冬虫夏草菌粉对肉鸡生长性能和免疫功能的影响

■邵紫培　尹艳军　袁洪水

（河北农业大学生命科学学院，河北保定071000）



冬虫夏草菌粉对肉鸡生长性能和免疫功能的影响

■邵紫培尹艳军袁洪水

（河北农业大学生命科学学院，河北保定071000）

摘要：试验旨在研究冬虫夏草菌粉对肉鸡生长性能和免疫功能的影响。将200羽1日龄AA肉鸡随机分为5组，每组4个重复。空白对照组仅饲喂基础日粮；抗生素对照组在基础日粮中添加350 mg/kg金霉素；冬虫夏草菌粉试验组设低、中、高3个剂量，分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%、0.2%冬虫夏草菌粉。试验周期42 d，分为前期（1~21 d）、后期（22~42 d）两个阶段。结果表明，与空白对照组相比，中、高剂量组在增加肉鸡均重、平均日增重，降低肉鸡料重比，提高肉鸡胸腺指数和脾脏指数，增加机体外周血T淋巴细胞的转化率、增强肉鸡白细胞吞噬能力方面均呈显著水平（P<0.05）；与抗生素对照组相比，可降低腹泻发生率。由此可知，冬虫夏草菌粉可作为饲料添加剂用来提高肉鸡的生长性能和免疫功能，替代抗生素预防腹泻发生。

关键词：冬虫夏草菌粉；肉鸡；生长性能；免疫功能

抗生素具有防病、治病作用，从而间接促进生长，因此被长期用于动物饲料添加剂，曾对畜牧业的发展起到了一定的促进作用。但抗生素的长期大量使用，导致病原菌产生耐药性，畜禽机体免疫力下降，极易引发畜禽内源性感染和交叉感染[1-2]。同时，动物性食品中抗生素的残留对公众健康和生态环境也造成了一定的危害[3]。因此，抗生素替代品的研究和开发成为诸多科研学者的工作重点。

冬虫夏草是我国一味传统的名贵中药材，主要用于年老体弱、久病不愈的患者，具有补益强壮、抗衰老等保健和防病作用。现代生物学研究表明，其本质是冬虫夏草菌寄生于蝙蝠蛾幼虫而发育成的虫菌复合体，成分分析显示冬虫夏草含有多糖类、核苷类、生物碱类、环状肽类、酶类、多种氨基酸和无机元素等活性成分。药理学研究表明，虫草多糖和核苷类成分对于提高免疫功能、预防和治疗感染性疾病具有重要作用[4]。由于其生长环境特殊，资源匮乏、价格昂贵，一直仅用于人的治疗药品和保健品。

随着人们分离出天然虫草真菌菌种并研究证明发酵获得冬虫夏草菌丝体与天然冬虫夏草成分相似，多糖类、核苷类等药用成分的含量甚至高于天然冬虫夏草，且二者具有相同的功效和药理作用[5-7]。赵乐乐等[8]研究表明，用人工培植虫草菌丝粉作为鸡饲料添加剂，可以促进其生长发育，提高生长性能，改善鸡肉品质。潘美慧等[9]用蝙蝠蛾拟青霉菌株发酵虫草粉能够提高鸡的细胞免疫水平，增强免疫力。可见虫草菌粉作为饲料添加剂同样在提高动物免疫力、防病治病、促生长等方面具有良好的效果。

通过人工发酵生产制备虫草菌粉工艺简单，技术成熟，易于大规模生产，不仅提高了产量，改善了天然冬虫夏草供不应求的局面，也极大地降低了生产成本，为其在养殖行业中规模化应用奠定了坚实的基础。本研究以本实验室从西藏那曲冬虫夏草分离的CC-10菌株制备的虫草菌粉为试验材料，研究了其对肉鸡免疫功能和生长性能的影响，为研究和开发饲用抗生素替代品添加剂提供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

试验动物：AA肉鸡，购于大午种禽公司。

试验饲料：全期商品日粮，由北京华都饲料有限公司生产。

冬虫夏草菌粉：由河北农业大学生命科学学院制药工程实验室从那曲冬虫夏草中分离的冬虫夏草菌株CC-10，经液体发酵、离心、干燥后制得冬虫夏草菌粉。

1.2试验方法

1.2.1试验动物分组及管理

将200羽1日龄AA肉鸡随机分为5组，每组40羽，设置4个重复。空白对照组饲喂基础日粮；抗生素对照组在基础日粮中添加350 mg/kg金霉素；试验组设低、中、高三个剂量，分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%、0.2%冬虫夏草菌粉。试验周期42 d，分为前期（1~21 d）、后期（22~42 d）两个阶段。光照和免疫程序按常规进行，各组饲养管理条件一致。

