乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1和BRMS1的表达变化

乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1和BRMS1的表达变化

姚亚峰1，龚烨2，李炳军2

(1太原市妇幼保健院，太原030012；2新疆维吾尔自治区人民医院)

摘要：目的观察乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)的表达变化。方法乳腺浸润导管癌患者78例，均接受手术治疗，全部留取原发灶组织标本，其中52例同时留取腋窝淋巴结转移灶组织标本、63例同时留取癌旁组织标本。采用免疫组化法和荧光实时定量PCR法检测三种组织标本中的SATB1、BRMS1蛋白及mRNA。结果原发灶、淋巴结转移灶组织中SATB1蛋白阳性表达率分别为75.6%、82.7%，与癌旁组织的28.6%相比，P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织中BRMS1蛋白阳性表达率分为25.6%、23.1%，与癌旁组织的87.3%相比，P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织SATB1 mRNA的相对表达量分别为7.93±1.42、7.27±0.42，与癌旁组织的9.88±1.28相比，P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶组织BRMS1 mRNA的相对表达量分别为10.21±1.82、10.23±1.28，与癌旁组织的8.69±1.03相比，P均<0.05。原发灶组织SATB1表达与乳腺浸润性导管癌转移淋巴结数及临床分期有关(P均<0.05)。原发灶SATB1蛋白和BRMS1蛋白表达无相关关系(r=-0.523，P>0.05)，SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA表达量无相关关系(r=-0.093，P>0.05)。结论 乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1蛋白及mRNA呈高表达，BRMS1蛋白及mRNA呈低表达， SATB1蛋白及mRNA表达与乳腺浸润癌性导管癌的淋巴结转移和临床分期有关。

关键词：乳腺肿瘤；乳腺癌；乳腺导管癌；乳腺浸润性导管癌；核基质结合区结合蛋白1；乳腺癌转移抑制基因1

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.029

中图分类号：R737.9文献标志码：B

收稿日期：(2015-06-09)

乳腺浸润性导管癌约占乳腺癌的70%[1]，较容易出现淋巴结转移。核基质结合区结合蛋白1(SATB1)是一种核基质区结合蛋白，其高表达时患者预后较差，而乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)高表达时患者的预后较好。本研究观察了乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织中SATB1和BRMS1的表达变化，并探讨其意义。现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料 2013年3～2015年1月太原市妇幼保健院收治的乳腺浸润导管癌患者78例，均为女性，年龄31～82岁，均接受手术治疗，全部留取原发灶组织标本，其中52例同时留取腋窝淋巴结转移灶组织标本、63例同时留取癌旁组织标本。所有标本均于离体5 min内取材完毕，各种标本分别取两份。癌旁组织距肿瘤边缘至少2 cm，且均经病理检查证实为未发生癌变的正常乳腺组织。

1.2SATB1蛋白及BRMS1蛋白检测方法采用免疫组化SP法检测各组织中的SATB1、BRMS1蛋白，用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。受检组织切片染色后光镜下观察，于100倍视野下选取5个细胞，然后在400倍镜下随机观察每个视野的100个细胞，计算阳性细胞百分比，取5个视野的均值：无阳性细胞计0分，阳性细胞≤10%计1分、11%～50%计2分、51%～75%计3分、>75%计4分；同时根据细胞着色强度计分：不着色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，深棕色计3分。上述两分的乘积≥3判为阳性。

1.3SATB1 mRNA及BRMS1 mRNA检测方法采用实时荧光定量PCR法检测各组织中的SATB1、BRMS1 mRNA。取受检组织约50 mg，用TRIzol试剂提取RNA，紫外分光光度计测定RNA纯度，电泳法检测RNA的完整性。将RNA逆转录成cDNA，然后进行PCR扩增:95 ℃ 30 s、95 ℃5 s，60 ℃ 20 s，共40个循环。以ΔΔCt值表示目的基因的相对表达量。

