清胰Ⅱ号对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的保护作用及机制探讨

赵建锋，兑丹华，代静静，杜杰，周淼，敖宇

(遵义医学院附属医院，贵州遵义563003)



清胰Ⅱ号对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的保护作用及机制探讨

赵建锋，兑丹华，代静静，杜杰，周淼，敖宇

(遵义医学院附属医院，贵州遵义563003)

摘要：目的观察清胰Ⅱ号对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺的保护作用，并探讨其机制。方法 将56只SD大鼠随机分为3组，A、B组各24只采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型，C组8只开腹后仅翻动肠管。A组造模清醒后予以清胰Ⅱ号灌胃1次/6 h，共4次。造模后6、12、24 h，采用ELISA法检测血清高迁移率族蛋白1(HMGB1),光镜观察胰腺组织并行病理评分。结果B组各时点血清HMGB1较C组升高(P均<0.01)，胰腺病理评分增加(P均<0.01)。A组与B组同时点相比，血清HMGB1下降(P均<0.05)，胰腺病理评分降低(P均<0.05)。结论 中药制剂清胰Ⅱ号能够降低血清HMGB1水平，从而降低胰腺组织损伤。

关键词：重症急性胰腺炎；胰腺损伤；中药疗法；清胰Ⅱ号；高迁移率蛋白1；白细胞介素

急性胰腺炎是临床上常见的急腹症，20%～30%发展为重症急性胰腺炎(SAP)[1]。SAP病情凶险，常伴有全身炎症反应综合征(SIRS)及全身多器官功能不全(MODS)。最近研究发现，高迁移率族蛋白1(HMGB1)作为一种重要的晚期炎性因子，参与了SAP的病理生理过程[2～4]。清胰Ⅱ号为我院自制治疗SAP的复方制剂，临床效果较好，但机制尚不清楚。2014年10月～2015年3月，我们观察了清胰Ⅱ号对SAP大鼠胰腺的保护作用，并探讨其机制。

1材料与方法

1.1材料SD大鼠56只，雌雄不限，鼠龄8～10周，体质量200～250 g，由重庆第三军医大学提供；大鼠IL-1、IL-10、HMGB1检测ELISA试剂盒(康宝生物有限公司)，牛磺胆酸钠(美国Sigma公司)，清胰Ⅱ号汤剂(遵义医学院附属医院)，-80 ℃低温冰箱(德国Forma Scientic公司)。

1.2方法

1.2.1动物分组与造模处理将56只大鼠随机分为3组，A、B组各24只采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型，C组8只开腹后仅翻动肠管。A组于造模清醒后予以清胰Ⅱ号10 mL/kg灌胃，1次/6 h，共4次。

1.2.2标本采集与检测方法原腹部切口入腹，用促凝管经下腔静脉取血3～5 mL，以3 000 r/min离心15 min。采用ELISA双抗体法检测血清HMGB1；取部分胰腺组织，4%甲醛液固定，石蜡包埋，4 μm切片；HE染色，行病理学检查，参考文献[5]方法进行胰腺病理评分。

2结果

各组大鼠血清HMGB1及胰腺病理评分比较，详见表1。

表1　各组大鼠血清HMGB1及胰腺病理评分比较±s)

注：与C组比较，aP<0.01；与B组同时点比较，bP<0.05，cP<0.01；与同组相邻时点比较，dP<0.05。

3讨论

SAP早期由于各种因素引起胰腺腺泡细胞损伤，激活胰酶，引起炎性细胞的活化及浸润，释放大量促炎因子，如TNF-α、IL-1、IL-10、HMGB1等[6~8]。这些细胞因子造成机体的高炎症反应状态，发生全身炎症反应综合征进而造成多器官功能障[9]。因HMGB1的产生明显晚于TNF-α、IL-1等早期炎性因子, 且持续时间较长, 故被称为晚期炎症因子[10]。本研究显示，B组血清HMGB1水平明显高于C组，12 h升高达到C组3.8倍，24 h仍然维持在4.5倍以上。与Messmer等[11]的研究基本相符。有研究发现，SAP患者血清HMGB1水平升高，且与疾病严重程度一致[12]，采用抗体中和HMGB1可以改善胰腺炎的病情发展和相关的脏器损害[13]，推测HMGB1是在SAP的炎症反应及脏器功能障碍过程中发挥主要作用的炎性因子。

清胰Ⅱ号由栀子、丹皮、木香、厚朴、元胡、赤芍、大黄、芒硝组成，具有通里攻下、活血化瘀、清热解毒之功效，是治疗急性胰腺炎的特效中药制剂。研究发现，清胰Ⅱ号能够保护胰腺细胞，减轻内毒素血症，抑制促炎细胞因子释放，改善肾脏和胰腺病理损害的作用[14，15]。本研究结果显示，A组与B组同时点相比，血清HMGB1下降，胰腺病理评分降低。证明中药制剂清胰Ⅱ号能够降低血清HMGB1水平，从而降低胰腺组织损伤，改善SAP病情。

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(收稿日期：2015-10-21)

中图分类号：R576

文献标志码：A

文章编号：1002-266X(2016)10-0025-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.009

通信作者：兑丹华(E-mail： 2361169015@qq.com)

基金项目：贵州省科学技术基金项目(黔科合J字2008-2200号)；遵义市红花岗区科技局项目(fcz120131222)。