噻托溴铵吸入治疗COPD患者痰液炎症细胞计数及相关炎症因子表达变化

单淑香，徐向英，刘艳霞，冯丽君，唐淑金，崔学荣(天津医科大学宝坻临床学院，天津 301800)



噻托溴铵吸入治疗COPD患者痰液炎症细胞计数及相关炎症因子表达变化

单淑香，徐向英，刘艳霞，冯丽君，唐淑金，崔学荣(天津医科大学宝坻临床学院，天津 301800)

摘要：目的观察噻托溴铵吸入治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰液炎症细胞计数及相关炎症因子表达变化。方法 60例中度及以上COPD患者分为A、B组各30例，A组患者吸入噻托溴铵，B组患者口服茶碱缓释片，另选10例年龄相当的健康吸烟者或曾经吸烟者作为对照(C组)，比较各组诱导痰沉渣炎症细胞及诱导痰上清液炎症因子[白三烯B4(LTB4)、IL-8、髓过氧化物酶(MPO)]。结果与C组比较，A、B组治疗前诱导痰沉渣中性粒细胞计数增加，淋巴细胞、巨噬细胞计数减少；与C组比较，诱导痰上清液IL-8、LTB4、MPO水平升高；P均<0.05。与同组治疗前比较，A组其他细胞计数增加，IL-8、LTB4水平降低；与同组治疗前比较，B组嗜酸细胞、其他细胞计数增加，IL-8、LTB4水平降低；P均<0.05。结论 噻托溴铵可降低COPD患者诱导痰中炎症细胞计数及相关炎症因子表达，在COPD治疗中发挥抗炎作用。

关键词：噻托溴铵；慢性阻塞性肺疾病；炎症细胞；白三烯B4；白细胞介素8；髓过氧化物酶

目前，慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制尚未明了，普遍认为是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征，在肺的不同部位有巨噬细胞、T淋巴细胞和中性粒细胞聚集。激活的炎症细胞释放多种炎症因子，包括白三烯B4(LTB4)、IL-8、髓过氧化物酶(MPO)等。以往临床上有关小剂量茶碱治疗COPD的抗炎作用已基本确定。噻托溴铵是一种长效抗胆碱药，具有舒张气道平滑肌的作用，但其是否有抗炎作用鲜有报道。本研究观察了噻托溴铵吸入治疗COPD患者痰液炎症细胞计数及相关炎症因子表达变化，并与小剂量茶碱缓释片比较。现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料选择天津医科大学宝坻临床学院收治的中度及以上COPD患者60例，男33例，女27例；年龄(68.57±7.90)岁。按照COPD诊治指南(2007年修订版)[1]。纳入标准：年龄60～75岁，吸烟及曾吸烟者(戒烟<5 a，吸烟指数≥10包年)，且一秒钟用力呼气容积/用力肺活量<70%，一秒钟用力呼气容积占预计值百分比<80%的稳定期COPD患者。体质量指数24.41±4.55，吸烟指数412[0,1850]。所有患者分为A、B组各30例。另选10例年龄相当的健康吸烟者及曾经吸烟者(戒烟<5 a，吸烟指数≥10包年)作为对照(C组)，男6例，女4例；年龄(69.50±7.02)岁；体质量指数24.33±2.59，吸烟指数375[0,1500]。纳入标准：①无中枢性或阻塞性睡眠呼吸暂停综合征、支气管哮喘、支气管扩张、肺间质纤维化病史者；②无闭角型青光眼、前列腺增生症、肿瘤、慢性心力衰竭、恶性心律失常、肝肾衰竭者；③1个月内无COPD急性发作史且未使用过抗生素者；④3个月内未接受过糖皮质激素(全身或吸入)和茶碱类、噻托溴铵类药物或应用任何针对抗炎治疗药物者。

1.2治疗方法A组患者吸入噻托溴铵，剂量为18 μg，1次/d，共治疗30 d。B组患者口服茶碱缓释片，剂量为0.1 g，2次/d，共治疗30 d。

1.3诱导痰沉渣细胞计数及诱导痰上清液炎症因子检测光学显微镜下观察诱导痰沉渣，对沉渣中细胞进行分类并计数；双抗体夹心ELISA法检测痰上清液炎症因子(IL-8、LTB4、MPO)。

2结果

2.1各组诱导痰沉渣炎症细胞计数比较诱导痰沉渣炎症细胞计数比较见表1。

2.2各组诱导痰上清液炎症因子水平比较诱导痰上清液炎症因子水平比较见表2。

表1　各组诱导痰沉渣炎症细胞计数比较±s)

注：与C组比较，*P<0.05；与同组治疗前比较，△P<0.05。

表2　各组诱导痰上清液炎症因子水平比较±s)

