性病门诊患者HPV感染情况及其亚型分析(附733例报告)

刘义刚，李晓莹，路麒,郭亚南，任勇

(山东大学附属省立医院，济南250021)



性病门诊患者HPV感染情况及其亚型分析(附733例报告)

刘义刚，李晓莹，路麒,郭亚南，任勇

(山东大学附属省立医院，济南250021)

摘要：目的了解性病门诊患者人乳头瘤病毒(HPV)感染情况和病毒亚型分布。方法采用PCR法检测733例性病门诊患者HPV 基因及其亚型。 结果733例性病门诊患者HPV阳性检出率36.15%，男、女检出率分别为27.20%、46.73%，P<0.05。其中，HPV感染高危型71.69%、低危型55.09%；高危型单一感染构成比52.41%，其中HPV52、58、16分别占10.16%、9.63%、9.36%，混合感染构成比为28.31%；HPV阳性构成比20～29岁者47.06%、≥60岁者0.80%。结论性病门诊患者中HPV阳性检出率较高，且女性检出率高于男性；高危型以单一型感染居多，以HPV52、58、16为主；20～29岁HPV阳性构成比最高、≥60岁者低。

关键词：人乳头瘤病毒；基因亚型；性病门诊

人乳头瘤病毒 (HPV)是一种高度亲嗜人体皮肤及黏膜的小分子双链 DNA 病毒 ，人类是 HPV的惟一宿主，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。目前已鉴定出200多种亚型，能感染人类生殖道的有40多个，HPV感染是最普遍的性传播疾病之一。本研究观察了733例性病门诊患者HPV感染情况及其亚型分布，为其防治及流行病学研究提供依据。

1资料与方法

1.1临床资料选择2013年10月～2015年5月山东大学附属省立医院性病门诊就诊的性病患者和咨询自愿者733例 ，男397例、女336例，年龄4～67岁。

1.2HPV检测方法男女分别取尿道、宫颈分泌物，外生殖器有赘生物者另在赘生物表面稍用力刮拭取材；放入装有2 mL细胞保存液的保存管中，-20 ℃保存待测。选择DA7600核酸扩增分析仪 DNA 提取试剂、HPV 扩增试剂、HPV核酸测定试剂盒(荧光PCR法)，可检测HPV亚型15种，包括 13 种高危亚型 (16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型)、2种低危亚型 (6、11型)。标本试管中加入1 mL无菌生理盐水，吸取液体转移到1.5 mL离心管中，13 000 r/min 离心 5 min；沉淀加无菌生理盐水1 mL混匀，13 000 r/min 离心 5 min，重复洗涤1次；沉淀直接加入50 μL核酸提取液充分混匀，99 ℃干浴或水浴10 min；13 000 r/min 离心 5 min，取上清41 μL作为PCR反应模板。取混合液36 μL置于PCR反应管中，然后将标本、阳性对照品、水(阴性对照)的处理上清液各4 μL分别加入薄壁PCR反应管中，反应体系40 μL。37 ℃ 2 min；94 ℃ 2 min；再按93 ℃ 15 s、60 ℃ 60 s，循环40次。结果判定：仪器Ct栏显示UNDET或40表示检测样本低于检测限，判为阴性；检测样本Ct值≤38，且扩增曲线呈典型S形，判为阳性。检测样本Ct值在38～40，需重复测定，如仍在38～40，且扩增曲线呈典型的S形，则判为阳性；若非典型S形曲线，则判为阴性。

1.3统计学方法采用SPSS13.0统计软件。计数资料采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1HPV检出率733例患者中共检出 HPV 阳性265例，检出率为36.15%；其中男性27.20%、女性46.73%，女性 HPV 阳性检出率明显高于男性(χ2=260.81，P<0.05)。

2.2HPV感染亚型分布265例HPV感染者基因型分布见表1。不同性别HPV感染者单一及多重感染构成情况见表2。不同年龄人群HPV阳性率及阳性构成比见表3。

3讨论

HPV是具有鳞状上皮细胞亲嗜性的闭合环状DNA病毒，根据其致病力或致癌危险性不同可分为低危型和高危型。低危型是引起尖锐湿疣的主要病原体[1]，如HPV6、11、42、43、44、81等；高危型常引起宫颈上皮内瘤样病变及浸润性宫颈癌，如HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68 等。研究证实，HPV 感染与宫颈癌及其癌前病变密切相关。高危型HPV持续感染可整合到宿主黏膜的上皮基因中，使病毒的致癌基因 E6/E7 在宫颈上皮组织中过量表达，并与宿主基因组的抑癌基因pRb、p53结合，使其降解、失活，失去对细胞生长周期的调控，导致细胞无限增殖甚至恶性转化，最终导致宫颈癌[2，3]。HPV感染后最初以亚临床感染为主，导致人群中存在大量无症状病毒携带者，增加了人群感染的危险性。因此，对本地区门诊高危患者进行 HPV 分型检测，了解高危人群感染HPV的流行病学特点，对疾病的防治具有重要意义。

表1　265例HPV感染者基因型分布[例(%)]

表2　不同性别HPV感染者单一及多重感染

表3　不同年龄人群HPV阳性率及阳性构成比(%)

本组患者HPV阳性率为36.15%，高于张志勇等[4]报道的28.82%、刘静等[5]报道的29.67%，低于聂双双等[6]报道的36.94%、李嘉彦等[7]报道的40.26%。其中，女性 HPV 阳性检出率明显高于男性，与李嘉彦等[7]的报道不同。其原因可能与种族、地域及主动来医院就诊的疑似HPV 感染者及检测技术等差异有关。本研究显示，HPV高危亚型前3位是 HPV52、58、16，且存在性别差异，可能是由个人卫生情况及性行为、人体生理解剖结构等造成。流行病学资料显示，HPV亚型分布有明显地域差异[8]。本研究女性高危亚型前3位是HPV58、52、16型，不同于其他报道[9～14]，进一步提示HPV亚型分布存在明显地域差异。本研究显示，HPV感染构成比中，高危型感染以单一感染为主；且无论高危型单一、多重感染，还是低危型混合感染，女性高于男性。有文献[15]显示，女性HPV高危型单一感染可使宫颈癌患病风险增加 19.9倍， 而混合感染可增加31.8倍。因此，应更加重视多重高危及混合型感染。

本研究显示，<20岁者HPV感染率最高，可能与此年龄段性活跃度高、个人卫生习惯及健康意识缺乏、免疫系统还未被致敏等有关；≥60岁者HPV感染率相对较高,可能是自身免疫力下降所致；20～29岁者构成比最高、≥60岁者最低，是由于20～29岁者性生活活跃而健康意识缺乏，导致门诊就诊数最高，HPV感染者基数大，≥60岁者门诊就诊数少。因此，需普及年轻人群对于HPV感染的基本认识，指导其建立良好的个人卫生习惯和健康性生活，同时加强高危老年人群HPV的筛查。

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(收稿日期：2015-10-23)

中图分类号：R711.7

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)10-0084-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.038

通信作者：任勇(E-mail: heirenyong@163.com)

基金项目：山东省科技发展计划项目(2013GSF11872)。