青黛大鼠给药90天胃肠毒性研究

朱璋佩，石娅萍，闵志强



青黛大鼠给药90天胃肠毒性研究

朱璋佩，石娅萍，闵志强

[摘要]目的：考察青黛是否具有胃肠毒性。方法：大鼠按2.4、1.2、0.6 g生药/kg（约相当于临床剂量的48倍、24倍、12倍），灌胃给予青黛，每天1次，连续90天，然后停药恢复30天，观察消化道毒性反应。结果：主要毒性反应为给药期间给药组动物体重增长缓慢以及大便量增多，摄食量下降，但停药后基本恢复正常。结论：青黛可能存在一定的胃肠毒性，但具体机理未知，还需进一步试验验证。

[关键词]青黛；胃肠毒性；多次给药

[作者单位]成都中医药大学，四川 成都 611137

青黛是一味具有良好药效作用的常用中药，但随着青黛在临床上的广泛应用，一些复方青黛制剂不良反应报告有所增加[1～5]。这些不良反应主要表现为胃肠道反应，但未发现单独报道青黛胃肠不良反应的有关文献，因此以上不良反应是否为青黛造成存在疑问。本研究拟通过连续给予大鼠青黛90天，模拟青黛临床长期给药，观察青黛可能引起的临床不良反应，尤其是对消化道的影响。

1　材料和方法

1.1试药

青黛饮片，四川江油恒源药业提供，批号120301，试验时用纯化水配制成所需浓度的混悬液，每次给药前摇匀后使用。

1.2动物

SD大鼠，SPF级，48只，体重120-160 g，雌雄各半。来源：成都达硕生物科技有限公司。生产许可证号：SCXK（川）2013-24，合格证号：NO.0014599。

1.3仪器

ACS-0.6T 电子计重秤，广东省中山市金利电子衡器有限公司；德国sartorius ALC-210.4型电子天平，德国Satorius股份有限公司；日本岛津AUW120D型电子天平，XSZ-H生物显微镜，重庆光电仪器总公司；常州中威TSJ-Ⅲ电脑自动组织脱水机，常州中威电子仪器厂；常州中威BMJ-Ⅲ型包埋机，江苏省常州市中威电子仪器厂；常州中威PHY-Ⅲ病理组织漂烘仪，江苏省常州市中威电子仪器厂；徕卡RM2126轮转式切片机，上海徕卡仪器有限公司；北京永光明202-0型台式干燥箱，北京市永光明医疗仪器厂；日本奥林巴斯 BX41-32P02显微镜，日本奥林巴斯株式会社。

2　实验方法

2.1分组及给药

取SD大鼠48只，鼠龄6～8周，体重120～160 g，各性别组内每只大鼠体重不超过或低于平均体重20％，雌雄各半。分性别根据体重按随机区组法分为对照组和高、中、低剂量组，每组12只，雌雄各半。灌胃给予受试物，每日给药1次，给药周期90天，停药周期30天。高剂量按最大给药浓度给予，折算剂量2.4 g．kg-1，中、低剂量分别为1.2、0.6 g．kg-1，分别相当于24、12倍临床人用剂量。对照组同法给予等体积（20 mL．kg-1）纯化水。

2.2观察及检测指标

给药期、停药恢复期间，每天观察药物对大鼠的中枢和运动神经系统、植物神经系统、呼吸系统、心血管系统、消化系统、泌尿生殖系统、皮肤和皮毛、眼等的影响。每周用电子单重秤称体重1次，测定摄食量1次。给药结束和恢复期结束后次晨，每组分别取6大鼠（雌雄各半），麻醉后放血处死，进行全面细致的系统尸解。同时，用电子天平称取脏器重量，并计算脏器指数。对高剂量组及空白组的消化系统标本石蜡包埋切片, HE染色，在光学显微镜下进行观察。

2.3统计学分析

采用SPSS19.0软件进行数据分析，计量资料计算平均数、标准差，判断数据是否正态性，若为正态分布则采用独立参数t检验进行统计，否则采用非参数检验进行统计。

3　实验结果

3.1一般情况观察

给药2天后，高、中、低剂量组大鼠排便量均较对照组多，高剂量组个别动物出现稀便，颜色呈青黛药色，给药10天后大便质软但成形，中、低剂量组给药期间大便形状一直正常，但颜色较深；停药3天后，各组动物大便形状及排量恢复正常，其余未发现任何异常情况。

3.2体重变化

给药7日后，与对照组比较，给药组大鼠体重有统计学意义下降（p＜0.05 、p＜0.01），此后逐渐恢复，除中剂量组雄性动物给药35天后，其余各组动物在给药14天后体重与对照组比较开始无统计学差异(p＞0.05)，但高、中剂量组大鼠体重均数在给药期间一直小于对照组动物，停药后逐渐恢复与对照组基本一致，低剂量组动物体重受影响相对较小。结果表明药物对动物体重增长有一定影响，特别是高、中剂量。大鼠体重变化结果参见图1～3。

1　体重变化图(♀♂合计)

图2　体重变化图(♀)

图3　体重变化图(♂)

3.3摄食量

各组动物给药后，摄食量均较给药前有下降，其中高剂量组下降程度最大，整个给药期间摄食量均小于对照组，但停药后逐渐恢复到对照组水平，而中、低剂量组在整个试验期间摄食量数量及变化趋势与对照组基本相同，说明此两组动物摄食量未明显收到药物影响。见图4～6。

图4　摄食量变化图(♀♂合计)

图5　摄食量变化图(♀)

图6　摄食量变化图(♂)

