裂殖壶菌替代鱼油对海鲈生长和抗氧化能力的影响

■潘　瑜　陈效儒　马　霞　金雄华

（通威股份有限公司，四川成都610041）



裂殖壶菌替代鱼油对海鲈生长和抗氧化能力的影响

■潘瑜陈效儒马霞金雄华

（通威股份有限公司，四川成都610041）

摘要：在一种实用饲料配方的基础上，用裂殖壶菌粉等DHA含量替代0%（对照组）、50%和100%的鱼油，并补充豆油，配制成3种等氮、等脂的试验饲料，在室内循环养殖系统中饲喂3组海鲈[初重(40.5±2.9) g]85 d，以研究裂殖壶菌粉替代鱼油对海鲈生长性能、肌肉常规组成及抗氧化能力的影响。结果表明：增重率以100%组最低，且显著低于0%组和50%组(P<0.05)，而0%组和50%组间差异不显著（P>0.05）；各组间饲料系数没有显著差异（P>0.05）。鱼体肌肉粗脂肪含量以100%组最高，且显著高于0%组和50%组(P<0.05)，而0%组和50%组间差异不显著（P>0.05）。总抗氧化水平以50%组最高，且显著高于100%组(P<0.05)，但与0%组差异不显著（P>0.05）；丙二醛含量以50%组最低，显著低于100%组(P<0.05)，但与0%组没有显著性差异（P>0.05）。由此可见，在本试验配方的基础下，裂殖壶菌粉能够替代50%的鱼油而不影响生长，但完全替代鱼油会造成鱼体生长受阻，并危及鱼体健康。

关键词：裂殖壶菌；海鲈；生长性能；抗氧化能力

海洋微藻类含油量高，且多为高不饱和脂肪酸，加之生长、繁殖迅速，富含多种生物活性成分，被视为一种优质的鱼油替代油源[1]。裂殖壶菌，又称裂壶藻，其油脂含量占细胞干重的50%以上，DHA含量高达20%（干基），是一种潜在的优质替代油源[2]。目前裂殖壶菌作为饲料脂肪源在水产饲料中的应用研究较少，仅在金头鲷[3]、斑点叉尾鮰[4]、大西洋鲑鱼[5]、南美白对虾[6]等少数几个品种上做过替代研究。在对金头鲷仔鱼[3]、斑点叉尾鮰[4]以及大西洋鲑鱼[5]等的研究中表明，裂殖壶菌部分或完全替代鱼油，不会对鱼体生长、存活产生负面影响。海鲈是我国重要的经济养殖鱼类，还未见裂殖壶菌在海鲈饲料中的应用研究。本试验以海鲈为研究对象，通过测定生长、形体以及体组成等指标，综合评定裂殖壶菌在海鲈成鱼饲料中的应用效果。

1材料和方法

1.1试验饲料

试验选用粗蛋白质16.6%、粗脂肪53.2%的裂殖壶菌干粉产品（营养指标见表1）。在以秘鲁红鱼粉、豆粕、花生粕作为蛋白源，并添加1%的鱼油和3%豆油在基础饲料中，用裂殖壶菌分别替代0%、50%和100%鱼油，形成3种等氮、等脂肪含量(粗蛋白41%，粗脂肪10%)的试验饲料，配方组成见表2。油脂来源新鲜、品质保证（检测值均符合国家卫生标准）。试验料均以商业膨化料的加工工艺流程制作成粒径为3 mm的膨化料。

表1试验饲料粗脂肪、DHA及EPA含量（%）

1.2饲养管理

试验鱼选用当年培育的海鲈苗，取自珠海斗门白蕉养殖场。试验鱼驯食适应环境10 d后，选取体质健壮、规格整齐的海鲈[初重(40.5±2.9) g]240尾，随机分成3组，每组设4个重复，每个重复20尾鱼，饲养在室内玻璃水族箱(有效体积为800 L)中。日投喂率为体重的2%~3%，每天07：30和17：30各投喂1次。每天早上清除箱内粪便，并换水1/4。饲养时间为85 d。养殖水源为曝气自来水。养殖全程水温为（26.8±2.2）℃，pH值（7.2±0.3），溶解氧>6.2 mg/l，氨氮<0.60 mg/l，亚硝酸盐氮<0.05 mg/l。

