2013年铜陵市人民医院细菌耐药性监测

胡志军， 朱娟娟， 潘晓龙， 张 盛， 陈 然， 潘 恺， 邢小平， 唐吉斌

·论著·

2013年铜陵市人民医院细菌耐药性监测

胡志军， 朱娟娟， 潘晓龙， 张 盛， 陈 然， 潘 恺， 邢小平， 唐吉斌

目的 了解安徽省铜陵市人民医院2013年临床分离细菌对抗菌药物的耐药状况。方法 共收集2013年临床分离的2 281株非重复细菌，采用纸片扩散法（K-B）进行药敏试验，按C LSI 2012年版标准判读药敏试验结果，采用 W H O N E T5.6软件进行数据分析。结果 分离菌中革兰阴性菌占76.5%，革兰阳性菌占23.5%。居前5位的分离菌依次为：大肠埃希菌479株（21.0%）、肺炎克雷伯菌360株（15.8%）、鲍曼不动杆菌271株（11.9%）、铜绿假单胞菌240株（10.5%）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）171株（7.5%）。耐甲氧西林金葡菌（M RS A）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（M R C N S）的检出率分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的38.6%和73.1%。甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株；未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因的耐药率较低，屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌。大肠埃希菌和克雷伯菌属中产 ESBL的检出率分别为50.5%和44.5%，产ESBL菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL菌株。检出对碳青霉烯类抗生素耐药的克雷伯菌属81株（21.8%，81/371）和大肠埃希菌8株（1.7%，8/479）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为75.0%和76.0%；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为29.8%和23.4%，对阿米卡星的敏感率最高，为94.0%。结论该院临床分离菌对抗菌药物的耐药性呈增长趋势，尤其耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的出现应引起高度关注，应加强抗菌药物的合理使用和医院感染控制措施。

细菌耐药性监测； 抗菌药物； 多重耐药菌； 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌

随着抗菌药物在临床的广泛应用，多重耐药和泛耐药菌株日益增多，已成为公共卫生领域的严重问题［1］，尤其是近年碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的逐渐增多，临床抗感染治疗面临着严峻的考验。我院微生物室近些年定期开展细菌耐药性监测工作，现将2013年监测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 收集2013年1—12月我院临床分离的2 281株细菌（剔除同一患者同一部位重复分离菌株）。

1.1.2 抗菌药物纸片和E试验条 抗菌药物纸片为英国O X OID公司产品。青霉素、万古霉素、亚胺培南E试验条为法国生物梅里埃公司产品。

1.1.3 培 养 基 药 敏 试 验用 M ueller-Hinton（M H）培养基、血液培养基等选用合肥天达诊断试剂有限公司和法国生物梅里埃公司产品。

1.2.1 菌种鉴定和药敏试验 细菌培养严格按照《全国临床检验操作规程》第3版［2］操作程序进行，细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司生产的 VIT E K-2型全自动微生物鉴定仪。药敏试验按C LSI推荐的 Kirby-Bauer纸片扩散法进行，结果判断依据C LSI 2012年［3］推荐的标准。质控菌株为大肠埃希菌 A T C C 25922、金黄色葡萄球菌（金葡菌）A T C C 25923和铜绿假单胞菌A T C C 27853。

1.2.2 ESB L及耐甲氧西林葡萄球菌（M R S）检测

采用C LSI推荐的方法检测ESB L，用头孢西丁检测甲氧西林耐药金葡菌（M R S A）和凝固酶阴性葡萄球菌（M R C N S）。

1.2.3 耐万古霉素肠球菌（V R E）检测 万古霉素纸片法测定为非敏感菌株者，用万古霉素和替考拉宁E试验条测定 M IC值确认。

1.2.4 统 计学处理 细菌药 敏试验结果采用W H O N E T 5.6软件统计分析。

2 结果

2.1 菌种构成及来源

2.1.1 菌种构成 2 281株细菌中革兰阴性菌占76.5%，革兰阳性菌占23.5%。居前5位的细菌依次为：大肠埃希菌479株（21.0%）、肺炎克雷伯菌360株（15.8%）、鲍曼不动杆菌271株（11.9%）、铜绿假单胞 菌 240 株 （10.5%）、金 葡菌171 株（7.5%）。见表1。2 281株细菌中，954株（41.8%）分离自呼吸道标本，506株（22.2%）分离自伤口脓液标本，457株（20.0%）分离自尿液标本，170株（7.5%）分离自无菌体液标本，141株（6.2%）分离自血液标本，43株（1.9%）分离自粪便标本，10株（0.4%）分离自其他标本。在呼吸道标本中列前4位的细菌分别是肺炎克雷伯菌（25.7%）、鲍曼不动杆菌（23.5%）、铜绿假单胞菌（16.7%）和金葡菌（8.6%）；伤口脓液标本中列前3位的细菌分别是大肠埃希菌（30.2%）、金葡菌（12.8%）和肺炎克雷伯菌（9.5%）；尿液标本中列前3位的细菌分别是大肠埃希菌（43.1%）、屎肠球菌（8.8%）和肺炎克雷伯菌（7.7%）；血液标本中列前3位的细菌分别是表皮葡萄球菌（22.0%）、大肠埃希菌（15.6%）和肺炎克雷伯菌（9.9%）。104株凝固酶阴性葡萄球菌（C N S）全部分离自血液、脑脊液等无菌体液标本。

