RGCC基因在胃癌组织中的表达及其意义

尚超，张佳星，陈秀秀，张家乐，黄宝俊

(1中国医科大学附属第一医院，沈阳 110001；2中国医科大学基础医学院)

RGCC基因在胃癌组织中的表达及其意义

尚超1，2，张佳星1，陈秀秀1，张家乐1，黄宝俊1

(1中国医科大学附属第一医院，沈阳 110001；2中国医科大学基础医学院)

目的 探讨细胞周期调节基因(RGCC基因)在胃癌发生、发展中的作用。方法 选择胃癌患者65例，取其保存完整的胃癌组织及配对癌旁组织标本，采用实时定量PCR法检测RGCC mRNA相对表达量。采用单因素方差分析RGCC表达与胃癌患者临床病理参数的关系，以胃癌组织中RGCC mRNA相对表达量的平均值为界，将患者分为高表达组和低表达组，比较两组5年生存率。结果 胃癌组织RGCC mRNA相对表达量为2.505±0.502，癌旁组织为1.068±0.107，RGCC基因在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、弥漫型生长、分化程度低、浸润程度深、存在脉管癌栓、淋巴结分期晚的患者胃癌组织RGCC mRNA表达明显升高(P<0.05或<0.01)，不同性别、年龄、癌灶大小及部位者胃癌组织RGCC mRNA表达均无统计学差异(P均>0.05)。高表达组5年生存率为31.0%，低表达组为64.2%，两组比较有统计学差异(P<0.01)。结论 RGCC基因在胃癌组织中表达升高，与肿瘤的恶性生物学行为和患者预后不良有关。

胃癌；细胞周期调节基因；恶性生物学行为；预后

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率居各类肿瘤之首。近年来，虽然以手术为主结合放化疗的综合治疗水平不断提高，但中晚期患者术后5年生存率仅为30%左右[1,2]。深入研究胃癌发生和发展的分子机制，寻找效果更佳、特异性更好的治疗靶点是胃癌相关研究的重点。细胞周期调节基因(RGCC基因)为重要的补体应答基因，在细胞增殖分化、炎症反应、肿瘤发生和转移等过程中起关键作用，参与许多疾病的发生、发展[3～5]。本研究探讨RGCC基因在胃癌发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2008～2009年于中国医科大学附属第一医院进行手术的胃癌患者65例，男33例、女32例，年龄39～74岁、中位年龄60岁。患者临床资料完整，术前均未接受放疗和化疗。本研究均获得患者的知情同意。

1.2 胃癌组织RGCC mRNA表达检测 采用实时定量PCR法。取患者保存完整的胃癌组织及配对癌旁组织(距肿瘤3 cm以上)标本，TRIzol法提取总RNA，逆转录成cDNA。以GAPDH为内参基因，按照试剂盒说明书扩增RGCC基因。RGCC引物序列：上游引物：5′-TCAACCTTCTACCAGGCCACTC-3′，下游引物：5′-GCAAGCAGGTAAACAAAGTCAG-3′，引物长度102 bp；GAPDH引物序列：上游引物：5′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3′，下游引物：5′-GGGGTCGTTGATGGCAACA-3′，引物长度95 bp。反应体系：2×Premix Ex Taq 25 μL，F/R primer(10 μmmol/L)1 μL，50×ROX Reference Dye1 1 μL，模板4 μL，加水至50 μL。反应条件：95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40个循环。每个试验重复5次。采用7500荧光定量仪和7500 Software v2.0软件计算RGCC mRNA相对表达量，以2-ΔΔCT表示。

1.3 胃癌组织RGCC mRNA表达与患者临床病理参数的关系 收集患者的临床资料，包括年龄、性别、癌灶大小、癌灶部位、Borrmann分型、生长方式、分化程度、浸润深度、脉管癌栓及淋巴结分期情况，分析上述资料与RGCC mRNA表达的关系。

1.4 胃癌组织RGCC mRNA表达与患者预后的关系 以胃癌组织RGCC mRNA相对表达量的平均值为界，将患者分为高表达组和低表达组，计算并比较两组5年生存率。

2 结果

2.1 胃癌与癌旁组织RGCC mRNA相对表达量比较 胃癌组织中RGCC mRNA相对表达量为2.505±0.502，癌旁组织为1.068±0.107，RGCC基因在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。

2.2 胃癌组织RGCC mRNA表达与患者临床病理参数的关系 Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、弥漫型生长、分化程度低、浸润程度深、存在脉管癌栓、淋巴结分期晚的患者胃癌组织中RGCC mRNA的相对表达量明显升高(P<0.05或<0.01)，患者的性别、年龄、癌灶大小及部位对胃癌组织中RGCC mRNA的相对表达量均无影响(P均>0.05)。见表1。

表1 胃癌组织RGCC mRNA表达与患者临床病理参数的关系

2.3 胃癌组织中RGCC mRNA表达与患者预后的关系 以胃癌组织中RGCC mRNA相对表达量的平均值2.505为界，高表达组39例，5年生存率为31.0%；低表达组26例，5年生存率为64.2%，低表达组生存率明显高于高表达组(P<0.01)。

3 讨论

RGCC基因是一种重要的补体应答基因，又名C13orf15、补体应答基因32(RGC32)，定位于人染色体13q14.11[6]。RGCC基因在多种组织中广泛表达，具有调控细胞周期、促进细胞增殖分化及调节免疫反应等作用[7，8]。近期研究报道，RGCC基因在多种恶性肿瘤中呈高表达，包括结直肠癌、胰腺癌等，可能参与调节肿瘤细胞的增殖和侵袭等，从而发挥癌基因的作用[9，10]。

本研究结果显示，RGCC mRNA在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织；Borrmann Ⅲ/Ⅳ型、弥漫型生长、分化程度低、浸润程度深、存在脉管癌栓、淋巴结分期晚的患者胃癌组织中RGCC mRNA表达明显升高，不同性别、年龄、癌灶大小及部位者癌组织中RGCC mRNA表达无统计学差异，说明RGCC mRNA高表达与肿瘤的恶性生物学行为有关。夏祥伟等[11]应用免疫组化方法检测RGCC蛋白在胃癌组织中的表达，亦得出RGCC在胃癌组织中高表达的结论，且其表达与胃癌分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关。付尚志等[12]在结肠癌研究中亦发现类似现象。本研究结果显示，RGCC低表达的患者生存率明显高于高表达者，说明RGCC能够作为胃癌患者预后不良的生物学标志物之一。

综上所述，RGCC基因在胃癌组织中表达升高，可促进胃癌的发生及发展，与肿瘤的恶性生物学行为和患者预后不良密切相关。RGCC基因可作为胃癌生物治疗的新靶点，但是其具体作用机制尚不清楚，仍需进一步深入研究。

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国家自然科学基金资助项目(81272716)；辽宁省社会发展攻关计划(2012225016)。

黄宝俊(E-mail： huang_bj@163.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.16.029

R735.2

B

1002-266X(2016)16-0077-03

2016-01-02)