人乳头瘤病毒基因分型检测联合液基薄层细胞学检查的临床应用

郑景孟+庄慧杰

[摘要]目的研究并探讨人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测联合液基薄层细胞学检测（TCT）在宫颈癌筛查中的应用价值。方法于2015年5月～2016年6月，选取120例疑似宫颈癌患者作为此次研究的对象，所有患者均接受HPV检测、TCT检查，以病理诊断结果作为金标准，计算HPV、TCT以及HPV+TCT对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性。根据宫颈病变程度进行分组，将患者分为CIN Ⅰ级、CINⅡ级、CINⅢ级、宫颈癌，观察不同宫颈病变程度的HPV病毒载量，并计算宫颈病变程度与HPV病毒载量之间的相关性。结果HPV的敏感性明显高于TCT（P<0.05），TCT的特异性明显高于HPV（P<0.05），两种检测方法的准确性相当（P>0.05）；HPV+TCT的诊断准确性为95.83%，较HPV、TCT更高（P<0.05）。宫颈病变程度与HPV病毒载量密切相关（P<0.05），且呈正相关。结论在宫颈癌的筛查中，HPV与TCT联合诊断的准确性高，可减少漏诊、误诊。

[关键词]宫颈癌；人乳头瘤病毒；液基薄层细胞学；诊断

宫颈癌属于临床常见妇科癌症，是最为常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率呈现出增高趋势，且发病年龄出现年轻化趋势，对患者的生育功能和生命安全构成了严重的威胁。早期筛查和诊断是确保宫颈癌患者得到及时有效治疗的关键，目前，临床上多采取液基薄层细胞学技术对宫颈癌进行筛查，而忽视了人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈癌中的重要性，导致诊断准确性不高，容易出现漏诊，延误患者的治疗时机。本次研究为了探讨宫颈癌筛查中人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测及液基薄层细胞学（TCT）检查的应用意义，特于2015年5月～2016年6月选取120例疑似宫颈癌患者进行HPV、TCT检查，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

于2015年5月～2016年6月，选取120例疑似宫颈癌患者作为此次研究的对象，所有患者均符合此次研究的纳入标准：（1）出现阴道不规则出血、腰部坠痛、接触性出血等症状；（2）存在宫颈癌病变的高危风险；（3）性生活史达到3年或早婚早育，部分患者具有多个性伴侣；（4）存在慢性宫颈病变、宫颈癌的家族史；（5）检查时处于月经干净阶段，且近2d内无性生活；（6）白带无异常。120例患者中，最小年龄患者为23岁，最大年龄患者为69岁，年龄均值为（45.17±15.62）岁，其中69例患者具有妊娠史，64例患者具有分娩史。所有患者在接受筛查前均对研究方法进行了了解，均自愿参与此次研究。

1.2方法

所有患者均接受HPV检测、TCT检查，检查前2d内禁止性生活，禁止阴道冲洗、用药。

HPV检测：采用棉签将宫颈分泌物擦去，采用专门的HPV高危8型采样棉签置于宫颈口，1min后，将采样棉签置入专门的试管中，于4℃环境下保存，在1～2d内进行检测，采用反向点杂交法进行检测，试剂盒为广州安必平医药科技有限公司生产的HPV基因分型检测试剂盒，严格按照试剂盒说明书进行操作，HPV病毒载量达到1000 copies/mL，即可判断为阳性，反之则为阴性。

TCT检测：采用专门的TCT细胞采集刷置于宫颈管内，顺时针旋转5～6周后，将细胞采集刷置入专门的小瓶中，于4℃环境下保存，在规定时间内送检；将样本进行低速离心处理，制成均匀的单层细胞薄片，采用液基薄层细胞检测试剂盒对样本进行检测。

病理活检：采用阴道镜在患者宫颈病变部位进行多点取样，将采集的宫颈组织进行处理，甲醛固定，石蜡包埋，再进行免疫组化检测。

1.3观察指标

以病理活检诊断结果作为金标准，计算HPV、TCT以及HPV+TCT对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性，并对两组诊断结果进行比较，敏感性=真阳性/（真阳性+假阴性），特异性=真阴性/（真阴性+假阳性），准确性=（真阳性+真阴性）/总例数。根据宫颈病变程度进行分组，将患者分为上皮内瘤变（CIN Ⅰ级、CINⅡ级、CINⅢ级）、宫颈癌，观察不同宫颈病变程度的HPV病毒载量，并计算宫颈病变程度与HPV病毒载量之间的相关性。