1.2.2生长性能测定

试验期间记录各组肉鸡的耗料量和腹泻情况，于肉鸡第21、42日龄时，对空腹12 h后的各组肉鸡进行称重，计算试验前期、后期及全期肉鸡均重、平均日增重和料重比。

1.2.3免疫器官指数测定

于肉鸡第21、42日龄，每组随机抽取5羽进行空腹称重，屠杀。取胸腺、脾脏、法氏囊，剔除多余的脂肪组织，用吸水纸洗净表面液体后，分析天平称重。计算免疫器官指数。

1.2.4外周血T淋巴细胞转化率的测定

外周血T淋巴细胞转化率的测定参考赵超等[10]方法进行。于肉鸡第21、42日龄时，每组随机抽取3只健康肉鸡翅下静脉采血2 ml，肝素抗凝。取抗凝血0.1 ml，加入到装有1.8 ml细胞液的淋巴细胞转化管中，再加100 μg/ml PHA 0.1 ml。充分摇匀，二氧化碳培养箱中37℃培养3 d，每天摇匀2次。培养结束后，离心弃上清，取沉淀制片、吉姆萨染色，显微镜下观察并计数200个淋巴细胞中转化的细胞个数。

T淋巴细胞转化率(%)=

1.2.5白细胞吞噬率的测定

白细胞吞噬率的测定参照何正义等[11]方法进行。取肝素抗凝血60 μl于无菌的双凹片中，加白色葡萄球菌菌悬液20 μl（6×108cfu/ml），混匀。将双凹片置于铺有厚的湿纱布的平皿内，盖上平皿盖，37℃培养30 min，10 min混匀一次。培养结束后，涂片，自然干燥后用瑞-姬氏染色液染色，油镜镜检并计数。

白细胞吞噬率(%)=

1.3数据处理

结果以“平均值±标准误”表示，数据处理与分析采用SPSS17.0统计处理软件，以P<0.05作为差异显著性判断标准。

2结果与分析

2.1冬虫夏草菌粉对肉鸡生长性能的影响

2.1.1试验肉鸡腹泻情况

试验期间，各组肉鸡腹泻情况：空白对照组7只，抗生素对照组3只，低、中、高剂量组分别有5只、3只、1只发生腹泻。分笼饲养后，部分肉鸡恢复正常，各组因腹泻死亡情况：空白对照组5只，抗生素对照组2只，低、中、高剂量组分别为3只、1只和0只。结果表明，与空白对照组相比，冬虫夏草菌粉可有效降低肉鸡腹泻数量，减少肉鸡死亡；中、高剂量组肉鸡因腹泻死亡只数少于抗生素对照组，说明冬虫夏草菌粉与金霉素具有相似功效，抗腹泻作用明显。

2.1.2冬虫夏草菌粉对肉鸡均重的影响(见表1)

表1冬虫夏草菌粉对肉鸡均重的影响（g）

由表1可知，21日龄时，与空白对照组相比，低剂量组对肉鸡均重影响不显著（P>0.05），中、高剂量组肉鸡均重分别显著提高6.26%、10.82%（P<0.05）；与抗生素对照组相比，低剂量组肉鸡均重显著降低7.09% （P<0.05），中、高剂量组间差异不显著（P>0.05）。42日龄时，中、高剂量组较空白对照组分别显著提高5.90%、6.96%（P<0.05），低剂量组与对照组相比差异不显著（P>0.05）；与抗生素对照组相比，中、高剂量组肉鸡均重分别显著提高2.72%、3.75%（P<0.05），但二者之间不存在显著差异（P>0.05）。

2.1.3冬虫夏草菌粉对肉鸡平均日增重的影响(见表2)

由表2可知，试验前期，与空白对照组相比，低剂量组对肉鸡平均日增重影响不显著（P>0.05），中、高剂量组分别提高6.82%、11.66%，差异显著（P<0.05）；与抗生素对照组相比，低剂量组显著降低7.36%（P< 0.05），中、高剂量组差异性不显著（P>0.05）。试验后期，与抗生素对照组相比，中剂量组显著提高3.61% (P<0.05)，低、高剂量组与抗生素对照组相比差异不显著（P>0.05）。试验全期，与空白对照组和抗生素对照组相比，低剂量组对平均日增重的影响均不显著（P> 0.05），而中、高剂量组则呈现显著性差异（P<0.05）。