注：与C组比较，*P<0.05；与同组治疗前比较，△P<0.05。

3讨论

COPD患者中性粒细胞计数增高，说明COPD患者气道中的主要炎症细胞为中性粒细胞。而巨噬细胞及淋巴细胞在COPD发病中亦起着至关重要的作用[2]。有研究[3]显示，巨噬细胞在COPD的中心和外周气道中均增加。T细胞在COPD的发病过程中除了其自身细胞毒性作用外，还通过其炎症因子与其他细胞相互作用，以还不甚明确的作用机制协同导致了COPD的发生发展。在COPD发病机理中，嗜酸细胞也参与其中，但有关嗜酸细胞在COPD中是否被激活亦存在争议[4,5]。本研究显示，与C组比较，A、B组治疗前诱导痰沉渣中性粒细胞计数增加，淋巴细胞、巨噬细胞计数减少。与同组治疗前比较，A组其他细胞计数增加，B组嗜酸细胞、其他细胞计数增加。提示经药物治疗后，一部分细胞被抑制，而另一部分细胞有可能被激活，但这些细胞的变化在COPD的炎症过程中所发挥的作用及机制如何，有待于进一步探讨。

IL-8主要由气道的肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、上皮细胞、淋巴细胞等分泌的一种环氧酶趋化因子，对中性粒细胞有趋化作用，后者的趋化和分泌作用在肺的炎症和氧化损伤中发挥重要作用[6]。本研究显示，A、B组治疗前IL-8水平较C组升高，治疗后降低，提示噻托溴铵、茶碱缓释片均具有抗炎作用。本研究还显示，A、B组治疗前LTB4水平较C组升高，治疗后降低，说明在COPD稳定期仍存在以中性粒细胞、巨噬细胞等浸润为主的慢性气道炎症，并且LTB4与气道阻塞密切相关，这可能与COPD属于慢性气道炎症疾病，即使在稳定期气道中仍存在中性粒细胞部分激活的表现，而炎症细胞尤其是中性粒细胞产生大量LTB4这一强有力的中性粒细胞和嗜酸粒细胞趋化剂、激活剂，同时中性粒细胞表面还存在大量LTB4受体，从而形成恶性循环，引起炎症扩大和持续存在[7]。MPO是中性粒细胞所特有的，即使在有强吞噬作用的巨噬细胞中也极少见。在细胞化学上，一般将MPO作为中性粒细胞的标志，是反映中性粒细胞活性的标志物之一[8]。本研究亦显示，A、B组治疗前MPO水平高于C组，与相关研究[9]一致，提示在COPD稳定期，气道内中性粒细胞仍呈明显活化状态，参与COPD的炎症进程。

参考文献：

[1] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组．慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2007年修订版)[J].中华内科杂志,2007,46(3):254-261.

[2] Ronchi MC, Piragino C, Rosi E, et al. Role of sputum differential cell count in detecting airway inflammation in patients with chronic bronchial asthma or COPD[J]. Thorax, 1996,51(10):1000-1004.

[3] O′Shaughnessy T, Ansari T, Barnes N, et al. Inflammation in bronchial biopsis of subjects with chronic bronchitis: inverse relationship of CD8+T lymphocytes with FEV1[J]. Am J Respir Crit Care Med, 1997,155(3):852-857.

[4] Rutgers SR, Postma DS, ten Hacken NH, et al. Ongoing airway inflammation in patients with COPD who do not currently smoke[J]. Chest, 2000,117(5 Suppl 1):262.

[5] Balzano G, Stefanelli F, Iorio C, et al. Eosinophilic inflammation in stable chronic obstructive pulmonary disease. relationship with neutrophils and airway function[J]. Am J Respir Crit Care Med, 1999,160(5 Pt 1):1486-1492.

[6] Mukaida N. Pathophysiological roles of interleukin-8/CXCL8 in pulmonary disease[J]. Am J Physiol, 2003,284(4):566-577.

[7] Sikoff PE, Martin D, Pak J, et al. Exhaled nitric oxide correlated with induced sputum findings in COPD[J]. Chest, 2001,119(4):1049-1055.

[8] Gorska K, Krenke R, Domagala-Kulawik J, et al. Comparison of cellular and biochemical markers of airway inflammation in patients with mild-to-moderate asthma and chronic obstructive pulmonary disease: an induced sputum and bronchoalveolar lavage fluid study[J]. J Physiol Pharmacol, 2008,59(Suppl 6):271-283.

[9] Gibson PG, Simpson JL, Saltos N. Heterogeneity of airway inflammation in persistent asthma: evidence of neutrophilic inflammation and increased sputum interleukin-8[J]. Chest, 2001,119(5):1329-1336.

(收稿日期:2015-09-17)

中图分类号：R563

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)03-0074-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.03.030

基金项目：天津市卫生局科技基金资助项目(2011KZ67)。