地塞米松对大鼠自发性蛛网膜下腔出血所致脑积水的影响①

杨福义，赵梓涵，高　涵

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)



地塞米松对大鼠自发性蛛网膜下腔出血所致脑积水的影响①

杨福义，赵梓涵，高涵

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)

摘要:目的: 对大鼠脑部枕大池重复注血将大鼠制成蛛网膜下腔出血的模型,并对大鼠模型进行地塞米松进行治疗，不同时间检测软脑膜纤维化程度，探讨地塞米松对大鼠模型所致脑积水的影响。方法:选取雄性Wistar大鼠24只，进行随机分配，分成两组每组12只(安慰剂对照组、地塞米松给药组)，并将其制成SAH(蛛网膜下腔出血)模型，注血时间间隔72h，边建模边同时给药，对照组用药为0.9%Nacl腹腔注射；地塞米松组用药量按大鼠体重100mg/1.5mg腹腔给药。制模后3d、7d及21d时每组随机选取4只大鼠进行处死。通过干、湿重法测定脑组织含水量及标本中软脑膜平均纤维厚度。结果:①脑组织含水量数据显示地米给药组明显小于对照组，且(P<0.05)具有统计学意义；②软脑膜纤维标本厚度数据显示对照组大于给药组，且(P<0.05)具有统计学意义。③SAH中脑组织含水量与软脑膜厚度呈现正相关性。结论：通过对大鼠模型应用地塞米松治疗蛛网膜下腔出血，结果显示地塞米松可能在其脑积水的形成及发展过程中起到抑制作用，本实验可能会对临床用药提供实验理论依据。

关键词:自发性蛛网膜下腔出血；地塞米松；软脑膜；脑积水

脑部血管由于某种因素导致血管破裂，管内血液外溢并充满蛛网膜下腔称之脑蛛网膜下腔出血(SAH，Subarachnoid hemorrhage)。其在临床上可分两类：创伤性、自发性，自发性又可分为原发和继发性。原发性蛛网膜下腔出血机理为脑底或脑部表面的血管由于各种因素破裂，破裂后血液溢出流入蛛网膜下腔；继发性蛛网膜下腔出血为脑内实质出血后血液穿过脑组织而流入蛛网膜下腔。在蛛网膜下腔出血后下腔或脑室的病理性扩张的出现可能导致积水，积水后压力增高脑实质相对应减少等特征的病变，是脑部动脉瘤破裂后常见并发症之一, 对患者的恢复及其预后可产生严重影响[1]。脑积水从梗阻部位可分：交通脑性、阻塞脑性积水；从发病时间可分：慢性、亚急性、急性脑积水；按颅内增高可分：正常压力、高压力性脑积水；还有特殊类型如在额部蛛网膜下腔出现积液的脑积水[2]。本实验拟通过建立蛛网膜下腔出血动物模型，应用地塞米松进行干预，在不同时间点检测SAH两组模型中脑组织含水量及蛛网膜厚度，探讨地塞米松在SAH脑积水发生发展中起到的作用，希望能为临床用药提供实验数据及依据。

1材料与方法

1.1分组与动物模型制备

首先购买Wistar雄性大鼠30只，在其中随机选取24只(体重260~310g)，随机分为安慰剂对照组、地塞米松给药组，每组12只。按大鼠体重给予3%戊巴比妥钠(45 mg/kg)腹腔注射麻醉，在无菌条件下行单侧股动脉埋针备用，切开环枕筋膜，穿刺针穿刺后每只大鼠头低位枕大池内注射股动脉学0.15mL制备SAH模型，同时以100mg体重1.5mg量腹腔注射地塞米松及0.9%Nacl，72h后重复以上步骤，完成模型制备。

1.2采集标本并保存

分别在各时间点(3d、7d、21d)将两组内大鼠随机处死4只。对心脏灌注，开颅取脑(去除嗅球及脑干)，在显微镜下进行蛛网膜剥离, 保存所得标本以备下一步检测使用。

1.3检测方法及主要观察指标

1.3．1测定脑组织含水量

脑组织含水量按照干、湿重量法，组织含水量百分公式为：

具体方法在大鼠脑中线处切开，取一半标本放入红外线干燥箱内缓慢烘干至恒重,称取干重,用可精确到万分之一额电子天平进行称量干重、湿重。

1.3．2测定软脑膜纤维厚度

首先制备软脑膜石蜡切片：将脑组织另一半标本经脱水、透明固定后，制备石蜡切块，5μm连续切片并烘干。然后利用Masson染色可将胶纤维染成蓝色、肌纤维染成红色的原理对切片进行染色，置于镜下拍片，然后用图像分析系统对软脑膜纤维平均厚度进行测定 。

1.4统计学方法

2结果

2.1地塞米松在SAH后两组间脑组织含水量的表达

见表1。用干湿重测量法对SAH后3d、7d、21d时两组标本脑组织含水量进行测量，结果安慰剂照组与地塞米松组之间脑组织含水量比较，结果(P<0.05)认为有统计学意义。脑组织含水量公式[(WW-DW)/WW]×100%,(WW)为平测湿重，(DW)为烘干至恒干重。

表1　SAH后不同时间两组大鼠脑组织

2.221d时两组大鼠软脑膜纤维平均厚度检测

见表2。地塞米松组软脑膜平均厚度明显低于安慰剂组,经统计学分析，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2　SAH后两组大鼠软脑膜纤维平均