1.4统计学方法采用SPSS17.0统计软件。计数资料比较用χ2检验，计量资料比较用方差分析、t检验，相关性分析用Pesrson直线相关分析法和Spearman等级相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1原发灶、淋巴结转移灶、癌旁组织中SATB1蛋白和BRMS1蛋白的表达比较原发灶、淋巴结转移灶中SATB1蛋白阳性表达率分别为75.6%(59/78)、82.7%(43/52)，与癌旁组织的28.6%(18/63)相比，P均<0.05；前两者相比，P>0.05。原发灶、淋巴结转移灶中BRMS1蛋白阳性表达率分别为25.6%(20/78)、23.1%(12/52)，与癌旁组织的87.3%(55/63)相比，P均<0.05；前两者相比，P>0.05。

2.2原发灶、淋巴结转移灶、癌旁组织中SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA的表达比较原发灶、淋巴结转移灶及癌旁组织SATB1 mRNA的相对表达量分别为7.93±1.42、7.27±0.42和9.88±1.28，原发灶、淋巴结转移灶是癌旁组织的3.79和6.12倍，二者与癌旁组织相比，P均<0.05。原发灶、淋巴结转移灶及癌旁组织BRMS1 mRNA的相对表达量分别为10.21±1.82、10.23±1.28和8.69±1.03，原发灶、淋巴结转移灶是癌旁组织的0.37和0.35倍，二者与癌旁组织相比，P均<0.05。

2.3原发灶SATB1表达与乳腺浸润癌性导管癌临床病理参数的关系原发灶SATB1蛋白及mRNA表达与乳腺浸润癌性导管癌转移淋巴结数和临床分期有关(P均<0.05)，与患者年龄、肿瘤直径、是否绝经无关(P均>0.05)，详见表1。

表1　 原发灶SATB1表达与乳腺浸润癌性

2.4原发灶SATB1与BRMS1表达的相关性原发灶SATB1蛋白和BRMS1蛋白表达无相关关系(r=-0.523，P>0.05)，SATB1 mRNA和BRMS1 mRNA表达量无相关关系(r=-0.093，P>0.05)。

3讨论

SATB1是属于核基质结合区的结合蛋白。SATB1在普通上皮细胞中会呈现低表达甚至不表达，而在具有高度侵袭性的乳腺癌组织中会呈现高表达。SATB1高表达会改变乳腺癌细胞的侵袭表型，进而使乳腺癌细胞出现转移。将高侵袭性乳腺癌细胞注射至小鼠体内，9周后在小鼠肺部发现转移结节，且肺组织中SATB1高表达[2]。BRMS1是最新发现的具有抑制肿瘤转移作用的基因，该基因存在多个磷酸化位点，BRMS1的表达和乳腺癌预后是否存在关系研究较少，且不同学者持有不同意见[3]。有研究[4]发现，BRMS1不能改变乳腺癌原发灶的生长，但是能有效抑制肿瘤发生转移，促进转移灶肿瘤细胞的凋亡。

本研究发现，乳腺浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织SATB1蛋白阳性表达率均显著高于癌旁组织，而BRMS1蛋白阳性表达率显著低于旁组织，癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶组织SATB1 mRNA的表达量是癌旁组织的3.79和6.12倍，与文献[5]报道相符。本研究还发现，原发灶SATB1蛋白及mRNA表达与乳腺浸润癌性导管癌转移淋巴结数以及临床分期有关，提示SATB1表达增强与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移存在较大关系，可以作为评估乳腺浸润性导管癌是否出现转移的指标之一。另外，本研究发现，乳腺浸润性导管癌原发灶组组织中SATB1和BRMS1表达无相关关系，也与文献[6,7]报道相符，提示SATB1和BRMS1之间可能无调节关系。

参考文献：

[1] 姚维深,周国华,张旭,等.Bcl-2和Beclin1及PTEN在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及相关性[J].广东医学,2013,34(10):1538-1540.

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[3] Niu Y, Wang L, Cheng C, et al.Increased expressions of SATB1 and S100A4 are associated with poor prognosis in human colorectal carcinoma[J].APMIS, 2015,123(2):93-101.

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