异常黏液质证卵巢早衰及异常黑胆质证卵巢早衰模型建立及相关生殖指标比较

2016-01-11屈亚琴,玛依热·吐尔洪,阿依古扎丽·艾麦提等

新疆医科大学学报 2015年4期

屈亚琴，玛依热·吐尔洪，阿依古扎丽·艾麦提，夏米西努尔·伊力克

(新疆医科大学基础医学院生物学教研室，乌鲁木齐830011)

摘要:目的研究维医异常黏液质与异常黑胆质型卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)病证大鼠模型的雌激素水平与生物学表征，为维医治疗POF病症的研究提供依据。方法选用30只性功能正常的Wistar雌鼠，随机分为异常黏液质证POF组(NP)、异常黑胆质证POF组(HP)以及正常对照组(N)，并分别建立异常黏液质证侯、异常黑胆质证侯,正常对照组正常环境饲养,对3组的相关生殖指标进行比较。结果异常黏液质、异常黑胆质均可导致POF发生，其主要雌激素水平检测提示均存在卵巢早衰，即血清雌二醇(E2)下降,促卵泡激素(FSH)及促黄体生成素(LH)上升，且与HP组大鼠雌激素变化水平相比，NP组明显更加符合卵巢早衰(P<0.05)；两组症候POF组大鼠在HE染色观察卵巢病理学改变与正常组比较无明显差异，解剖后卵巢、肾上腺组织重量明显大于正常组大鼠，差异有统计学意义(P<0.05)。结论异常黏液质证更容易导致POF。

关键词：异常黏液质；异常黑胆质；卵巢早衰

中图分类号：R-332文献标识码：A

doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2015.04.007

[收稿日期：2014-11-12]

基金项目：国家自然科学基金(30660207)

作者简介：阿衣古丽·哈热(1974-)，女(维吾尔族)，硕士，副主任医师，研究方向：肿瘤放化疗。

基金项目：新疆维吾尔自治区高校科研项目(20120420003707140)

作者简介：刘玉(1973-),女,硕士，副主任医师，研究方向：儿童血液病。

Premature ovarian failure rat models establishment in abnormal balgham and

abnormal savda and the comparative study on its reproductive index

QU Yaqin, Mayire Tuerhong, Ayiguzhali Aimaiti, Xiamixinuer Yilike

(CollegeofBasicMedicine,DepartmentofBiology,XinjiangMedicalUniversity,

Urumqi830011，China)

Abstract:ObjectiveTo study the estrogen levels and biological characterization of the premature ovarian syndrome rat models in abnormal balgham and abnormal savda in Uygur medicine for the research reference of the medical treatment for POF disorders. Method30 Wistar female rats were selected and divided randomly into POF Group (NP) with unusual mucus, POF Group (HP) with unusual savda and normal control group (N), and their syndromes were compared and analyzed in terms of the related reproductive indicators. ResultsUnusual mucus quality and unusual savda led to POF and the major estrogen levels suggested the premature ovarian failure, with the indicators of decreased serum levels of estradiol (E2), increased follicle stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH). The estrogen levels in NP group were more consistent with the syndromes of POF when compared with those in HP Group (P<0.05). There were no differences in HE staining and histological change in the ovarian pathology between NP/HP Group and N group. The weight of ovarian and adrenal glands were significantly greater than those of normal rats (P<0.05). ConclusionAbnormal mucus led to POF.

