，r=0.999，线性范围300～700 μg。

1.3统计学处理数据采用WPS表格登记，以SPSS18.0软件处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1时间、温度正交实验见表1，结果显示在炒炙时间6 min、170℃盐酸小檗碱水平最高，达到6.23%。方差分析显示，炒炙时间SS=1.93，MS=0.965，F=24.125，P<0.05，炒炙时间则分为0.57、0.285、7.125，P<0.01，误差SS=0.08，MS=0.04。故170℃温度下、炒炙时间6 min为最佳的炮制工艺。

3讨论

黄连中的生物碱又称黄连素，是黄连中的主要有效成分，包括黄连碱、巴马汀、表小檗碱、药根碱，现代药理研究证实黄连素具有抗菌、抗炎、降血脂、降血糖、减肥、抗焦虑、抗肿瘤、保护胃黏膜等多种药理学作用，在心脑血管病、痴呆、糖尿病、感染性疾病等疾病治疗中具有广阔的前景[4～5]。

黄连盐酸小檗碱相关研究较多，其一种氮杂环化合物，熔点145℃，可以季铵型、醛型、醇型三种形式存在，其中第一种最为稳定，不同形式化学特性存在较大的差异，但熔点均普遍在140℃以上[6]。本次研究显示，不同方法炮制黄连盐酸小襞碱含量存在显著差异，炒炙时间、温度对含量影响较显著，炮制本身可通过理化作用改变药材中成分含量。研究中，炒炙在170℃黄连中的盐酸小檗碱水平最高，高于黄连素的最低熔点，提示在此温度水平下，大部分黄连素是稳定的，在6min时间内水分等其他成分丧失的速度高于生物碱。同时研究显示服用生物碱类中药的患者治疗总有效率显著高于服用鞣质类中药的患者，说明科学的对中药材进行炮制可增强药物临床疗效，促进疾病痊愈。

当前，中药炮制方法繁多，主要包括净制、炒制、炙制、熏制、蒸制、复制等几个大方向，大方向下又有许多小方向。明清时，药物炮制、炮制技术基本成熟。近现代，随着现代医学理论与技术的引起，中药材的炮制技术也有了很大的发展。炮制的最终目的在于保留、增强或赋予药材药理特性，如生黄连盐酸小檗碱溶出率为55～60%，而经酒、姜汁、吴茱萸炮制后，溶出率可达85%，提示炮制可增加药物有效成分的溶出[8]。但需注意的是，在过去因缺乏科学实验研究证实，许多炮制技术仍存在许多缺陷，如硫磺熏蒸可能增加药物毒性。

近年来，中药材质量控制体系、药理学相关研究飞速发展，药材的炮制亟待规范化，尽管政府、科研机构做了大量的基础工作，但仍远远无法满足实际需求，中药潜在的价值仍有待挖掘。本次研究仅仅简单的分析了不同炮制方法对黄连生物碱的影响，涉及因素较简单，实际上黄连药材生物碱含量影响因素繁多，除炮制外还受产地、采摘季节、生长条件等因素影响，不同产地、成分不同黄连对炮制的需求也不尽相同。植物体内生物碱理化性质、含量、相关化学物质含量与理化性质，这些都值得深入研究，为炮制方法的选择提供依据。如本次研究中，姜汁中成分与黄连中的化学成分相互作用，姜汁提高黄连生物碱溶出程度的机制等，有待深入研究。

生物碱类型繁多，在生物系统中的存在形式也呈现多样化，不同药材质控标准、炮制目的也存在一定的差异。如生黄连苦寒，用于泻火解毒、清热燥湿，阻主治疗肠胃湿热所致腹泻、痢疾、口舌生疮等证，炮制则应避免赋予其热苏醒，炮制以水浸、润切等为主。部分药物中生物碱具有较强的毒性，如乌头，炮制可能起到一定的减毒目的，故炮制过程，可能需要增加强度，以利于乌头碱等较强毒性化学物质变性。故，医学工作者应充分利用现代化的检测条件，鉴定药材中的生物碱理化性质，同时依据质控标准，炮制目的，指导炮制技术改进，如控制温度、炮制时间，选择合适配料等，以获得更符合需求的药材。

参考文献：

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