乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白的表达观察

乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白的表达观察

刘秀艳1，冯文博2

(1邯郸市妇幼保健院，河北邯郸056001；2邯郸市第二医院)

摘要：目的观察乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白的表达情况。方法女性乳腺癌患者48例、乳腺良性增生患者48例。手术留取乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织、乳腺良性增生患者的增生组织。免疫组化法检测各种组织标本中的Ezrin蛋白。结果乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达者分别为13、0、28、7例，阳性表达率为72.92%(35/48)；乳腺癌癌旁组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达者分别为15、20、13、0例，阳性表达率为27.08%(13/48)；乳腺癌良性增生组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达者分别为7、39、2、0例，阳性表达率为4.17%(2/48)；乳腺癌组织与乳腺癌旁组织、乳腺良性增生组织中Ezrin蛋白的阳性表达率相比，P均<0.05。Ezrin蛋白在三种组织中的阳性表达部位也不同。Ezrin阳性表达与乳腺癌组织学分级(SBR分级)、TNM分期、淋巴结转移、无病生存期(DFS)相关(P均<0.05)。结论 乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白的阳性表达率高，而且表达增强，其阳性表达与乳腺癌患者SBR分级、TNM分期、淋巴结转移、DFS有关。

关键词：细胞骨架连接蛋白；Ezrin蛋白；乳腺肿瘤；乳腺癌

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.027

中图分类号：R737.9文献标志码：B

基金项目：河北省科学技术项目(20122853)。

收稿日期：(2015-08-22)

通信作者：冯文博

随着现代肿瘤治疗技术的不断进展，乳腺癌患者5年生存率已达80%，但仍然有部分患者预后不佳，出现复发与转移，而且复发与转移的机制尚不清楚[1]。Ezrin蛋白是新发现的细胞骨架连接蛋白，参与细胞的黏附和运动，其与肿瘤细胞的生长和转移有着高度的相关性[2]。Ezrin蛋白在骨肉瘤、胰腺癌、肝癌等恶性程度高且转移速度快的肿瘤中呈高强度表达[3～5]。本研究对Ezrin蛋白在乳腺癌癌组织中的表达情况进行了观察。现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料2008年4月～2010年4月邯郸市妇幼保健院收治的、经病理检查确诊的乳腺癌患者48例，均为女性，年龄32～78岁。手术治疗中留取癌组织及癌旁正常乳腺组织(距病灶2 cm)。同期住院治疗、经病理检查确诊的乳腺良性增生患者48例，均为女性，其年龄与乳腺癌患者有可比性(P>0.05)，手术治疗中留取乳腺增生组织。

1.2Ezrin蛋白的检测采用免疫组化SP法[6]。受检标本切片(厚5 μm)，常规免疫组化SP法染色，DBA显色，脱水、透明、封片后镜检。PBS代替一抗作阴性对照。Ezrin蛋白阳性为细胞膜或细胞质中出现颜色较背景深的染色颗粒。在光学显微镜下，根据染色强度及阳性细胞百分比分别计分。按照染色强度计分：细胞无着色计0分，淡黄色计1分，棕黄色计2分，黄褐色计3分。按照阳性细胞百分比计分：取10个高倍视野，每个视野计数100个细胞，共1 000个细胞，根据阳性细胞数占总细胞数的百分比计分，阳性细胞数<10%计0分、10%～25%计1分、26%～50%计2分、>50%计3分。参考Fromowitz分级标准[6]，将上述两项计分结果相乘，乘积表示Ezrin蛋白的表达强度，按照乘积大小分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性四个层次，乘积0为阴性、1～2为弱阳性、3～4为阳性、>5为强阳性；阳性、强阳性判为阳性，阴性、弱阳性判为阴性。

