西妥昔单抗联合化疗靶向治疗食管癌的疗效

西妥昔单抗联合化疗靶向治疗食管癌的疗效

张卉索智敏白玉1马许辉杨德生

(河南大学淮河医院消化内科，河南开封475000)

摘要〔〕目的检测分析西妥昔单抗识别的靶抗原表皮生长因子受体(EGFR)在食管癌组织中的表达，探讨西妥昔单抗联合化疗对食管癌的治疗作用。方法应用免疫组化方法检测80例术后食管癌患者原发病灶中EGFR的表达情况，并分为有靶点组和无靶点组。每组又随机分为实验组(西妥昔单抗联合化疗)和对照组(常规化疗)。随访3年，统计3年生存率、复发率及转移率。结果在有靶点组，实验组3年生存率高于对照组，复发率及转移率低于对照组(P<0.05)；在无靶点组，实验组与对照组无显著差异(P>0.05)。结论EGFR是食管癌靶向治疗的有效靶点，西妥昔单抗联合化疗是食管癌靶向治疗的有效方法。

关键词〔〕表皮生长因子受体；食管癌；靶向治疗

中图分类号〔〕R735.1〔文献标识码〕A〔

基金项目：河南省卫生厅资助课题(200803081)

通讯作者：赵宝生(1966-)，男，硕士，教授，主任医师，主要从事食管癌临床研究。

1新乡医学院病理学教研室

第一作者：张卉(1980-)，女，硕士，主治医师，主要从事消化道肿瘤临床研究。

食管癌发病率、死亡率分别占我国全部恶性肿瘤的第4位和第2位。多数临床研究证实食管癌术后5年生存率不超过20%〔1〕。因此，临床上急需研发治疗食管癌的新方法。靶向治疗，是在细胞分子水平上，针对已经明确的致癌位点来设计相应的治疗药物，药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会波及肿瘤周围的正常组织细胞〔2〕。目前，靶向治疗中研究最多的是表皮生长因子受体(EGFR)，本文探讨EGFR是否可以作为合适的治疗靶应用于食管癌的靶向治疗。

1对象与方法

1.1对象选取2008～2009年新乡医学院第一附属医院收治的80例适合手术的Ⅱ～Ⅲ期食管癌患者为研究对象。年龄46～79岁，男52例，女28例，术前均未接受任何放化疗。患者均签署知情同意书。

1.2试剂鼠抗人EGFR单克隆抗体购自Santa Cruz公司；SP试剂盒、DAB显色剂购自福州迈新生物技术有限公司。

1.3实验方法

1.3.1免疫组织化学检测对80例病人手术治疗，癌组织经常规10%甲醛固定、脱水、透明、石蜡包埋及切片。采用SP法，石蜡切片脱蜡和水化后，3%H2O2-甲醇消化内源性过氧化物酶的活性，修复抗原，0.5%小牛血清白蛋白封闭非特异性抗体，滴加一抗，滴加生物素化的二抗，滴加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶，DAB显色、水洗、苏木素复染、脱水、透明、中性树胶封片。显微镜下观察。

1.3.2结果判定免疫组织化学反应结果的判定标准，综合考虑切片中阳性细胞占所观察同类细胞数的百分比和阳性细胞着色强度两项指标，半定量判断结果。根据显色程度判断阳性强度：淡蓝色者为0分；淡黄色者为1分；棕黄色者为2分；棕褐色者为3分。按阳性细胞所占计数细胞百分比计分：0分为无阳性细胞，阳性细胞≤10%计1分，10%<阳性细胞≤50%计2分，50%<阳性细胞≤75%计3分，阳性细胞>75%计4分。染色强度与阳性细胞计分乘积0～2分计为(-)，3～5分计为(+)，6～9分计为()，10～12分计为()。

1.3.3分组按照EGFR染色结果，-判定为无靶点组，+～判定为有靶点组。两组患者又随机平分为实验组和对照组。

1.3.4治疗方法实验组：西妥昔单抗+常规化疗。西妥昔单抗使用方法及剂量如下：第1周初始剂量为400 mg·m-2·d-1(静脉滴注2 h以上)，以后每周维持剂量为250 mg·m-2·d-1(静脉滴注1 h以上)，输注速度1 ml/min开始，10 min内如无过敏则加速，最大速度不超过5 ml/min。每周用1次，共4次。每次使用西妥昔单抗前肌肉注射非那根25 mg以预防过敏。西妥昔单抗先于化疗药物使用，第2天应用化疗药物，采用顺铂+5-氟尿嘧啶的DF方案：顺铂20 mg·m-2·d-1，5-氟尿嘧啶750 mg·m-2·d-1，连续5 d静脉滴注，21 d为1个周期，连用4个周期。对照组化疗方案同实验组。

1.4随访观察出院后随访3年，随访内容包括了解患者症状、体征改善和生存情况等，不适复查CT。统计两组患者的三年生存率、复发率、转移率。

1.5统计学分析应用SPSS15.0软件，生存时间用Kaplan-Meier分析，各组率的比较采用χ2检验。

2结果

2.1EGFR在食管癌组织中的表达EGFR主要表达在癌细胞的细胞膜和细胞质。80例患者中共有48例EGFR表达阳性，阳性率60.0%，有32例表达阴性，阴性率40.0%，见图1。