2.1.2 标本来源 本组分离菌来自于重症监护病房（IC U）348株（15.3%）、普外科278株（12.2%）、呼吸科223株（9.8%）、泌尿外科201株（8.8%）、肾内科131株（5.7%）、急诊科129株（5.7%）、肿瘤科125株（5.5%）、骨科124株（5.4%）、干部内科111株（4.9%）、脑外科77株（3.4%）、烧伤科74株（3.2%）、感染 科 69 株（3.0%）、消 化 科 65 株（2.8%）、中医风湿科49株（2.1%）、心血管科48株（2.1%）、内分泌科48株（2.1%）、神经内科46株（2.0%）、儿科34株（1.5%）、胸外科32株（1.4%）、妇产科29株（1.3%）和其他科室40株（1.8%）。

552 Attentional bias towards emotional information in test-anxiety individuals: evidence from eye movement

表1 细菌菌种构成Table 1 Distribution of bacterial species in 2013

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的敏感率和耐药率

2.2.1 葡萄球菌属 金葡菌中M R S A占38.6%（66/171），C N S中 M R C N S占73.1%（76/104）。M R S A和M R C N S对β内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类和大环内酯类等抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金葡菌（M SS A）和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（M SC N S）。M R C N S对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑的耐药率明显高于 M R S A（69.7%对33.8%），但对利福平的耐药率则显著低于 M R S A（12.2%对55.6%）。M R S A 中分别有66.2%和44.4%菌株对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑和利福平敏感，M R C N S中分别有87.8%和61.4%的菌株对利福平和四环素敏感，未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的菌株。见表2。

2.2.2 肠球菌属 177株肠球菌属细菌中，粪肠球菌 占49.7% （88/177），屎 肠球菌 占47.5%（84/177），其他肠球菌占2.8%（5/177）。粪肠球菌对氨苄西林、青霉素和呋喃妥因的敏感率较高，分别为96.6%、96.6%和93.2%，屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌，未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的粪肠球菌和屎肠球菌。见表3。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility ofStaphylococcusstrains to antimicrobial agents in terms of resistance to methicillin（%）

表3 粪肠球菌和屎肠球菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility ofE.faecalisand E.faeciu mto antimicrobial agents（%）

2.2.3 链球菌属 54株链球菌属细菌中，β溶血链球菌（A、B、C、G群分别为9、8、1、3株）占38.9%（21/ 54），分离自无菌体液标本中的草绿色链球菌占37.0%（20/54），肺炎链球菌占24.1%（13/54）。β溶血链球菌和肺炎链球菌对青霉素敏感率100%，15.0%草绿色链球菌对其耐药；β溶血链球菌、肺炎链球菌和草绿色链球菌对红霉素耐药率分别为47.6%、92.3%和45.0%，对左氧氟沙星耐药率分别为4.8%、7.7%和15.0%；未发现对万古霉素耐药株。

2.3 主要革兰阴性杆菌对抗菌药物的敏感率和耐药率

2.3.1 肠杆菌科细菌 肠杆菌科细菌（除克雷伯菌属外）对阿米卡星和碳青霉烯类抗生素（亚胺培南和美罗培南）最敏感（敏感率＞90%），对头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的敏感性较高；克雷伯菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率（21.8%和20.5%）较高；大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为1.7%和1.5%；其他肠杆菌科细菌未检出对碳青霉烯类耐药的菌株。见表4。33株沙门菌属中，31株分离自粪便标本，各有1株分离自血液和引流液标本；沙门菌属对氨苄西林、甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑和环丙沙星的耐药率分别为69.7%、35.5%和6.1%，敏感率分别为30.3%、51.6%和75.8%；7株志贺菌属全部分离自粪便标本，福氏志贺菌4株，痢疾、鲍氏和宋内志贺菌各1株，7株志贺菌属有6株对氨苄西林耐药，4株对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑耐药；5株对环丙沙星敏感。