1.4统计学方法

所有研究数据均录入至SPSS17.0软件中进行处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用x²检验，P<0.05为差异有统计学意义；将各变量录入至corr程序中，计算其相关性系数（r），以P<0.05表示变量之间存在相关性，r为正数即正相关，反之则为负相关。

2结果

2.1两种检测方法的诊断结果比较

HPV对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性分别为96.00%（72/75）、73.33%（33/45）、87.50%（105/120），TCT对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性分别为84.00%（63/75）、91.1 1%（41/45）、86.67%（104/120），两组比较，HPV的敏感性明显高于TCT（P<0.05），但TCT的特异性明显高于HPV（P<0.05），两种检测方法的准确性相当（P>0.05）。HPV+TCT的诊断敏感性、特异性、准确性分别为96.00%（72/75）、95.56%（43/45）、95.83%（115/120），其准确性较HPV、TCT更高（P<0.05）。见表1。

2.2不同宫颈病变程度HPV病毒载量比较及其与HPV病毒载量之间的相关性分析

宫颈癌患者有75例，宫颈上皮内瘤变患者有45例，其中CIN Ⅰ级13例、CINⅡ级15例、CINⅢ级17例。宫颈病变程度与HPV病毒载量密切相关（P<0.05），且呈正相关，r=0.0685。见表2。

3讨论

宫颈癌是一种常见的女性生殖系统恶性肿瘤，发病率较高，且其发病率出现增高趋势，危害了广大妇女的身体健康，还对患者的生命安全构成严重的威胁。宫颈癌的发病机制尚未完全明确，但临床上普遍认为，宫颈癌的发生与宫颈高危型HPV感染有关，宫颈高危型HPV感染是导致宫颈发生癌变的重要因素，当HPV病毒入侵机体，导致宫颈鳞状上皮细胞发生感染，长期发展往往会发展为宫颈癌，如患者未能得到及时的治疗，很可能会导致死亡的发生，因此，临床上有必要对宫颈癌进行早期筛查，以尽早发现宫颈癌病变或宫颈HPV感染。

目前，临床上诊断宫颈癌最常用的方法为宫颈脱落细胞学检查，随着细胞学诊断技术的不断发展，液基薄层细胞制片术逐渐取代宫颈脱落细胞学检查，这种检测方法主要是通过对宫颈细胞是否存在异型性，从而作出诊断，但其诊断结果往往会受到医师的主观经验及取材部位的影响，容易出现漏诊。本次研究中的TCT对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性分别为84.00%、91.11%、86.67%，出现12例漏诊患者，说明TCT检查尽管诊断特异性较高，但仍然存在着一定的局限性。由于HPV感染是导致宫颈癌变的重要前提和基础，故临床上可通过对HPV病毒进行检测，从而对宫颈癌进行判断，本次研究中，HPV对宫颈癌的诊断敏感性、特异性、准确性分别为96.00%、73.33%、87.50%，出现12例误诊，说明HPV检测尽管可有效检出宫颈癌，但也容易将宫颈良性病变误诊为宫颈癌，造成患者不必要的手术切除。而两种检测方法进行比较后发现，HPV的敏感性明显高于TCT（P<0.05），但TCT的特异性明显高于HPV（P<0.05），两种检测方法的准确性相当（P>0.05），这提示我们在临床诊断宫颈癌时，应综合HPV检测、TCT检查的结果，避免诊断误差。而对两种方法联合诊断的准确性进行计算后发现，HPV+TCT的准确性95.83%，其准确性较HPV、TCT更高（P<0.05），漏诊3例，误诊2例，证实了HPV检测与TCT检测联合应用对宫颈癌的诊断准确性。

本次研究还对不同宫颈病变程度的HPV病毒载量进行了比较，比较结果显示，不同宫颈病变程度的HPV病毒载量不同，宫颈病变程度与HPV病毒载量密切相关（P<0.05），且呈正相关，说明HPV病毒参与到了宫颈病变的发生发展过程中。

综上所述，在宫颈癌的筛查中，HPV具有高敏感性，TCT具有高特异性，两种检查方法可联合应用，还可将HPV病毒载量作为宫颈癌的肿瘤标志物，以减少漏诊、误诊。