疣安颗粒制备及质量标准的研究

杜云鹏　黄贵东　邓航　邓俊刚

摘要：目的：建立疣安颗粒的制备方法和质量标准。方法：采用水煮醇沉工艺制成颗粒剂，采用薄层色谱法对白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、黄柏进行定性鉴别。结果：采用薄层色谱法对白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、苍术、黄柏进行定性鉴别特征性强、重现性好。结论：本颗粒制备方法合理、简便、可行，所建立的质量标准可为疣安颗粒的临床应用和疗效提供保证。

关键词：疣安颗粒；质量标准；薄层色谱

中图分类号：R927.1 文献标志码：A 文章编号：1008-2409（2016）05-0079-04

疣安颗粒由黄芪、白术、土茯苓、苍术、黄柏、薏仁、丹皮、通草、泽泻、马齿苋、紫草、乌梅等多味中药组成，具有清热解毒、利尿消肿、健脾除湿、消炎的功能，用于利尿除湿，在临床上用于湿疣的预防和治疗。为了更好地发挥其疗效，便于临床服用，将原方制成颗粒剂，并制定质量标准。采用水煮醇沉工艺制成颗粒剂，采用薄层色谱法对其主要成分白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、苍术、黄柏进行定性鉴别。结果表明所建立的方法准确、快速、灵敏，可以作为该颗粒剂的质量控制标准。

1仪器与试剂

1.1仪器

ZF-1型三用紫外分析仪（上海骥辉科学分析仪器有限公司），RE-52AA型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），SH2-Ⅲ型循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂），FC204型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司），DZF-6020型真空干燥箱（上海精宏试验设备有限公司），WK2102型电磁炉（美的集团股份有限公司），TDL-50B低速离心机（上海沪粤明科学仪器有限公司），A6300型相机（日本索尼公司），展开缸等。

1.2试剂

本实验药材购自安徽井泉集团中药饮片有限公司：白术（批号：150601）、土茯苓（批号：150501）、泽泻（批号：150301）、紫草（批号：150501）、乌梅（批号：150501）、苍术（批号：150501）、黄柏（批号：150301）、薏仁（批号：150501）、通草（批号：150501）、丹皮（批号：150501）。

样品：疣安颗粒，本实验室自制。

2方法与结果

2.1疣安颗粒的制备

将该处方中的12味中药材备齐、净选，按处方8倍量投料加水煎煮两次，合并煎煮液，减压浓缩至相对密度1.05～1.10，加95%乙醇沉淀过夜（至含50%醇量），滤取上清液。减压低温浓缩至稠浸膏（60～65℃测定相对密度为1.20～1.25）。取干燥的糖粉适量，置搅拌机中混合均匀，加稠浸膏1份搅拌混合，加适量75%乙醇调整湿度制成软材，造粒机挤压过10目筛制成湿颗粒，60～65℃干燥，整粒过筛，共得颗粒2 kg。

2.2质量标准研究

2.2.1白术的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10 g，加正己烷20ml，超声处理15 min，取滤液作为供试品溶液。另取不含白术的阴性样品及白术对照药材各10 g，同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色譜法（《中华人民共和国药典》2015年版Ⅳ部通则0502，下简称通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）一乙酸乙酯（50：1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。详见图1。

2.2.2土茯苓的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约5 g，加甲醇20 ml，超声处理30 min，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml，使其溶解作为供试液；另取不含土茯苓的阴性样品及土茯苓对照药材5 g，同法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸（5：4：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20 g/L三氯化铝乙醇试液，放置5 min后，于紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无相应的斑点；阴性对照无干扰。详见图2。

2.2.3泽泻的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10g，加水40ml溶解，加饱和食盐水2ml，充分振摇，用乙醚振摇萃取2次，30 ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1 ml溶解，作为供试品溶液。取泽泻对照药材10g，加水适量，煎煮30 min，滤过，滤液浓缩至20 ml，按照供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；取不含泽泻的阴性样品10 g，同法制成阴性对照溶液。按薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲酸（10：6：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。详见图3。

2.2.4紫草的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约5 g，加石油醚（60～90℃）20ml，超声处理20min，滤过，滤液浓缩至约1 ml。另取不含紫草的阴性样品及紫草对照药材各5 g，同法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：5：0.5：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%氢氧化钾甲醇溶液，斑点变为蓝色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。详见图4。

2.2.5乌梅的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10g，加热水50 ml使溶解，放冷，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次30 ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇1 ml溶解，作为供试品溶液。另取乌梅对照药材5 g，加水50ml，煮沸1 h，放冷，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；另取不含乌梅的阴性对照药品10 g，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（5：3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。详见图5。

2.2.6黄柏的TLC鉴别 取供试品粉末2 g，加1%醋酸甲醇溶液40ml，于60℃超声处理20min，滤过，滤液浓缩至2 ml，作为供试品溶液，另取黄柏对照药材2 g，加1%醋酸甲醇溶液40ml，同法制成对照药材溶液，取缺黄柏的阴性对照品，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验点板，以石油醚（60～90℃）：甲酸乙酯：甲酸（5：15：1）的下层溶液为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。详见图6。

3讨论

疣安颗粒剂的制作由于处方中药煎煮出来的药液糖苷较多，醇沉过程中应避免搅拌，否则会引起在加入蔗糖粉进行搅拌至一定湿度时难度较大，造成过筛困难；考察醇沉时，分别加入30%、50%、60%的乙醇，结果50%乙醇浓度可以沉淀大部分鞣质，为制剂得到较好的浸膏；在对白术进行鉴别时，点样次数应多次，并每点1次应用吹风筒吹干再点第2次，避免展开后点扩散严重，影响鉴定；对于极性较大的样品，在展开剂的极性选择上应选用极性小的展开剂，否则引起拖尾，如土茯苓、黄柏、薏仁的鉴定。

疣安颗粒中白术、土茯苓、苍术、黄柏、薏仁、泽泻、紫草、乌梅薄层鉴别与阴性对照品相比无干扰，结果准确可靠，重现性好，适合于疣安颗粒的质量控制。