1.3样品制备与分析

饲养试验结束，禁食24 h后称重，每箱取5尾鱼背部肌肉样品；每箱取5尾鱼，取出肝胰脏，立即放入液氮罐中速冻，然后转入-80℃低温冰箱保存。

饲料原料及肌肉样品均在105℃条件下烘干至恒重，然后进行营养成分测定。粗蛋白质含量采用凯氏定氮法，粗脂肪含量采用索氏抽提法，粗灰分含量采用高温（550℃）灰化法测定。

表2试验饲料组成及营养水平

总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛含量（MDA）采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定。T-AOC能力定义为：在37℃时，每分钟每毫克蛋白使反应体系的吸光度（OD）值增加0.01时，为一个酶活性单位。

1.4计算公式

增重率(weight gain rate，WGR，%)=（末总重-初总重）/初总重×100；

饲料系数(feed conversion ratio，FCR)=总干物质摄食量(g)/鱼体总增重(g)。

1.5数据处理与分析

数据均以“平均值±标准误”表示，采用SPSS 11.0对所得数据进行单因素方差分析（One-way ANO⁃VA），若差异达到显著，则进行Duncan's法多重比较，显著性水平为P<0.05。

2结果与分析

2.1裂殖壶菌替代鱼油对海鲈生长的影响（见表3）

表3裂殖壶菌替代鱼油对海鲈生长的影响(n=4)

由表3可知，增重率以100%组最低，且显著低于0%组和50%组，而0%组和50%组间差异不显著；各组间饲料系数没有显著差异。

2.2裂殖壶菌替代鱼油对海鲈肌肉常规组成的影响（见表4）

表4裂殖壶菌替代鱼油对海鲈肌肉常规组成的影响(n=4)(%)

由表4可知，鱼体肌肉粗脂肪含量以100%组最高，且显著高于0%组和50%组，而0%组和50%组间差异不显著。

2.3裂殖壶菌替代鱼油对海鲈抗氧化能力的影响（见表5）

表5裂殖壶菌替代鱼油对海鲈抗氧化能力的影响（n=4）

由表5可知，裂殖壶菌替代鱼油对海鲈血清抗氧化能力有显著影响。总抗氧化能力以50%组最高，且显著高于100%组，但与0%组差异不显著；丙二醛含量以50%组最低，显著低于100%组，但与0%组没有显著性差异。

3　讨论

3.1裂殖壶菌替代鱼油对海鲈生长的影响

裂殖壶菌作为饲料脂肪源在水产饲料中的应用研究较少。Li等[4]在等氮、等能的全植物蛋白基础日粮中，以裂殖壶菌菌粉等脂肪含量替代10%~ 50%的鲶鱼油配制成5种日粮饲喂斑点叉尾鮰，发现裂殖壶菌菌粉替代10%~40%鲶鱼油可显著改善鱼体体增重和饲料效率，而当替代量达到50%时生长性能略有降低，但也优于对照组。Ganuza等[3]发现，在以乌贼粉为主要蛋白源的日粮中，以裂殖壶菌粉等DHA含量替代5.5%沙丁鱼油不会对金头鲷仔鱼的生长性能产生负面影响，然而在脱脂乌贼粉为主要蛋白源的日粮中，裂殖壶菌粉完全替代沙丁鱼油，在保持DHA含量一致的情况下，金头鲷仔鱼生长性能显著降低。以上试验结果表明，裂殖壶菌能否成功替代鱼油的关键在于饲料中必需脂肪酸含量是否满足鱼体的正常生长，而裂殖壶菌替代鱼油所引起的EPA和ARA含量的降低也是影响鱼体生长的重要因素。本试验结果显示，裂殖壶菌菌粉替代50%鱼油对海鲈的饲料系数和增重率没有影响，但当替代比例达到100%时，鱼体增重率显著降低。作者查阅了国内外近10年的相关文献，未找到关于海鲈对必需脂肪酸需求的研究报告，参考和海鲈同一属的欧洲鲈鱼必需脂肪酸需求为1%n-3 HUFA[7]，本试验中裂殖壶菌替代鱼油会使日粮中n-3 HUFA含量降低，当替代量达100%时，日粮中必需脂肪酸含量约为0.89%，推测本试验中日粮必需脂肪酸含量不足是造成100%组鱼体生长性能降低的主要因素。