地塞米松组与安慰剂组相比，★P<0.05。

2.3SAH后脑组织含水量与软脑膜厚度相关性

应用Spearman统计分析地塞米松腹腔给药组，第21天时脑组织含水量和软脑膜纤维平均厚度，相关系数r=0.639。说明脑积水与软脑膜厚度可能在SAH中的表达呈正相关。

3讨论

脑部血管由于某种因素导致血管破裂，管内血液外溢并充满蛛网膜下腔称之脑蛛网膜下腔出血(SAH，Subarachnoid hemorrhage)。其在临床上可分创伤性和自发性两类，其中自发性又可分为原发和继发性[3]。一般情况下我们所谓的SAH大多数指额是原发性SAH，据文献统计显示其在急性脑血管病中约占15%，急性脑卒中约10%[4]。在临床上部分实验显示影响SAH预后的主要因素有脑部积水、血管痉挛、颅高压等[5]。脑血管痉挛(Cerebral vasospasm,Cvs)、颅内压升高等因素不但可导致SAH,还可继发造成脑部血液流降低，继而在缺血缺氧，使多种途径激活后导致脑水肿和神经元损伤[6]。

地塞米松是一种肾上腺皮质激素类药，其抗炎及免疫抑制作用广泛，还可通过因抑制炎症反应而抑制了炎症引起的纤维化作用。所以地塞米松对炎症具有减轻和防止组织纤维化的作用，机理为地塞米松能通过抑制胶原蛋白合成并促进分解来抑制结缔组织增生，降低细胞壁和血管壁的通透性使炎性渗出降低。其目前在中枢系统中作为具有抗纤维化作用药的应用与文献研究较少。国内可查到的相关文献如杜臻雁,唐福林等研究说明地塞米松对SAH后机体的炎性反应可起到抑制作用，而且程度高低与药物浓度相关[7]；谷志龙,杨福义等也有相反的糖皮质激素对已经形成的纤维化作用不明显的文献[8]。SAH发生后给予早期鞘内地米进行治疗来防治脑积水的研究国内外一直备受关注，目前通过观察糖皮质激素对颅脑损伤的治疗作用的实验结果与数据，大致上有了较肯定的结果。如vachon等人发现SAH后低剂量地米治疗能减轻创伤后脑水肿[9]。段国升、王锐等发现在治疗继发性颅脑损伤时SAH组与对照组相比，给予大剂量地米组的疗效比给予促肾上腺皮质激素组治疗效果好[10]。

本实验在SAH模型下，同时观察了软脑膜纤维平均厚度及脑组织含水量，在地塞米松腹腔给药组、安慰剂生理盐水腹腔组中的表达情况，发现①脑组织含水量中给药组明显低于对照组，并且(P<0.05)差异有统计学意义；②软脑膜纤维标本厚度对照组高于给药组且(P<0.05)差异有统计学意义。③SAH中脑组织含水量与软脑膜厚度呈现正相关性，但本实验例数较少不能完全肯定其在其它类似实验中一定呈正相关。总体表明在蛛网膜下腔出血时应用地塞米松治疗，结果显示地塞米松可能抑制脑积水的形成及发展过程，以及可能对预后有所影响，希望本实验可对临床用药提供理论依据。

参考文献：

[1]Weir B,MacDonald L.Cerebral vasospasm[M].Clin Neurosurg,1993

[2]D ietrich H H, Dacey R C Jr. Molecu lar keys to the problems of cerebral vasospasm[J]. Neurosurgery,2000,46(3):517-530

[3]De Rooij NK, Rinkel GJ, Dankbaar JW, et al.Delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage:a systematic review of clinical,laboratory,and radiological predictors[J].Stroke 2013,44(1):43-54

[4] Caner B, Hou J, Altay O,et al.Transition of research focus from vasospasm to early brain injury after subarachnoid hemorrhage[J].J Neurochem,2012,123(2):12-21

[5]杨福义,谭福生,谷志龙. 盐酸法舒地尔对蛛网膜下腔出血后血管痉挛疗效观察[J]. 黑龙江医药科学,2011,34(3):77

[6]Kamlya K,Kuyama H, Symon L. An experimental study of the acute stage of subarachnoid hemorrhage[J]. J Neurosurg,1998,59:917-926

[7]杜臻雁,唐福林.糖皮质激素抗作用机制的研究进展[J].中华医学杂志,2006,86(35):2512-2515

[8]谷志龙,杨福义.蛛网膜下腔出血后血管痉挛与S100b基因表达的相关性[J].黑龙江医药科学,2011,34(3):15-16

[9]Vachon P,Moreau JP.Low doses of DEX amethasone decrease brain water content of collagenase-inducde cerebral hematoma[J].Can J Ves.2003,67(2):157-159

[10]王锐,段国升,罗毅,等.大剂量地塞米松、促肾上腺皮质激素对实验性脑损伤的治疗作用[J].中华创伤杂志,2000,16(9):563-564

(收稿日期：2015-04-07)

中图分类号：R743.34

文献标识码：B

文章编号：1008-0104(2016)01-0074-02

作者简介：杨福义(1964～)男，黑龙江佳木斯人，学士，主任医师，硕士研究生导师。通讯作者：高涵(1982～)男， 黑龙江佳木斯人，在读硕士研究生。E-mail:gaohan1000000@163.com。