表2冬虫夏草菌粉对肉鸡平均日增重的影响（g）

2.1.4冬虫夏草菌粉对肉鸡料重比的影响（见表3）

表3冬虫夏草菌粉对肉鸡料重比的影响

由表3可知，试验前期，低、高剂量组肉鸡料重比与空白对照组相比差异不显著（P>0.05），但呈现降低的趋势；中剂量组料重比显著降低12.72%（P<0.05）。试验后期，与空白对照组相比，所有处理组对肉鸡料重比影响差异均不显著（P>0.05）。试验全期，中剂量组料重比较抗生素对照组降低5.53%，差异显著（P< 0.05），表明中剂量冬虫夏草菌粉对提高肉鸡饲料转化率效果更好。

2.2冬虫夏草菌粉对肉鸡免疫器官指数的影响(见表4)

表4冬虫夏草菌粉对肉鸡免疫器官指数的影响（g/kg）

由表4可知，21日龄时，与空白对照组相比，低剂量组所有免疫器官指数不存在显著差异（P>0.05），而中、高剂量组免疫器官指数均显著提高（P<0.05）；与抗生素对照组相比，除低剂量组胸腺指数差异显著（P<0.05）外，所有处理组对免疫器官指数影响均不显著（P>0.05）。42日龄时，与空白对照组和抗生素对照组相比，低、中、高3个剂量组法氏囊指数差异性不显著（P>0.05），胸腺指数显著提高（P<0.05）；中、高剂量组脾脏指数显著高于空白对照组（P<0.05），与抗生素对照组相比差异不显著（P>0.05）。

2.3冬虫夏草菌粉对T淋巴细胞转化率的影响(见表5)

表5冬虫夏草菌粉对T淋巴细胞转化率的影响（%）

由表5可知，在肉鸡21和42日龄时，与空白对照组相比，低剂量组对肉鸡T淋巴细胞转化率的影响均不显著（P>0.05），中、高剂量组T淋巴细胞转化率分别显著提高10.17%、14.85%和17.30%、22.20%（P< 0.05）；中、高剂量组T淋巴细胞转化率与抗生素组相比差异不显著（P>0.05）。

2.4冬虫夏草菌粉对白细胞吞噬率的影响(见表6)

表6冬虫夏草菌粉对白细胞吞噬率的影响（%）

由表6可知，21日龄时，各处理组与空白对照组相比对肉鸡白细胞吞噬率影响均不显著（P>0.05），但随着冬虫夏草菌粉剂量的增加，白细胞吞噬率逐渐升高。42日龄时，低剂量组白细胞吞噬率与空白对照组相比差异不显著（P>0.05），中、高剂量组分别显著提高9.41%、11.54%（P<0.05）；各试验组与抗生素对照组相比，对肉鸡白细胞吞噬率的影响差异均不显著（P> 0.05），但中、高剂量组白细胞吞噬率高于抗生素对照组，说明冬虫夏草菌粉对肉鸡白细胞吞噬率的影响与金霉素作用效果相似。

3　讨论

3.1冬虫夏草菌粉对肉鸡生长性能的影响

液体发酵冬虫夏草菌丝体中虫草多糖、腺苷、麦角甾醇等主要功能成分与天然冬虫夏草一致且含量接近，甚至高于天然冬虫夏草[12]。饲料中添加冬虫夏草菌粉，可以提高肉鸡机体抗病力和营养物质的利用率，提高肉鸡的生长性能。赵乐乐等[8]研究表明，在饲料中添加虫草粉可显著提高7日龄肉鸡增重（P< 0.05）。刘正远等[13]研究显示，试验前期，冬虫夏草菌粉添加组（0.2%冬虫夏草菌粉）较对照组料重比显著降低7.80%（P<0.05）；试验后期冬虫夏草菌粉添加组比对照组肉鸡日增重显著提高10.89%（P<0.05）。本试验结果表明，与空白对照组相比，试验前期饲料中添加中剂量的冬虫夏草菌粉使肉鸡的料重比显著降低12.72%（P<0.05）；试验前期和后期，添加中、高剂量冬虫夏草菌粉均可显著提高肉鸡平均日增重（P< 0.05），与刘正远等试验结果相似，但对肉鸡平均日增重显著提高的阶段不同，这可能与试验肉鸡品种、生长环境及饲喂的虫草粉剂量等有关。试验全期，与抗生素对照组相比，中剂量组肉鸡均重、平均日增重显著提高，料重比显著降低（P<0.05），表明饲料中添加中剂量冬虫夏草菌粉可以提高肉鸡生长性能，效果优于抗生素对照组，同时可以避免药物在鸡体内残留。