3.2裂殖壶菌替代鱼油对海鲈肌肉常规组成的影响

已有的研究表明，饲料组成对鱼体常规营养成分有重要影响[8]。目前的研究结果显示，裂殖壶菌替代鱼油对海鲈肌肉粗蛋白和粗灰分含量没有影响，但随着裂殖壶菌替代鱼油比例的升高，鱼体肌肉粗脂肪含量逐渐升高。这与马晶晶[9]发现日粮中高n-3 HUFA含量能显著降低黑鲷幼鱼肌肉中的脂肪含量的研究结果类似。这很可能是由于n-3 HUFA能够抑制脂肪合成，降低脂肪沉积量[10]。

3.3裂殖壶菌替代鱼油对海鲈抗氧化能力的影响

机体通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用，并由此形成脂质过氧化物，致使组织细胞受损[11]。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的主要产物，其含量反映了脂质氧化程度。T-AOC是机体内抗氧化能力的总体体现，是酶促和非酶促二方面因子抗氧化能力的总和。本试验结果显示，裂殖壶菌替代50%鱼油不会对海鲈血清T-AOC水平和MDA含量产生影响，但100%替代会造成血清T-AOC水平明显降低，而MDA含量显著升高。这与潘瑜等[12]发现亚麻油替代富含n-3 HUFA的鱼油会使鲤鱼血清T-AOC水平显著降低的研究结果类似。这可能是由于HUFA特有的生理作用能够直接提高抗氧化系统组成因子的活力所致[13]。而T-AOC水平的降低，致使机体清除氧自由基能力减弱，进而促使MDA含量升高可能是本试验中海鲈血清MDA含量升高的主要原因。

4　结论

在本试验配方的基础下，裂殖壶菌菌粉能够替代50%的鱼油而不影响生长，但完全替代鱼油会造成鱼体生长受阻，并危及鱼体健康。

参考文献

[1]纪志有，彭晓芳，马金余.富含DHA微藻作为新型饲料添加剂在水产养殖业的应用[J].饲料广角，2010(19)：36-38.

[2]曾娟，刘海燕，顾继锐，等.裂殖壶藻在水产养殖中的应用[J].中国饲料，2015(13)：27-28.

[3] Ganuza E, Benítez-Santana T, Atalah. E, et al. Crypthecodinium cohniiand Schizochytriumsp.as potential substitutes to fisheriesderived oils from seabream (Sparusaurata) microdiets[J]. Aquacul⁃ture, 2008, 277: 109-116.

[4] Li Menghe H, Robinson. Edwin H, et al. Effects of dried algae Schizochytrium sp., a rich source of docosahexaenoic acid, on growth, fatty acid composition, and sensory quality of channel cat⁃fish Ictaluruspunctatus[J]. Aquaculture, 2009, 292: 232-236.

[5] Miller Matthew R, Nichols. Peter D, Carter. Chris G. Replacement of fish oil with thraustochytrid Schizochytriumsp. Loil in Atlan⁃tic salmon parr (Salmosalar L) diets[J]. Comparative Biochemistry and Physiology, Part A, 2007, 148: 382-392.

