尼群地平杂质A的合成及结构确认①

许宏昌，张红军，王月娥

(大连弘丰制药有限公司，辽宁 大连 116052)

尼群地平杂质A的合成及结构确认①

许宏昌，张红军，王月娥

(大连弘丰制药有限公司，辽宁 大连 116052)

目的：合成尼群地平杂质A并确认结构。方法：尼群地平于冰醋酸和稀硫酸中与硫酸铈反应得杂质A。结果：收率约70%。结论：所得产物经UV、IR、MS和HMR等确认其结构。

尼群地平；尼群地平杂质A；合成；结构确认

尼群地平(Nitrendipine)为第二代二氢吡啶类钙拮抗剂，中国药典二部2010年版[1]和欧洲药典EP8.0版[2]均收载。2, 6-二甲基-4-(3-硝基苯基)吡啶-3, 5-二甲酸甲基乙基酯为尼群地平的有关物质之一，英国药典2000版及欧洲药典4.0版即开始将其作为关键控制杂质，称之为杂质A(Nitredipine Impurity A)。为提高尼群地平药品标准的需要，我们于2003年合成了杂质A并经UV、IR、MS和HMR等确认其结构。该物质经中国药品生物制品检定所岳志华等[3]复核，正式列入中国药典二部2010年版作为国家对照品分发并称之为杂质I。

1 仪器与试药

1.1 仪器

YRT-3熔点仪(天津大学精密仪器厂)，UV-2102OPCS型紫外可见分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司)，Avatar 360型红外光谱仪(美国尼高力公司)，HP 110-MSD 型质谱仪(美国惠普公司)，Varian INOVA 400型核磁共振仪(美国瓦里安公司)。

1.2 试药

尼群地平(大连弘丰制药有限公司)，硫酸铈(Ce(SO4)2)·4H2O(分析纯)，杂质A欧洲对照品(EP)(购自英国)。

2 方法

2.1 杂质A的制备

尼群地平杂质A的合成路线如图1。具体方法如下：尼群地平0.5g，溶于冰醋酸20mL和稀硫酸10mL中，加邻二氮菲指示液2滴，搅拌下缓慢滴加0.1mol/L硫酸铈溶液15.1mL至红色消失；调pH近中性，放置析出沉淀，滤出沉淀，水洗，于40℃以下干燥，得白色结晶粉末0.35g，收率70%。

图1 合成路线

2.2 测定方法2.2.1 熔点测定

取杂质A适量，研成细粉，按中国药典2005版附录熔点测定第一法测定熔点。

2.2.2 紫外测定

取杂质A适量，用无水乙醇制成每1mL中约含20μg的溶液。将溶液置1cm石英吸收池内，以无水乙醇为参比，在可见-紫外分光光度计上，于200～400nm扫描，记录紫外吸收光谱及其数据。

2.2.3 红外测定

取杂质A约1mg，按溴化钾压片法制备红外扫描试样，于红外分光光度计上于400～4000cm-1区间扫描，记录红外光谱及主要光谱数据。

2.2.4 质谱测定

称取杂质A适量，置于棕色容量瓶中，加入甲醇进行溶解并稀释，配制浓度为0.1mg/mL的供试品溶液。设定离子源为ESI源，流动注射泵直接进样的流速为5μL/min，毛细管电压为4000V，毛细管温度为325℃，鞘气流速为10L/min，辅助气流速为0.15L/min，碰撞气为氦气，鞘气和辅助气为氮气，质荷比的扫描范围为210～400m/z，在正离子模式下，进行一级离子全扫描，记录杂质A的质谱图及各离子的数据。

2.2.5 核磁共振谱测定

取杂质A适量，置于直径5mm核磁共振样品管中，加入适量的氘代三氯甲烷使其完全溶解。在测试温度25℃，环境湿度35%下，调整仪器的观察频率、谱宽、脉冲宽度、采集时间、脉冲延迟时间、累加次数等参数，经锁场、匀场后测定杂质A样品的氢谱的质子化学位移值。化学位移δ精确到±0.01ppm，偶合常数精确到±0.1Hz。另按照碳核磁共振波谱仪操作规程，调整仪器的参数，分别以适宜宽度的脉冲序列，测定杂质A样品的碳化学位移值。