Key words: abnormal mucus quality; unusual savda; premature ovarian failure

卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)即女性在40岁之前出现4个月以上的持续闭经、生殖器官萎缩、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)及黄体生成素(luteinizing hormone，LH)水平升高、雌激素降低的一种内分泌性妇科疾病[1]。其发生率是正常成年女性的1%,闭经患者中POF的发生率为2%～10%[2]。维吾尔医学认为卵巢功能紊乱与人体内异常的体液聚积有关。为阐明维医临床中异常黏液质证POF与异常黑胆质证POF的生物学基础与发生、发展规律，本研究在建立异常黏液质与异常黑胆质症候动物模型的基础上，对异常体液所致的大鼠激素水平和生物学表征等的改变进行初步研究和综合评价，现报道如下。

1材料与方法

1.1主要仪器RQH-350 型人工气候箱(上海精宏实验设备有限公司)， BS-1105 型电子天平(北京赛多科斯天平有限公司)。

1.2实验动物通过阴道涂片筛选法(发情周期实验)选取性成熟的30只健康 Wistar 雌性大鼠(由新疆医科大学实验动物中心提供)，体质量(150±30) g，稳定饲养3 d后,分为异常黏液质证POF组(NP组， 10只)、异常黑胆质证POF组(HP组，10只)以及正常对照组(10只)。

1.3实验方法

1.3.1异常黏液质证POF组动物模型的建立[3]按照以往维吾尔医学模型建立标准[3]，采用湿寒环境、湿寒饲料等因素作用建立维医异常黏液质证POF动物模型并验证。

1.3.2异常黑胆质证POF组动物模型的建立[4]采用干寒饲养环境、干寒属性的饲料及间断足底电刺激、游泳、制动等多因素复合作用，建立维吾尔医学异常黑胆质证大鼠模型。

1.4观察指标实验模型组和正常对照组均随机饮食、饮水，正常对照组于正常环境中饲养。模型建立过程中每日观察大鼠生物学表征、体质量变化，依据生物学表征判定模型建立[3-4]后做相关雌激素水平检测，并对其卵巢、下丘脑、垂体和肾上腺组织的称重比较。

2结果

2.13组大鼠生物学表征比较NP组、HP组与N组生物学表征伴随造模时间延长而加重(表1)。从培养第3周开始NP组体质量增长明显大于HP组，除第5周外(P>0.05),其余各周差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.23组大鼠定量指标比较NP组FSH值(mIU/mL)明显高于HP组，差异有统计学意义(t=4.02,P<0.05);而两组LH、E2、PRL比较，差异无统计学意义(P>0.05),见表3。

2.33组大鼠卵巢各组织称重比较NP组与NP组大鼠卵巢组织和肾上腺重量均显著大于N组，其中NP组与N组卵巢组织重量比较差异有统计学意义(P<0.05),NP组与N组肾上腺重量比较差异有统计学意义(P<0.05)，其余各组差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

2.4电镜观察结果NP组与HP组卵泡闭锁较N组增多，且间质增生异常明显,NP组与HP组卵母细胞、透明带均可见正常的超微结构。

表1　3组大鼠第21天生物学表征比较

表2　NP组与HP组大鼠各期体质量均值比较(g, ±s)

表3　NP组与HP组雌激素水平比较( ±s)

表4　3组大鼠各组织称重比较(g, ±s)

3讨论

卵巢早衰属中医“经水早断”范畴[5]，近几年来已成为威胁妇女身心健康的疑难疾病，对中西医来说治疗均相当棘手。临床病因机致可见焦躁、易激惹或喜静胆小、抑郁寡欢等精神症状，也多可出现纳差等脾胃虚弱的表现[6]。根据卵巢早衰的前期研究[7]，从病因和模型雌鼠所表现的症状上来看，本研究中，异常黏液质证POF以及异常黑胆质证POF大鼠均表现出符合模型症状的各种表现，且随着时间的延续而症状明显加重。从体质量增长上来看，NP组大鼠在培养第3周后体质量增长明显大于HP组大鼠，除第5周外(P>0.05)外，其余各周差异均有统计学意义(P<0.05)，这可能与HP组大鼠长期接受多因素复合作用的刺激有关。在有关行为学表征上，NP组大鼠体态松弛、懒散虚胖、迟钝呆滞，而HP组大鼠则异常精干消瘦、过度活跃、神经紧张。这与帕提古丽·阿布拉[3]的描述一致。