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility ofEnterobacteriaceaespecies to antimicrobial agents（%）

2.3.2 大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌中产ESB L株 大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌中产 ESB L株分别占50.5%（242/479）、44. 5%（165/371）和21.4%（3/14）。大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESB L菌株对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类和氨基糖苷类等抗菌药物的耐药率均显著高于非产ESB L菌株，产ESB L克雷伯菌属细菌对大多数抗菌药物的耐药率均高于大肠埃希菌。见表5。

2.3.3 不发酵糖革兰阴性杆菌 不动杆菌属中以鲍曼不动杆菌为主（94.4%，271/287），该菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率≥75%，对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低（48.3%），对阿米卡星的敏感率最高（43.4%），对大多数监测抗菌药物的耐药率均＞70%；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为29.8%和23.4%；对阿米卡星的敏感率最高，为94.0%，对哌拉西林-他唑巴坦、环丙沙星、头孢吡肟和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率均＜20%。嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素和左氧氟沙星的敏感率均＞90%。见表6。

2.3.4 肠杆菌科细菌中碳青霉烯类抗生素耐药株

我院2011年首次监测到碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌（C R E），近2年来此类耐药株显著增多。2011年监测到4.7%（8/171）的耐碳青霉烯类克雷伯菌属细菌和1株耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌；2012年监测到21.2%（54/255）耐碳青霉烯类克雷伯菌属细菌和0.8%（3/379）耐碳青霉烯类大肠埃希菌；2013年监测到21.8%（81/371）耐碳青霉烯类克雷伯菌属细菌和1.7%（8/479）耐碳青霉烯类大肠埃希菌。

表5 大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBL与非产ESBL株对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of ESBLs producers and non-ESBLs producers to antimicrobial agents（%）

表6 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram negative bacilli to antimicrobial agents（%）

2.4 多重耐药菌和泛耐药革兰阴性杆菌监测情况

多重耐药菌株是指对检测的3类或以上不同化学结构的抗菌药物同时呈现耐药的细菌。多重耐药菌在鲍曼不动杆菌中占75.6%（205/271），大肠埃希菌中占50.5%（242/479），克雷伯菌属中占46.4%（172/371），金葡菌中占38.6%（66/171），铜绿假单胞菌中占16.3%（39/240）。本文中泛耐药革兰阴性杆菌指革兰阴性杆菌对除替加环素和黏菌素外全部测试抗菌药物耐药的细菌。泛耐药鲍曼不动杆菌检出率5.5%（15/271），泛耐药克雷伯菌属检出率0.3%（1/371）。

3 讨论

本次监测结果与本院2012年［4］相比，临床分离的总菌株数增加13.9%。除志贺菌属、变形杆菌属和枸橼酸杆菌属有所减少外，大多数肠杆菌科细菌都有所增多，其中肺炎克雷伯菌所占比率上升至第2位，与近 2年中 国C HIN E T 监测［5-6］和上海地区监测数据［7-8］相一致，也与我院这2年碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌增多有关。

本次监测资料显示，我院M RSA和 M RC NS的检出率分别为38.6%和73.1%，低于近2年中国C HIN E T监测和上海地区监测数据［5-8］。金葡菌中M RSA的检出率与2012年（47.6%）相比有明显下降趋势，这与相关报道的趋势较一致［5-8］，并且金葡菌对大多数抗菌药物的耐药率均有所降低，仍未发现对万古霉素和替考拉宁不敏感的菌株。肠球菌属中仍以粪肠球菌（49.7%）多于屎肠球菌（47.5%），但屎肠球菌有明显上升的趋势，屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率显著高于粪肠球菌，但对四环素的耐药率低于粪肠球菌；耐药率与往年相比无明显变化。

本次监测数据显示，大肠埃希菌和克雷伯菌属中ESB L的检出率分别为50.5%和44.5%，与往年相比克雷伯菌属增加明显，并且高于近2年中国C HIN E T 监 测和上 海 地 区 监测数据［5-8］。 另 外，2013年监测到21.8%（81/371）的耐碳青霉烯类克雷伯菌属细菌和1.7%（8/479）耐碳青霉烯类大肠埃希菌，与前2年相比，上升趋势明显，并且已经高于2012年中国 C HIN E T监测和上海地区监测数据［6，8］。耐碳青霉烯类克 雷伯菌属 细菌的 科室分布仍以IC U为主（占60.5%），提示可能存在耐药克隆株的传播，需要严密监测，并对相关科室进行流行病学调查，查找感染源和传播途径，采取有效的感染控制措施。该类细菌常带有多种耐药基因，导致对多数或全部现有抗菌药物耐药，成为临床治疗的难题［9-11］。目前有资料显示，多 黏菌素类、替 加环 素、磷霉素和阿米卡星对C R E菌株有良好的抗菌活性，且推荐上述抗菌药物联合疗法，可采用的给药方案如黏菌素或阿米卡星联合碳青霉烯类，黏菌素联合替加环素，阿米卡星联合磷霉素等，但不推荐多黏菌素 与 阿米 卡 星联 合［12-13］。