3 结果与讨论

3.1 结果

3.1.1 熔点

毛细管法测得杂质A的熔点为mp 60.5～61.5℃，与欧洲对照品一致。

3.1.2 紫外光谱

尼群地平杂质A的紫外吸收图谱没有最大吸收峰，并与欧洲对照品完全一致。

3.1.3 红外图谱

尼群地平杂质A及其欧洲对照品(EP)的特征红外吸收峰位置(cm-1)、透光率(T%)见来源见表1。

杂质A的红外吸收图谱与欧洲对照品(EP)所得图谱完全一致。另与尼群地平的红外图谱比较，杂质A缺少一个3318cm-1γ(NH)峰，与其结构特征相符。

表1 杂质A与其欧洲对照品的特征红外吸收峰

3.1.4 质谱测定

正离子扫描方式下，杂质同A的质谱图见图2。分析图1得到，质荷比(m/z)359，相对强度12%的准分子离子峰为杂质A的加氢峰；质荷比381的基峰为杂质A的加钠峰，分子离子峰的m/z与杂质A的计算分子量358符合。

图2 杂质A质谱图

3.1.5 核磁共振谱位移归属

杂质A的1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振谱位移归属分别如下：

1H-NMR(CDCl3) 谱位移归属δ/ppm：1.08(3H,t,7.14,11-CH3)，2.63(3H, s, 2-CH3)，2.64(3H, s, 6-CH3)，3.59(3H,s,9-CH3)，4.06(2H, q, 7.14, 10-CH2)，7.57 (1H, m, 5′或6′-H)，7.68(1H, m, 6′或5′-H)，8.18 (1H, m, 2′-H)，8.27 (1H, m, 4′-H)。

13C-NMR(CDCl3)谱位移归属 δ/ppm：156.4(C-2)，126.7(C-3)，143.7(C-4)，126.5(C-5)， 156.3(C-6)，23.3(C-2-CH3)， 23.3(C-6-CH3)，52.6(C-9)，61.8(C-10)，13.9(C-11)， 167.9(C-7)，167.3(C-8), 150.0(C-1′)，123.6 (C-2′)，138.2(C-3′)，123.3 (C-4′)，129.4(C-5′)，134.4(C-6′)。

3.2 讨论

杂质A的制备方法为典型的二氢吡啶环氧化脱氢反应，在所用条件下可瞬间精确定量完成。杂质A的熔点、紫外吸收图谱及红外吸收图谱与欧洲对照品(EP)完全一致，并参照尼群地平的红外图谱作为旁证。结合质谱所得分子量与结构相符，可以确认其结构。1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振谱位移归属完全支持结构特征。

[1]国家药典委员会. 中国药典2010年版二部[S]. 2010，232

[2]Council of Europe strasbourg. European Pharmacopoeia[S]. 8.0 Edition. 2859-2860

[3]岳志华, 牛秀华, 张启明. 关于中国药典与英国药典(2005年版)尼群地平原料和片剂中有关物质检查HPLC方法的比较与讨论[J]. 中国药品标准, 2007, 8(5):5-6

Synthesis and determination of Nitrendipine Impurity A

XUHong-chang,ZHANGHong-jun,WANGYue-e

(Dalian Hongfeng Pharmaceutical Co., Ltd,Dalian 116052, China)

Objective: To compound Nitrendipine Impurity A. Methods: Impurity A was obtained by Nitrendipine and cerous sulfate in a mixture of acetic acid and dilute sulfuric acid. Results: The yield was about 70%. Conclusion: The structure was determined by UV, IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR.

Nitrendipine; Nitrendipine Impurity A; synthesis; structure determined

许宏昌(1953～)男，辽宁丹东人，高级工程师。

R284.1

A

1008-0104(2015)01-0026-02

2014-05-11)