3.4系统尸解及脏器指数检查结果

3.4.1系统尸解结果 体表检查：对照组与给药组大鼠外观健康, 被毛光泽、无脱毛，皮肤粘膜无出血点、溃疡及色斑，乳腺及外生殖器官无异常可见, 各天然孔无异常分泌物。

胸腹壁皮下组织:对照组与给药组大鼠动物胸腹壁皮下组织未见出血和感染现象。

腹腔及盆腔检查: 对照组与给药组大鼠腹腔内无积液、血液和渗出物, 各脏器位置正常, 肝、脾、胃、胰、大网膜、膀胱、腹膜等的形状、位置、质地等无异常可见。肠道无出血点和肠道未见寄生虫。雄性生殖器和雌性生殖器未见肿瘤、畸形或其他异常。

胸腔检查: 对照组与给药组大鼠胸腔无积液、出血及渗出物, 心、肺等脏器位置、大小、形状、色泽、质地均正常。

颅内检查：对照组与给药组大鼠颅腔无积液及出血，脑未见水肿、脓肿、血肿和萎缩等异常情况。

3.4.2脏器指数 青黛大鼠长毒灌胃给药90天及停药30天期间，各脏器指数检查，各给药组与对照组比较未见异常(p＞0.05)。

3.5病理组织学检查

组织病理学检查综合肉眼与镜下所见，大鼠给药期与恢复期，高剂量组与对照组相比，组织形态无明显差异，消化道器官（食道、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、颌下腺、腮腺、胰腺、肝）均未出现与受试物明显有关的组织器质性损害的病理改变，得出结论：在试验剂量条件下的给药期和恢复期，青黛对大鼠无病理损害。

4　讨论及结论

针对青黛在临床上暴露出的一系列胃肠道毒性反应特征，本次通过90天的长期给药毒性试验，模拟病人长期服药，结合动物试验期间的摄食量、体重检查以及消化器官病理检查等指标，判断动物消化功能及胃肠道器官是否受到损伤。试验结果证明青黛对胃肠道功能有一定影响，多次给药试验也发现2.4和1.2 g．kg-1剂量对大鼠体重及摄食量均有影响，促进排便。

临床使用青黛存在两种情况，一种为短期使用，主要治疗一些细菌或病毒感染类疾病，而治疗银屑病等皮肤病时，需要病人长期服用。前期在单次给药毒性试验发现1 g．kg-1青黛（相当于临床剂量20倍），可促进小鼠的肠推进及排便功能，其余数据也表明在1 g．kg-1剂量以下，也可能存在胃肠道毒性反应。结合两次结果，初步证实青黛有一定胃肠道毒性，主要表现为影响体重、摄食和排便，较轻微，并未发现病理性损伤，同时停药后即可恢复，提示临床使用中需重点监测的指标，胃肠虚弱或有胃肠道病变的人群应避免使用。

综上，大鼠按2.4、1.2、0.6 g生药/kg（约相当于临床剂量的48倍、24倍、12倍），灌胃给予青黛，每天1次，连续90天，然后停药恢复30天，结果发现主要毒性反应为给药期间给药组动物体重增长缓慢以及大便量增多，摄食量下降，但停药后基本恢复正常。结果表明青黛可能存在一定的胃肠毒性，但具体机理未知，还需进一步试验验证。

[参考文献]

[1]李国良,梁洪彦.复方青黛丸致便血2例[J].中国农村医学, 1996, 21(8):49.

[2]张良胜.复方青黛丸引起肠道出血1例[J].皮肤病与性病,1994, 16(1):59.

[3]范慧英,杜玉兰,栾红.复方青黛丸致胃出血3例[J].中华皮肤科杂志, 1995,28(5):328.

[4]李思明,王道田,吴彩云.口服复方青黛丸致消化道出血9例[J].中国皮肤性病学杂志,2003,17(1):55.

[5]陈子钦,毛碧芳.复方青黛丸引起黏液血便[J].海峡药学, 1995,7(4):51.

[6]袁伯俊,廖明阳,李波.药物毒理学实验方法与技术[M].化学工业出版社,2011:212.

（责任编辑：陈思敏）

·临床中药·

Study on gastrointestinal toxicity in rats after administration of indigo naturalis for 90 days

ZHU Zhang-pei, SHI Yaping, MIN Zhi-qiang
(Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan)

[Abstract]Objective: To investigate the gastrointestinal toxicity ofindigo naturalis in rat.Method: The rats were intragastric administered of indigo naturalis 2.4, 1.2, 0.6 g．kg(-1)(equivalent to clinical dose 48 times,24 times, 12 times) for 90 days, 1 time a day.The gastrointestinal toxicity was observed at 30 days after drug withdrawal.Result: The main toxicity manifested as slowed weight growth, increased stool and decrease food intake which returned to normal after drug withdrawal.Conclusion: Indigo naturalis may have certain gastrointestinal toxicity, but the mechanism remains unknown which need further experimental verification.

[Key words]Indigo naturalis; gastrointestinal toxicity,; multiple administration

[收稿日期]2015-03-10

[通讯作者]闵志强（1979-），男，讲师，主要从事中药药性理论与临床应用研究Tel:13880641950 Email:minzq@qq.com

[作者简介]朱璋佩（1994-），女，在读本科生，主要从事中药药性理论与临床应用研究Tel:18982260169 Email:2521334588@qq.com

[基金项目]成都中医药大学校基金项目(编号ZRMS201333)

[中图分类号]R 285.5

[文献标识码]A

[文章编号]1674-926X(2016)01-014-03