1.3统计学方法采用SPSS18.0统计软件。计数资料比较用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1三种乳腺组织中Ezrin蛋白的表达比较乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、中度阳性、强阳性表达者分别为13、0、28、7例，阳性表达率为72.92%(35/48)；Ezrin蛋白表达在乳腺癌细胞膜及细胞质中，呈弥漫性分布的棕黄色颗粒，以弱阳性、阳性、强阳性表达于细胞膜者13例，以弱阳性、阳性、强阳性表达于细胞质者22例。乳腺癌癌旁组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达者分别为15、20、13、0例，阳性表达率为27.08%(13/48)；Ezrin蛋白表达在乳腺癌旁组织的腺导管上皮细胞及腺泡上皮细胞膜，呈黄色颗粒，以弱阳性、阳性表达于腺导管上皮细膜者8例，以弱阳性、阳性表达于腺泡上皮细胞膜者25例。乳腺癌良性增生组织中Ezrin蛋白呈阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达者分别为7、39、2、0例，阳性表达率为4.17%(2/48)；Ezrin蛋白表达在乳腺癌良性增生组织的上皮腔缘顶膜及细胞膜，呈淡黄色颗粒，弱阳性表达，上皮腔缘顶膜表达者41例、细胞膜表达者7例。乳腺癌组织与乳腺癌旁组织中Ezrin蛋白的阳性表达率相比，P<0.05。乳腺癌组织与良性乳腺增生组织中Ezrin蛋白的阳性表达率相比，P<0.05。乳腺癌旁组织与良性乳腺增生组织中Ezrin蛋白的阳性表达率相比，P<0.05。Ezrin蛋白在三种组织中的表达部位相比，P均<0.05。

2.2癌组织中Ezrin蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的关系48例乳腺癌患者中Ezrin蛋白呈阳性、强阳性表达者分别28、7例，即阳性表达共35例。Ezrin阳性表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤直径无关(P>0.05)，与组织学分级(SBR分级)、TNM分期、淋巴结转移、患者无病生存期(DFS)有关(P均<0.05)。详见表1。

表1　 癌组织中Ezrin蛋白表达与乳腺癌临床

3讨论

Ezrin蛋白为膜细胞骨架连接蛋白。Ezrin基因的N端有一个FERM结构区域，该区域能与跨膜蛋白细胞内的C端相连，而C端末端有一个F-肌动蛋白连接区域[2]。在生理状态下Ezrin蛋白能够参与细胞运动，维持细胞极性，维持细胞间以及细胞与细胞外基质的黏附，能够调节细胞免疫功能，与细胞衰老及凋亡有关[8,9]。Ezrin蛋白可以通过改变肿瘤细胞极性以及肿瘤细胞运动而影响肿瘤细胞的浸润和转移[10]。

本研究结果显示，Ezrin蛋白在乳腺癌组织中呈阳性及强阳性表达，在癌旁组织中呈弱阳性、阳性表达，在乳腺良性增生组织中基本均为弱阳性表达。乳腺癌组织Ezrin蛋白的阳性表达率明显高于乳腺癌旁组织及乳腺良性增生组织，乳腺癌癌旁组织Ezrin蛋白的阳性表达率也高于乳腺良性增生组织；Ezrin蛋白的表达强度为乳腺癌癌组织>乳腺癌癌旁组织>乳腺良性增生组织。在三种乳腺组织中Ezrin蛋白的阳性表达部位也不同，在乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白主要表达于乳腺癌细胞的胞质及胞膜上，而在癌旁组织及乳腺良性增生组织中Ezrin蛋白主要在乳腺导管上皮细胞、腺泡上皮细胞的细胞膜以及上皮腔缘顶膜表达。Ezrin蛋白在乳腺癌癌组织中的高表达及其主要表达于细胞膜和细胞质，可能促进了乳腺癌细胞的浸润和转移。

另外，本研究发现，乳腺癌癌组织中Ezrin蛋白的表达与乳腺癌SBR分级、TNM分期、淋巴结转移、DFS有关。观察癌组织中Ezrin蛋白的表达情况，有助于乳腺癌病理分级、分期、淋巴转移及预后的判断。

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