维吾尔医学认为, 人体中的物质型病变是由体内异常体液所致,其中黏液质的属性是湿寒, 其以湿寒性属性防止胆液质热性属性的过盛, 以寒性属性调节血液质和胆液质的热性属性。黑胆质的属性是干寒,其以干寒性属性防止血液质湿热性属性的过盛, 以寒性属性调节血液质和胆液质的热性属性。一旦破坏它们之间的相互作用关系,便会聚积产生另一种导致疾病产生的异常体液[3]。本研究在维吾尔医学体液论基础上重建了大鼠异常黏液质证POF和异常黑胆质证POF模型，并对2种症候POF组大鼠的激素水平、生物学表征等进行了比较研究。实验结果表明，异常黏液质证POF组大鼠与异常黑胆质证POF组大鼠相比，其主要雌激素水平检测提示均存在卵巢早衰[8]，即血清雌二醇(E2)下降，促卵泡激素(FSH)及促黄体生成素(LH)上升，且与黑胆质证POF组大鼠雌激素变化水平相比，黏液质证POF组明显更加符合卵巢早衰(P<0.05)；两组症候POF组大鼠在HE染色观察卵巢病理学改变与正常组比较无统计学意义，解剖后卵巢、肾上腺组织重量明显大于正常组大鼠，差异有统计学意义(P<0.05)，可能与卵巢早衰所导致的肾上腺球状带显著增厚、细胞代偿性增生、醛固酮的分泌增多有关[9]。而下丘脑、垂体组织称重与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。异常体液的模型由症候到病证是一个渐进与发展的过程[10]。因此，本研究认为这可能与大鼠培养时间较短、激素水平的变化所导致生物学表征变化不明显及大鼠本身生理特异性等诸多因素有关。

综上所述，本实验证明维吾尔医学异常体液是可以导致POF发生的，在行为模式上异常黏液质证POF组主要表现为情绪低落、抑郁寡欢等精神症状，而异常黑胆质证POF组主要表现为易怒、焦虑不安等症状，且二者均有脾胃虚弱的表现；在激素水平上异常黏液质证POF组的变化更加符合其相关检验指标，由于造模时间限制，对于其发生发展的机制尚待进一步的研究加以证实。

参考文献：

[1]李花，赵新广.卵巢早衰病理因素研究现状及展望[J].中医药导报，2012,18(8):4-6.

[2]秦延讯, 郭春景.黄连在复方中药制剂提取中应该注意的问题[J] .光明中医,2008，5(5):595-596.

[3]帕提古力·阿布拉.维吾尔医体液学说的生理学意义探讨[J].中国民族医药杂志,2008,6(3):13-14.

[4]哈木拉提·吾甫尔,阿依努尔·买提斯迪克，努尔买买提·艾买提，等.异常黑胆质证载体动物模型的建立及其自然恢复反证[J].新疆医科大学学报，2006，29(10)：910-914.

[5]王占利，李坤寅，张玉珍.运用膏方调治卵巢早衰经验[J].辽宁中医杂志，2011 ，38(12):2341-2342.

[6]柴松岩，佟庆.诊治卵巢早衰经验[J].北京中医药，2009 ，28(3):196-197.

[7]孙莉莉，周郦楠.卵巢早衰动物模型造模[J].中国实用医药，2011，6(19)；229-230.

[8]谢梅青．卵巢早衰的病因[J]．实用妇产科杂志，2003．19(4)：193-195．

[9]张艳，张晔，周郦楠.雷公藤诱导卵巢早衰大鼠模型醛固酮的变化研究[J].中国实用医药，2012，7(3):26-27.

[10]阿地力江·伊明，范强.维医异常黏液质证候与阳痿病证大鼠性行为学改变的研究[J].中国男科学杂志,2011，25(9):20-23.

(本文编辑张巧莲)