HPV-DNA 载量检测在宫颈病变诊断及预测中的意义

张慧慧，韩丽丽,王华杰，付　莉

(吉林大学第二医院 妇产科，吉林 长春130041)



*通讯作者

HPV-DNA 载量检测在宫颈病变诊断及预测中的意义

张慧慧，韩丽丽,王华杰，付莉*

(吉林大学第二医院 妇产科，吉林 长春130041)

摘要：目的探讨检测女性生殖道感染人乳头瘤病毒DNA (HPV-DNA) 载量在宫颈病变诊断及预测中的意义。方法随机收集正常对照组120例,CINⅠ组60例,CINⅡ组60例,CINⅢ组60例、宫颈癌组60例，采用第二代杂交捕获实验(HC-Ⅱ)进行HPV-DNA检测，分析不同类型宫颈病变与HPV-DNA 载量的关系。结果正常对照组HPV-DNA阳性率为58.33%，显著低于CINⅠ组(75%) 、 CINⅡ组(90%) 、CINⅢ组 ( 91.67%) 及宫颈癌组患者(93.33%) (P<0.01)。正常对照组患者的HPV-DNA载量分级无显著的相关性(P>0.01) ，但 CINⅠ-Ⅲ组及宫颈癌组患者的病变程度与HPV-DNA载量分级均具有明显的相关性( P<0.01)；在低、中和高度载量中，各级宫颈病变的OR 值分别是CINⅠ组为1.27、2.17 和6.67，CINⅡ组为1.19、9.58 和26.04，CINⅢ组为1.19、8.50 和41.25，宫颈癌组为 0.89、6.25和67.19，结果表明CINⅠ-Ⅲ组及宫颈癌组OR 值均呈现出随着HPV-DNA载量级别增高风险增高的趋势。结论HPV-DNA病毒载量越高，发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险性就越大。提示我们要警惕高载量HPV的持续感染，预防宫颈癌前病变及宫颈癌的发生。

关键词：人乳头瘤病毒；宫颈上皮内瘤变；宫颈癌；相关性

(ChinJLabDiagn,2016,20:0786)

宫颈癌发病率居女性生殖系统恶性肿瘤之首,严重危害患者的健康与生命[1]。近年来，我国宫颈癌的发生有年轻化趋势，发病率以每年2%-3% 的速度增长，严重影响着广大女性的健康[2]。大量流行病学及病原学研究证实，HPV生殖道持续感染是宫颈上皮内瘤变 (CIN) 及宫颈癌发生的必要条件[3]。从HPV感染发展成为宫颈癌前病变，再到宫颈癌，一般至少需要10年以上的演变时间，所以，早期及时的治疗HPV感染有利于减少宫颈癌前病变及宫颈癌的发生率。有研究显示，不同等级的宫颈上皮内瘤变和病毒载量之间具有相关性，即HPV-DNA病毒载量越高，发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险就越大[4]。本研究主要探讨女性生殖道感染人乳头瘤病毒DNA( HPV-DNA) 载量与宫颈病变发生、发展的关系，为预防及早期诊断宫颈癌前病变及宫颈癌提供参考。

1资料与方法

1.1临床资料

病例来自我院2014年9月至2015年9月妇科门诊及住院患者，均进行了HPV DNA 检测及宫颈病理活检。按照宫颈病变程度分组，共5组，正常对照组120例,CINⅠ组60例,CINⅡ组 60例,CINⅢ组60例、宫颈癌组60例，其中宫颈癌组均为宫颈鳞状细胞癌，各组病例检测前均未用药物及手术治疗。

1.2样本采集

采用阴道窥器扩张阴道内壁，暴露宫颈，然后将HPV专用毛刷放置于子宫颈外口,顺时针转动5 圈刷取细胞，取出毛刷后放入含有保存液的专用瓶中，避免污染，标好患者姓名，并于24小时内送检。