2013年细菌耐药性监测结果显示，鲍曼不动杆菌已经由往年我院医院感染第2位病原菌降为第3位［4］，该菌的耐药现象依然非常严重，但对美罗培南（94.4%下降为76.0%）和亚胺培南（84.0%下降为75.0%）的耐药率下降较为明显。铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率与往年相比无明显变化，该菌对阿米卡星的敏感率达94.0%，对环丙沙星、头孢吡肟、庆大霉素和头孢他啶的敏感率＞70%，临床治疗该细菌感染时应注意其耐药性变化。嗜麦芽窄食单胞菌的检出率有增加趋势，需要引起重视，该菌对C LSI推荐的左氧氟沙星、甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑和米诺环素的耐药率均较低；对左氧氟沙星和米诺环素的敏感率均＞90%。

本次监测数据显示我院多重耐药革兰阴性杆菌呈增多趋势，且伴有少量泛耐药的鲍曼不动杆菌和克雷伯菌属，须引起高度重视。

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Surveillance of bacterial resistance in Tongling People′s Hospital during 2013

H U Zhijun，Z H UJuanjuan，P A NXiaolong，Z H A N GSheng，C H E NRan，P A N K ai，XI N G Xiaoping，T A N G Jibin. （Departmentof Laboratory M edicine，Tongling People′s H ospital，Tongling A nhui 244000，China）

Objective To investigate the antimicrobial resistance of clinicalisolates in Tongling People′s H ospital during 2013. M ethods A total of 2 281 nonduplicate clinicalisolates were collected.Kirby-Bauer disc diffusion method was em ployed to study the antimicrobial susceptibility.The data were analyzed with W H O N E T 5.6 software according to C LSI 2012 breakpoints. Results The top 5 m ost frequently isolated microorganisms wereE.coli（479，21.0%），K.pneu moniae（360，15.8%），A. bau m annii（271，11.9%），P.aeruginosa （240，10.5%），S.aureus （171，7.5%）.Gramnegative and grampositive microorganisms accounted for 76.5% and 23.5%，respectively.The prevalence of methicillin-resistant strains inS.aureus（M RS A）and coagulase negativeStaphylococcus（M R C N S）was 38.6%and 73.1%，respectively.The resistance rates of M R strains to beta-lactams and other antimicrobial agents were m uch higher than those of M S strains.No staphylococcal strain was found resistant to vanco m ycin or teicoplanin.E.faecalisshowed relatively lower resistance to penicillin，am picillin and nitrofurantoin.E.faeciu mstrains were m ore resistant thanE.faecalisto m ost of the antibiotics tested.A pproximately 50.5%ofE.coliand 44.5% ofKlebsiellaisolates produced extended-spectru mbeta-lactamases（ESBLs）.The ESBLsproducing strains were significantly m ore resistant to m ost of the antibiotics than the corresponding non-ESBLs-producing strains.The prevalence of carbapenem-resistant strains was 21.8% （81/371）inKlebsiellaspp.and 1.7%（8/479）inE. coli.The percentage ofA.bau m anniistrains resistant to imipenem and meropenem was 75.0% and 76.0%，respectively.A nd 29.8%and 23.4% of theP.aeruginosastrains were resistant to imipenem and meropenem.Nearly all（94.0%）P.aeruginosaisolates were susceptible to amikacin.Conclusions There appears a trend ofincreasing resistance in the clinical bacterialisolates in this hospital，especially the carbapenem-resistantEnterobacteriaceae，w hich is of great concern.It is mandatory to take effective antibiotic policy and infection control measures.

bacterial resistance surveillance；antimicrobial agent；m ulti-drug resistant bacteriu m；carbapenem-resistant Enterobacteriaceae

R378

A

1009-7708（2015）01-0017-07

2014-03-27

2014-05-22

安徽省铜陵市卫生局科研课题资助项目（卫科研［2013］14号）。

铜陵市人民医院检验科，安徽铜陵 244000。

胡志军（1982—），男，硕士，主管检验师，主要从事临床微生物检验和细菌耐药机制研究。

潘晓龙，E-mail：panxl1030@msn.co m。