七星对月汤联合参蛇洗剂对小鼠慢性皮炎湿疹模型的药效学研究

杨道秋

(山东烟台第107 医院皮肤科，山东 烟台 264002)

慢性皮炎湿疹是一种因变态反应引起的皮肤疾病，病情反复缠绵，极难治愈，患者主要表现为瘙痒症状。由于本病较之急性反应更为复杂多变，增加了该病的治疗难度和复杂性。随着本病发病率的攀升，加大对新药开发力度的追求成为了研究重点［1］。参蛇洗剂主要是由蛇床子、当归、冰片、苦参、黄柏以及大黄等诸味中药组成，具有祛风润燥、抗炎抑菌、凉血活血的功效［2］。有实验报道证实［3］，运用参蛇洗剂治疗小鼠变应性接触性皮炎，可改善小鼠变应性接触性皮炎症状。七星对月汤是广西壮族民族地区的经验方，其具有疏风止痒、散热解毒的功效。本研究通过建立小鼠慢性皮炎湿疹模型，对七星对月汤外洗联合参蛇洗剂外涂的药效学进行探讨。

1 材料与方法

1.1 实验动物：自烟台鲁银药业有限公司(许可证号：SCXK(鲁)2011 -0002)，购入小鼠48 只，雄性，体质量23 ～26g，清洁级BALB/c。饲养条件：虚拟清洁级动物房内，湿度40% ～60%，温度20℃-25℃。常规条件下饲养3d 后纳入实验。

1.2 实验方法

1.2.1 建模、分组与给药：将48 只小鼠随机分为4 组，每组各有小鼠12 只，分别设定为对照组、模型组、阳性对照组、用药组。参考李咏梅［4］报道中关于小鼠皮炎湿疹建模方法，具体方法为：取小鼠腹部脱毛，范围3cm ×3cm，第1日取7% DNCB 丙酮橄榄油溶液100μl 致敏，取0.5%DNCB 溶液20μl 于第5d、第14d 在小鼠双耳内外侧均匀涂抹，行多次激发。空白对照组则在小鼠耳部和腹部均匀涂抹丙酮橄榄油溶液(4：1)。初次激发之后24h 开始给药，用药安排为：对照组(75%酒精)，模型组(75%酒精)，阳性对照组(1%氯化可的松溶液)，用药组(七星对月汤外洗，参蛇洗剂1：1)。每日涂抹2 次，每次100μl，用玻璃棒蘸取对内外侧耳反复涂抹5s 左右，直至最后1 次激发后第3d。

1.2.2 标本采集及指标检测：(1)耳厚度检测：分别于初次激发之前、每次激发之后24h、最后1 次激发后第3d，对小鼠双耳厚度进行测定。(2)耳变应反应评分：每次激发之后24h、最后一次激发后第3d，观察小鼠双耳水肿、红斑、抓痕，并根据该反应评估双耳变态反应，最高分值为8分。

1.3 统计学处理：运用SPSS 20.0 统计学软件分析，以均数±标准差(χ±s)表示，运用方差检验多个样本间，方差不齐则运用秩和检验，组间样本采用t 值检验，计数资料采用秩和检验。若P＜0.05，即表示有统计学意义。

2 结果

第5d4 组小鼠耳厚度对比无差异(P＞0.05);对照组耳变态反应显著低于模型组、阳性对照组、用药组(P＜0.05);第14d 对照组耳厚度、耳变态反应无变化(P＞0.05);模型组耳厚度、耳变态反应均显著高于对照组、阳性对照组与用药组(P＜0.05，P＜0.01);用药组耳厚度、耳变态反应与阳性对照组无差异(P＞0.05)，见表1。

表1 建模后第5d、第14d 小鼠耳厚度与耳变态反应变化

3 讨论

参蛇洗剂由蛇床子、当归、冰片、苦参、黄柏以及大黄等中药组成，方中苦参多用于肝炎、肠炎、AD 以及湿疹等疾病的临床治疗［5］。苦参中含有的氧化苦参碱和苦参碱是其主要的药效成分，经药理学实验证实，其在抑制炎症上效果显著［6］。有学者通过体外实验发现［7］，苦参中含有的苦参碱，可对P 物质受体表达进行抑制，使成纤维细胞分泌的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-1β、IL-8 以及P 物质诱导的HaCaT 细胞受抑，另还可促使HaCaT 加速IFN -γ 的分泌。有学者通过研究发现［8］，给予大鼠肠黏膜微血管内皮细胞不同浓度的苦参碱，发现脂多糖(LPS)可受到抑制，另还可激发IL-8、IL -6 以及可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)的快速生成。