1.3检测方法

采用美国 Digene 公司生产的杂交捕获 2 代(HC-Ⅱ) 基因杂交信号放大系统检测样本中HPV-DNA的含量,HC-II采用 96孔平板法,可一次检测 13种高危型 HPV(即 HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59和 68)。

1.4结果判定方法

标准HPV-DNA 检测的结果判定依据: 通过相对光单位(RLU) 与标准阳性对照(PC) 的比值来判定，RLU /PC≥1 为阳性，RLU /PC < 1 为阴性，RLU /PC 值越大病毒载量值越高。根据病毒载量值不同将HPV-DNA 阳性患者分为低度载量组、中度载量组和高度载量组3 个组，其病毒载量值分别为1.00-10.00、10.00-100.00、≥100.00，HPV-DNA 阴性为HPV-DNA阴性组，分别统计各组患者在以上4个等级中的例数并计算各自的构成比及相对危险(OR)。

1.5统计学方法

应用 SPSS 17.00 软件进行数据处理和统计分析。各组间率的比较用卡方检验，比较分析病毒载量与各级宫颈病变的关系，采用非条件多项式Logistic 回归，计算各级宫颈病变的危险度比值比(OR)。

2结果

2.1不同宫颈病变类型患者的HPV-DNA感染率

正常对照组HPV-DNA阳性率为58.33%，显著低于CINⅠ组( 75%)、CINⅡ组 (90%) CINⅢ组(91.67%) 及宫颈癌组患者(93.33%) (P<0.01) (见表1)。

表1　宫颈病变患者的HPV-DNA阳性表达

2.2不同宫颈病变患者HPV-DNA 载量与宫颈病变的关系

以正常对照组作为对照,比较分析病毒载量与各级宫颈病变的关系，计算各级宫颈病变的危险度比值比(OR)。在低、中和高度载量中，各级宫颈病变的OR 值分别是CINⅠ组为1.27、2.17 和6.67，CINⅡ组为1.19、9.58 和26.04，CINⅢ组为1.19、8.50 和41.25，宫颈癌组为 0.89、6.25和67.19，结果表明CINⅠ-Ⅲ组及宫颈癌组OR值均随着HPV-DNA 载量增高危险性增加(见表2)。结果提示宫颈暴露HPV病毒载量的增加，将加大发生宫颈病变的危险性。

表2　HPV-DNA病毒载量与宫颈病变的危险性分析(%)

3讨论

研究显示，影响宫颈病变的可能因素有很多，比如病毒感染、免疫缺陷、分娩次数、性行为及吸烟等，其中 HPV病毒的持续感染是现在公认的宫颈上皮内瘤变和宫颈癌发生的因素[5,6]。但由于妇女一生感染HPV的几率可高达80%,而且多数都只是一过性的感染,机体能自行清除，只有少数持续感染的患者才有发展成为宫颈癌的可能性，因此，仅仅只通过HPV 感染来判断宫颈癌的高风险人群存在局限性[7]。 如果能在一定的时间段(6-12个月)内重复检测 HPV，那么检出高危宫颈癌患者的准确性将大大提升[8]。但由于HPV检测的费用较高，且患者的依从性较差，在实际操作中很难实现。因此HPV-DNA载量只可作为宫颈病变严重程度及治疗效果随访的参考。

本组研究中，正常对照组中有41.67%患者的HPV呈阴性,感染病毒高度载量的患者仅占6.67%,反之，有26.27%的CINⅠ患者和41.67%的CINⅡ患者感染高度病毒载量，在CINⅢ组及宫颈癌组中,更是有高达55.00%及71.67%的患者呈高度病毒载量。可见高病毒载量的患者比低病毒载量者发生高级别上皮内瘤变及宫颈癌的风险明显升高。与阴性组相比，低、中和高度载量三组发生CINⅢ的危险性增加：[OR(95% CI):1.19(0.32-4.39)、8.50(2.76-26.15)和41.25(12.42-137.05)]，发生宫颈癌的危险性也增加[OR(95% CI):0.89(0.19-4.22)、6.25(1.76-22.26)和67.19(18.91-238.65)]，OR值均呈现出逐渐递增的趋势，差异均有统计学意义，提示当患者持续感染高载量的HPV-DNA病毒时，其患高级别上皮内瘤变及宫颈癌的风险性增高。本研究结论与国内大样本研究结果基本一致[4]。