EGFR阴性　　　　　　　　EGFR阳性 图1　EGFR在癌组织中的表达情况(SP，×400)

2.2有靶点组内实验组和对照组的疗效比较实验组3年生存率较对照组明显提高(66.7% vs 45.8%)；复发率(50.0% vs 66.7%)和转移率(41.7% vs 62.5%)明显降低(均P<0.05)。

2.3无靶点组内实验组和对照组的疗效比较实验组与对照组相比三年生存率(50.0% vs 43.8%)、复发率(68.8% vs 75.0%)和转移率(50.0% vs 56.3%)无显著性差异(P>0.05)。

3讨论

药物治疗是食管癌治疗的重要方法之一，但传统的化疗药物因缺乏靶点的选择性，不仅治疗方式不够个体化，而且常产生较为严重的毒副反应。随着对肿瘤发生、发展及转移过程中分子生物学机制研究的不断深入，分子靶点药物的出现为食管癌的治疗带来了新的希望。由于其拥有靶点明确、特异性强、不易耐药、对转移瘤也有较好的效果等特点，正成为研究热点〔3〕。EGFR是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一，主要参与细胞的增殖、生长、迁移、浸润与存活。EGFR信号通路的异常与肿瘤的恶性表型、正常细胞凋亡的抑制、血管生成以及肿瘤的转移密切相关〔4〕。在人类多种肿瘤组织中都存在EGFR异常激活，如非小细胞肺癌〔5〕、结直肠癌〔6〕、鼻咽癌〔7〕等的发生

都与肿瘤组织中EGFR的异常活化有关。EGFR的生物特性提示它能成为抗癌治疗的潜在靶点，因此人们有针对性地设计阻断EGFR信号传递的靶向抗癌药物。其中西妥昔单抗便是代表药物，它是目前唯一一个获批准上市的特异性针对EGFR的IgG1单克隆抗体。可与表达于癌细胞表面的EGFR特异性结合，并竞争性阻断EGFR和其他配体如肿瘤坏死因子α(TNF-α)和表皮生长因子(EGF)的结合。西妥昔单抗与HER结合后会刺激后者的降解，使HER的表达下调，进而阻断其酪氨酸激酶磷酸化以及细胞内信号转导途径，从而抑制癌细胞的增殖，诱导癌细胞的凋亡；还可减少基质金属蛋白酶和血管内皮生长因子(VEGF)的产生，从多发面发挥作用起到抗癌作用。体外实验和动物实验显示，西妥昔单抗可抑制过度表达EGFR的肿瘤细胞的增殖，而对缺乏EGFR表达的肿瘤细胞则没有抗肿瘤活性〔8〕。本研究免疫组化结果显示，EGFR主要表达在食管癌组织，癌旁组织和正常组织基本未见表达，这与王玉峰等〔9〕的研究结果一致。利用抗体对肿瘤特异抗原的选择性，西妥昔单抗也能特异性地靶向癌细胞，起到抗癌作用。本研究结果也发现，对EGFR表达阳性的患者，西妥昔单抗有显著的治疗效果。而对缺乏EGFR表达的患者，西妥昔单抗则不能起到抗癌作用，综上所述，EGFR可以作为合适的治疗靶应用于食管癌的靶向治疗。西妥昔单抗联合化疗为EGFR阳性的肿瘤患者带来新的希望，其可能成为食管癌综合治疗的一种新的有效方法。

4参考文献

1孙燕,石远凯.临床肿瘤内科手册〔M〕.北京:人民卫生出版社,2008:516-23.

2李岩,马杰.肿瘤分子靶向治疗学〔M〕.北京:人民卫生出版社,2007:63-5.

3何向明.分子靶点药物治疗食管癌的临床研究进展〔J〕.中国肿瘤,2009;18(4):299-303.

4唐炳华,王继峰.医学分子生物学〔M〕.北京:中国中医药出版社,2007:146-7.

5席妍,王彦荣,杜鹃.非小细胞肺癌组织EGFR、CXCR4的表达及其与MVD的相关性〔J〕.中国老年学杂志,2012;32(9):1550-2.

6王玉,方明治,金黑鹰,等.表皮生长因子受体靶向治疗结直肠癌的临床进展〔J〕.世界华人消化杂志,2010;18(17):1804-9.

7唐冬寒,张钰霞,蔡静.西妥昔单抗联合放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床疗效观察〔J〕.肿瘤药学,2013;2(3):119-21.

8崔岚,逄晓云,王晓珉.新型抗肿瘤药物西妥昔单抗〔J〕.中国药师,2005;18(4):332-4.

9王玉峰,王新帅,高社干,等.表皮生长因子受体在食管癌中的表达及临床意义〔J〕.中华实用诊断与治疗杂志,2012;26(9):868-70.

〔2014-08-17修回〕

(编辑赵慧玲/曹梦园)