根据慢性皮炎湿疹的临床表现来看，其以“瘙痒-搔抓-苔癣化”为恶性循环，为此，在该病的治疗中，我们主要对瘙痒进行改善［9］。现代药理学研究发现，黄柏具有非常显著的抗炎、抗菌功效［10］;当归则能够对免疫系统和微循环进行调节［11］。中医认为导致慢性皮疹湿疹的病机主要是经络瘀阻，湿热久恋致使肌肤失养，引发该病［12］。故以"疏泄与润泽"的理论为基础，选用当归、黄柏，取当归养血活血润燥，黄柏清热燥湿的功效。冰片甚少单独用于临床，多将其作为佐药和引药。有动物实验证实［13］，为2%巴豆油合剂诱发炎症反应小鼠提供5%冰片乳剂，可对炎症反应达到显著的抑制功效，另研究者［14］为蛋清性足跖肿胀小鼠提供冰片腹腔注射，发现抑制功效显著。有报道［15］通过为Ⅱ度烫伤小鼠提供芦荟冰片烧伤膏，发现用药90min 后取得了非常显著的镇痛功效，并且还可促使小鼠耳廓肿胀症状得到有效改善。另七星对月汤主要有大叶蛇、七星剑、红椿皮和对月草等壮药组合而成，其以调气解毒为原则，调气以疏畅三道两路为气机，使阴阳升降有道，气血均行通达。解毒以清除阻滞两路之毒邪，从而达到天地人三气同步而病自安，瘙痒自止。在本研究中，采用给予小鼠参蛇洗剂，结果显示，用药组小鼠的耳厚度、变应反应评分与模型组对比，均更低(P＜0.05)。

综上所述，七星对月汤联合参蛇洗剂可改善慢性皮炎湿疹模型小鼠的耳厚度、变应反应评分，这表明七星对月汤与参蛇洗剂在未来临床应用中，或许可用于慢性皮炎湿疹患者的治疗。

［1］李建广，杨占迎，梁丽英.中药药浴治疗皮炎湿疹类皮肤病疗效观察［J］.中国实验方剂学杂志，2010，15(7)：236-237.

［2］李晏.复方参蛇洗剂的研制和评价［J］.药学实践杂志，2011，28(5)：372 -375.

［3］金慧玲，张汝芝，余其斌.小鼠慢性皮炎-湿疹模型的建立［J］.蚌埠医学院学报，2002，26(3)：193 -194.

［4］李咏梅，李晓睿.青石软膏对小鼠慢性皮炎湿疹模型的影响［J］，中西医结合学报，2009，7(12)：1164 -1166.

［5］陈慧芝，包海鹰，诺敏，等.苦参的化学成分和药理作用及临床研究概况［J］.人参研究，2010，21(3)：31 -37.

［6］张丽华，陈邦恩，潘明佳.苦参碱药理作用研究进展［J］.中草药，2009，39(6)：1000 -1003.

［7］鲍娇琳，陆金健，陈修平，等.苦参碱与氧化苦参碱抗肿瘤作用及其机制的研究进展［J］.中药新药与临床药理，2012，22(3)：369 -373.

［8］王素军，王广基，李晓天，等.氧化苦参碱大鼠肠道吸收机理及吸收部位的研究［J］.中国临床药理学与治疗学，2005，9(12)：1326 -1329.

［9］刘红兵，张小鹏，王燕燕，等.复方除湿洗液对慢性皮炎-湿疹小鼠模型的药效学观察［J］.时珍国医国药，2011，21(9)：2298 -2299.

［10］杨周平，武志军.中药黄柏的药理作用和临床应用研究［J］.甘肃医药，2010，28(3)：329 -331.

［11］李曦，张丽宏，王晓晓，等.当归化学成分及药理作用研究进展［J］.中药材，2013，4(6)：1023 -1028.

［12］王少英，曹克平.论皮炎湿疹类皮肤病的中医治疗［J］.临床医药文献电子杂志，2014，1(13)：2428，2430.

［13］李育卿，魏玉辉，张建萍，等.甘草酸单铵乙醇脂质体凝胶对小鼠湿疹的疗效［J］.中成药，2012，34(4)：640 -645.

［14］魏楚蓉，伍赶球.冰片的药理作用及其机制研究进展［J］.国际病理科学与临床杂志2010，30(5)：447 -451.

［15］蔡瑞宏，姚宏，张亚锋，等.芦荟冰片烧伤膏的生肌、镇痛及抗炎作用［J］，中国医院药学杂志，2007，27(2)：170 -172.