综上所述，HPV-DNA病毒载量越高，发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险性越大。这提示我们要警惕高载量HPV的持续感染，预防宫颈癌前病变及宫颈癌的发生。

参考文献：

[1]陈莹莹,郄明蓉,万小丽,等.宫颈癌淋巴血管间隙浸润的临床病理评估[J/CD].中华妇幼临床医学杂志:电子版,2009,5(1):34.

[2]钟继兴.高危型HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的应用[J].中国医药科学，2015,5(15):144.

[3]谭训清.HPV 与CIN、宫颈癌的关系探讨[J].中国现代医学杂志，2012,22(5):107.

[4]赵方辉，胡尚英，王少明，等.高危型人乳头瘤病毒载量与子宫颈病变的关系[J].中华预防医学杂志，2009，43(7):565.

[5]Dunne EF，Unger ER，Sternberg M，et al.Prevalence of HPV infection among females in the United States[J].JAMA，2007，297(8):813.

[6]Jemal A，Bray F，Center MM，et al.Global cancers statistics[J].CA:A Cancer Journal for Clinicians，2011，61(2):69.

[7]Ho GY,Bierman R,Beardsley L,et al.Natural history of cervico-vaginal papillomavirus infection in young women[J].N Engl J Med,1998,338(7):423.

[8]Schlecht N F,Kulaga S,Robitaille J,et al.Persistent human papillomavirus infection as a predictor of cervical intraepithelial neoplasia[J].JAMA,2002,286(24):3106.

Significance of human papillomavirus DNA load detection in the diagnosis and prediction of cervical neoplasia

ZHANGHui-hui,HANLi-li,WANGHua-jie,etal.

(TheSecondHospitalofJilinUniversity,Changchun130041,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate and detect the human papillomavirus DNA (HPV-DNA) load in the cervix of the female genital tract infection,which is significant in diagnosis and prediction of cervical neoplasia.MethodsIn normal control group,120 cases were collected,60 cases in CINⅠgroup,60 cases in CINⅡ group,60 cases in CINⅢ group and 60 cases in cervical cancer group.HPV-DNA was detected by the Hybrid Capture Ⅱ(HC-Ⅱ) system,and to analysis the relationship between different types of cervical neoplasia and HPV-DNA load.ResultsThe positive rate of HPV-DNA in normal control group was 58.33%,which was significantly lower than that of CINⅠgroup (75%),CINⅡ group (90%),CINⅢ group (91.67%) and cervical cancer group (93.33%) (P<0.01).There was no significant correlation between HPV-DNA load levels in normal control group(P>0.01),but CINⅠ group,CINⅡ group,CINⅢgroup and cervical cancer were significantly correlated with HPV-DNA (P<0.01);At low,medium and high loads,the odds ratio(OR) values of different levels of cervical neoplasia were CINⅠgroup:1.27，2.17 and 6.67,CINⅡgroup:1.19、9.58 and 26.04,CINⅢgroup:1.19，8.50 and 41.25,the results showed that the OR values of CINⅠ-Ⅲ groups and cervical cancer group showed an increasing trend with the incre- ase of HPV-DNA loading level.ConclusionThe higher HPV-DNA viral load,the higher the risk of cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia may be greater,which prompted us to be wary of high load HPV persistent infection,prevention of cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer.

Key words:Human papillomavirus;Cervical intraepithelial neoplasia (CIN);Cervical cancer;relationship

文章编号：1007-4287(2016)05-0786-03

中图分类号：R737.33

文献标识码：A

(收稿日期：2015-12-17)