[6] Patnaik S, Samocha T M, Davis D A, et al. The use of HUFA-rich algal meals in diets for Litopenaeus Vannamei[J]. Aquacul⁃ture Nutrition, 2006, 12; 395-401.

[7] Coutteau P G, Vanstappen, Sorgeloos P. A standard experimental diet for the study of fatty acid requirements of weaning and first ongrowing stages of the European sea bass DicentratchuslabraxL Comparison of extruded and extruded/coated diets[J]. Arch. Anim. Nutr., 1996a, 49: 49-59.

[8] Hansen A C, Rosenlund G, Karlsen Ø, et al. Total replacement of fish meal with plant proteins in diets for Atlantic cod (Gadus morhuaL.). I . Effects on growth and protein retention[J]. Aquacul⁃ture, 2007, 272(1/2/3/4): 599-611.

[9]马晶晶. n-3高不饱和脂肪酸对黑鲷幼鱼生长及脂肪代谢的影响[D].浙江大学, 2008.

[10] Ribeiro P A P, Logato P V R, Paulad A D G, et al. Effect of dif⁃ferent oils in the diet on lipogenesis and the lipid profile of Nile tilapias[J]. Revista Brasileira de Zootecnia, 2008, 37: 1331-1337. [11]杨鸢劼，邴旭文，徐增洪.不饱和脂肪酸对黄鳝脂质过氧化的影响[J].动物营养学报，2009，21（6）：1018-1022.

[12]潘瑜，陈文燕，林仕梅，等.亚麻油替代鱼油对鲤鱼生长性能、肝胰脏脂质代谢及抗氧化能力的影响[J].动物营养学报，2014，26 （2）:420-426.

[13] Frenoux J R, Prost E D, Belleville J L. A polyunsaturated fatty acid diet lowers blood pressure and improve antioxidant status in spontaneously hypertensive rats [J]. The Journal of Nutrition, 2001, 131: 39-45.

（编辑：沈桂宇，guiyush@126.com）

Effects of replacement of fish oil by Schizochytriumon growth performance and antioxidant ability in blood serum of sea bass

Pan Yu, Chen Xiaoru, Ma Xia, Jin Xionghua

Abstract：In order to study the effects of replacement of different levels of fish oil by Schizochytrium on growth performance, muscel composition and antioxidant in blood serum of sea bass, three isonitrog⁃enous and isoenergetic experimental diets were formulated by replacing 0%(control group), 50% and 100% fish meal with Schizochytriumon basis of a practical diet, respectively. Sea bass with the initial body weight of (40.5±2.9 ) g in three groups were fed three experimental diets for 85 days in the room circulation farming system. The results showed as follows: the lowest specific growth rate (SGR) were found in 100% group(P<0.05), with no significant difference among 0% group and 50% group（P> 0.05）. Crude lipid content in muscle of the 100% group was significantly higher than that of the other groups(P<0.05); while no significant difference between 0% and 50% group. The serum total antioxi⁃dant capacity(T-AOC) in 50% group was the highest(P<0.05), and significantly higher than 100% group(P<0.05). The contents of serum malondialdehyde(MDA) in 100% group was the hihgher than oth⁃er groups(P<0.05). Thus, replacement of different levels of fish oil by Schizochytriumhas different ef⁃fects on growth performance and antioxidant ability in serum of sea bass. Replacement of 50% fish oil by Schizochytriumdoesn't affect the growth of sea bass; total replacement of fish oil by Schizochytrium can hinder the growth of sea bass, and endanger the health of fish.

Key words：Schizochytrium；sea bass；growth performance；antioxidant ability

收稿日期：2015-12-14

通讯作者：陈效儒，副高级工程师。

作者简介：潘瑜，硕士，研究方向为水产动物营养与饲料。

中图分类号：S96

文献标识码：A

文章编号：1001-991X（2016）04-0024-04

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.04.006