3.2冬虫夏草菌粉对肉鸡免疫器官指数的影响

胸腺、脾脏、法氏囊是禽类重要的免疫器官，是免疫细胞形成、分化及抗体形成的主要场所，参与全身的细胞免疫和体液免疫，免疫器官指数越大，说明免疫机能越强[14]。潘美慧等[15]研究结果表明，虫草菌粉中、高剂量组（0.6、1.8 g/kg）饲喂雏鸡20日龄后，与对照组相比，脾脏指数和法氏囊指数与对照组相比显著提高（P<0.05）。本试验21日龄时，添加中、高剂量的冬虫夏草菌粉可显著提高肉鸡免疫器官指数（胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数），与潘美慧等研究结果一致。试验前期，中、高剂量组与抗生素对照组相比差异均不显著（P>0.05），说明中、高剂量冬虫夏草菌粉与金霉素一样，能够提高肉鸡免疫器官指数，增强其免疫功能。

3.3冬虫夏草菌粉对T淋巴细胞转化率的影响

据报道[16]，冬虫夏草及菌丝体可促进脾脏DNA合成，进而促进淋巴细胞增殖，使外周血T淋巴细胞数量增加。T淋巴细胞是体内主要的免疫活性细胞，其转化率是机体特异性免疫功能评价的一个重要指标。T淋巴细胞转化率越高，说明淋巴细胞受到刺激后增殖反应越强，机体的细胞免疫能力越强[17]。胡雅婷等[18]研究表明，中、高剂量（0.6、1.8 g/kg）虫草菌粉能够极显著提高淋巴细胞转化率（P<0.01），证明虫草菌粉能够提高细胞免疫水平，增强雏鸡免疫力。本试验结果显示，21日龄和42日龄时，中、高剂量组肉鸡T淋巴细胞转化率均显著提高（P<0.05），与胡雅婷等研究结果不同，这可能与试验所用菌种或剂量有关。

3.4冬虫夏草菌粉对白细胞吞噬率的影响

白细胞作为机体的免疫细胞，具有强大的吞噬功能，参与机体非特异性免疫和特异性免疫，白细胞吞噬率越高，证明机体的免疫能力越强[19]。试验结果显示，日粮中添加中、高剂量冬虫夏草菌粉可显著提高42日龄时肉鸡白细胞吞噬率（P<0.05），提高肉鸡的免疫水平，增强机体免疫力和抗病力。

4　结论

饲料中添加0.1%和0.2%冬虫夏草菌粉均能提高肉鸡生长性能；促进免疫器官的生长发育；增加机体外周血T淋巴细胞的数量；提高肉鸡白细胞吞噬率，增强机体免疫力和抗病能力；与添加金霉素效果一致，甚至更优。本试验为冬虫夏草菌粉饲料添加剂的研究提供了一定的理论参考。从经济增效角度出发，建议养殖户可以在饲料中添加0.1%冬虫夏草菌粉。

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（编辑：高雁，snowyan78@163.com）

Effects of Cordyceps power on growth performance and immune function of broilers

Shao Zipei, Yin Yanjun, Yuan Hongshui

Abstract：The aim of this experiment is to study the effects of Cordyceps power on growth performance and immune function of broiler chicken. 200 1-day-old Arbor Acres broilers were randomly divided into 5 groups with 5 repeats. The blank control group was fed basal diet and the antibiotics control group was supplemented with 350 mg/kg chlortetracycline, the experimental groups were supplemented with 0.05%, 0.1%, 0.2% Cordyceps power respectively. The cycle of test were 42 days, including pro⁃phase (1~21 d) and anaphase (22~42 d). The results showed that: compared with control group, middle and high dose groups increased average weigh, average daily gain and reduced feed gain ratio signifi⁃cantly (P<0.05); improved thymus index and spleen index dramatically (P<0.05); increased the quanti⁃ty of T lymphocyte (P<0.05) and enhanced phagocytic function of leukocyte remarkably (P<0.05). Com⁃pared with antibiotics control group, middle and high dose groups can reduce incidence of diarrhea. This research indicated that growth performance and immune function of broilers could be improved by adding Cordyceps power as feed additive, meanwhile it can replace antibiotics to prevent diarrhea.

Key words：Cordyceps power；broiler；growth performance；immune function

收稿日期：2015-11-04

通讯作者：袁洪水，副教授，硕士生导师。

作者简介：邵紫培，硕士，研究方向为药源微生物资源与利用。

中图分类号：S831

文献标识码：A

文章编号：1001-991X（2016）04-0010-05

doi:10.13302/j.cnki.fi.2016.04.003